Caracterização genotípica e biológica de isolados de Toxoplasma gondii no Brasil

• Autor(a) principal: Beatriz de Souza Lima
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEL
• Texto Completo: http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000231101

O isolamento de Toxoplasma gondii por meio de bioensaio em camundongos é uma metodologia bastante utilizada para auxiliar estudos sobre a patogenia e virulência de cepas isoladas em amostras humanas, animais ou ambientais. T. gondii foi o causador de um surto de grandes proporções no ano de 2018 no município de Santa Maria ? RS. Foram confirmados 809 casos, sendo 114 gestantes, com três óbito fetais, 10 abortamentos, e 22 casos de toxoplasmose congênita (TC). Este trabalho teve por objetivo caracterizar genotipicamente 13 cepas isoladas de diferentes espécies, bem como, isolar e genotipar o parasita presente nas amostras de placenta humana obtidas durante o surto de toxoplasmose no município de Santa Maria, além de verificar a virulência dessas cepas em camundongos. Todas as amostras também foram submetidas ao teste de virulência em camundongos, para avaliar a curva de sobrevivência, onde foram realizados inóculos nas diluições 105, 10?, 10³, 10² e 10 taquizoítos por mL e posteriormente inoculados em camundongos por via intraperitoneal. A caracterização genotípica dos isolados foi realizada pela PCR-RFLP, utilizando os 11 marcadores genéticos (SAG1, 5?-3?SAG2, alt. SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico), e clivados com enzimas de restrição. Das 13 cepas analisadas foi possível caracterizar seis genótipos diferentes, sendo quatro distribuídos aos genótipos, #21, #65, #166 bem como dois genótipos novos ainda não descritos no ToxoDB. A comparação das curvas de sobrevivência dessas cepas foi avaliada de acordo com o inóculo de 10³ taquizoítos/mL, sendo que apenas duas delas não tiveram características semelhantes a cepa de referência RH de alta virulência. Os cinco isolados de placenta humana de Santa Maria demonstraram padrão idêntico para os 10 marcadores genéticos, e não foi associado a nenhum genótipo dos tipos clonais típicos I, II e III, sendo considerados virulentos pois houve mortalidade de 100% em animais inoculados com doses de 105, 10? e 10³ e 10² taquizoítos/ml compatíveis com cepas de alta virulência como a RH. As cepas analisadas confirmam a elevada diversidade genotípica e biológica dos isolados brasileiros, bem como, a origem a partir de um único isolado no surto em Santa Maria. (Nota: Neste resumo, o numeral 105 deve ser lido como dez elevado à quinta potência).