Desenvolvimento de um biossensor impedimétrico de DNA com silsesquioxano para detecção label-free do vírus zika

• Autor(a) principal: Steinmetz, Marines
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEPG
• Texto Completo: http://tede2.uepg.br/jspui/handle/prefix/3027
• topic: CNPQ::CIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICA; diagnóstico vírus Zika; biossensor impedimétrico; nanopartículas de ouro; silsesquioxano; diagnosis of Zika virus; impedimetric biosensor; gold nanoparticles; silsesquioxane

A detecção do vírus Zika (ZIKV) tornou-se um desafio de saúde global nos últimos anos devido sua rápida expansão geográfica associada ao aumento de anomalias neurológicas como a síndrome de Guillain-Barré e a Microcefalia. Atualmente, as técnicas de diagnóstico para o ZIKV requerem trabalho intenso, são caros, demorados, necessário o uso de equipamentos sofisticados, além de proporcionarem resultados falsos positivos. Este presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um biossensor impedimétrico de DNA para detecção label-free desse vírus. Para tanto, obteve-se uma plataforma constituída por um eletrodo de carbono vítreo oxidado (ox-ECV) modificado com nanopartículas de ouro funcionalizadas pelo polieletrólito cloreto de 3-n-propilpiridínico silsesquioxano (AuNPs-SiPy). Esse nanohíbrido foi caracterizado por medidas de UV-VIS, DLS, FTIR, Raman e DRX, e o eletrodo de carbono vítreo modificado com o nanohíbrido, ox-ECV-[AuNPs-SiPy] por técnicas eletroquímicas. Após a imobilização de um oligonucleotídeo sintético específico do genoma do ZIKV com grupamento tiol (ZIKV1) sobre este eletrodo, formou-se o biossensor ox-ECV-[AuNPsSiPy]/ZIKV1, cujas etapas de modificação foram otimizadas através de análises univariadas e multivariada. O biossensor otimizado foi caracterizado por espectroscopia de impedância eletroquímica, voltametria cíclica e microscopia de força atômica. O reconhecimento do ssDNA alvo do ZIKV foi monitorado pela variação da resistência à transferência de carga (ΔRct) do marcador eletroquímico utilizado ([Fe(CN)6] 4-/3- ) e pela rugosidade (Rq) da superfície do eletrodo. Este biossensor apresentou um limite de detecção (LOD) de 0,41 pmol L-1 com faixa linear de 1,0 x10-12 - 1,0 x10-6 mol L-1 . O dispositivo proposto também apresentou ser estável até 90 dias (98,02 % da resposta inicial), sensível e seletivo para quantificar o alvo do ZIKV em amostras de soro, sendo portanto, uma ferramenta promissora para o diagnóstico precoce do ZIKV.