Desenvolvimento, caracterização e avaliação de nanopartículas contendo curcumina e metotrexato em células de adenocarcinoma de pulmão (CALU-3)

• Autor(a) principal: Rudnik, Loanda Aparecida Cabral
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEPG
• Texto Completo: http://tede2.uepg.br/jspui/handle/prefix/2818
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA; Curcumina; Metotrexato; Nanopartículas poliméricas; Glicoproteína P.; Efeito sinérgico; Curcumin; Methotrexate; . Polymer nanoparticles.; P glycoprotein; Synergistic effect

Curcumina (CUR) é um composto polifenólico extraído dos rizomas de Curcuma longa L. e possui vários efeitos biológicos, como anti-inflamatório, antioxidante e antitumoral. O metotrexato (MTX) é um fármaco antimetabólito, muito indicado para o tratamento de câncer e possui a desvantagem de sofrer efluxo pela glicoproteína P (gp P). Com o intuito de melhorar características indesejável como baixa solubilidade aquosa e reduzida biodisponibilidade, CUR e MTX são modelos de substâncias a serem nanoencapsuladas. O objetivo do trabalho foi desenvolver e caracterizar nanopartículas poliméricas contendo CUR e MTX e avaliar a função sinérgica dos dois compostos em células de adenocarcinoma de pulmão (CALU-3). Foram desenvolvidas sete formulações (NCUR-1, NCUR-2, NMTX-1, NMTX-2, NCM-0, NCM-1 e NCM-2) a partir de poli(ε-caprolactona) (PCL) e polietilenoglicol 6000 (PEG 6000) pelo método de deposição interfacial do polímero pré-formado. Linhagens de células tumorais CALU-3 e células normais NHI-3T3 foram usadas para avaliação da viabilidade. Foram obtidas nanopartículas com tamanhos (278 a 325 nm), pH ( 5,26 a 6,32), potenciais zeta (-33 a -41 mV) e índices de polidispersão (0,237 a 0,341) adequados. Foi desenvolvido e validado um método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) para quantificação dos fármacos nos nanocarreadores. O método mostrou-se específico, linear, preciso, exato e robusto, na faixa de 10 a 70 μg.mL-1 para o MTX e de 10 a 90 μg.mL-1 para a CUR. Todas as formulações apresentaram formato esférico e escala nanométrica. Não foi observado alteração dos grupos funcionais dos fármacos nos espectros de infravermelho (FTIR). As análises térmicas (DSC e TGA) e de difração de raios X (DRX) indicaram que a incorporação do MTX e CUR às nanopartículas levou a amorfização dos fármacos. Os estudos in vitro utilizando a linhagem CALU-3, mostram que a formulação NCM-2, utilizando MTX (0,3 mg/mL) e CUR (0,5 mg/mL) mostrou-se mais interessante, inferindo-se que a CUR desempenhou a função de inibidora da gp P, permitindo a entrada do MTX levando à morte celular pelo seu efeito citotóxico. A análise morfológica por fluorescência evidenciou predominância de apoptose inicial e apoptose tardia para a formulação contendo NCM-2. Conclui-se que a formulação NCM-2 apresentou efeito sinérgico pela associação de MTX e CUR.