Clonagem e expressão de epítopos da proteína 1 maior de superfície de Anaplasma marginale em Escherichia coli e Bacillus subtilis
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Data de Publicação: | 2015 |
Outros Autores: | |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM |
Texto Completo: | https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6926 |
Resumo: | Introdução: Anaplasmose bovina é uma doença que acomete ruminantes, especificamente bovinos no Brasil gerando prejuízos econômicos. Dentre os sinais clínicos apresentados de maior ênfase, a febre que caracteriza altos picos de parasitemia assim como, a anemia que pode levar o animal a óbito. As formas de combate à doença através das medidas profiláticas e produtos existentes no mercado não são eficientes. Animais imunizados com proteínas de superfície de Anaplasma marginale (MSPs) apresentam resposta imune humoral, os epítopos imunodominantes de MSP1α tem mostrado excelente alternativa para a imunidade adaptativa, pois a imunidade contra A. marginale está associada com estas proteínas, que são expostas na superfície rickettsia e são facilmente acessíveis pelo sistema imune do hospedeiro, pode ser neutralizado por anticorpos contra epítopos expostos. Neste estudo, o objetivo foi expressar epítopos imunogênicos da proteína MSP1α em E. coli e Bacillus subtilis. Material e métodos: Dessa forma, foram construídas duas quimeras (q1ANAP-pHT43 e q2ANAPpRSET) com epítopos de proteína de superfície de Anaplasma marginale. Resultados e Conclusão: A purificação e a expressão da proteína em E. coli com vetor q2ANAP-pRSET apresentou resultados satisfatórios demonstrando que a proteína é solúvel, enquanto que a expressão em Bacillus subtilis não apresentou resultados. A validação da proteína foi realizada com soro de animais infectados com a doença. Assim, podemos concluiu-se que epítopos de q2ANAP possuem epítopos imunogênicos, possibilitando a realização de novos estudos visando avaliar a resposta imune protetora de bovinos infectados. |
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Clonagem e expressão de epítopos da proteína 1 maior de superfície de Anaplasma marginale em Escherichia coli e Bacillus subtilisEpítoposAnaplasmose bovinaMSPsEpitopesAnaplasmosis bovineCIÊNCIAS BIOLÓGICASIntrodução: Anaplasmose bovina é uma doença que acomete ruminantes, especificamente bovinos no Brasil gerando prejuízos econômicos. Dentre os sinais clínicos apresentados de maior ênfase, a febre que caracteriza altos picos de parasitemia assim como, a anemia que pode levar o animal a óbito. As formas de combate à doença através das medidas profiláticas e produtos existentes no mercado não são eficientes. Animais imunizados com proteínas de superfície de Anaplasma marginale (MSPs) apresentam resposta imune humoral, os epítopos imunodominantes de MSP1α tem mostrado excelente alternativa para a imunidade adaptativa, pois a imunidade contra A. marginale está associada com estas proteínas, que são expostas na superfície rickettsia e são facilmente acessíveis pelo sistema imune do hospedeiro, pode ser neutralizado por anticorpos contra epítopos expostos. Neste estudo, o objetivo foi expressar epítopos imunogênicos da proteína MSP1α em E. coli e Bacillus subtilis. Material e métodos: Dessa forma, foram construídas duas quimeras (q1ANAP-pHT43 e q2ANAPpRSET) com epítopos de proteína de superfície de Anaplasma marginale. Resultados e Conclusão: A purificação e a expressão da proteína em E. coli com vetor q2ANAP-pRSET apresentou resultados satisfatórios demonstrando que a proteína é solúvel, enquanto que a expressão em Bacillus subtilis não apresentou resultados. A validação da proteína foi realizada com soro de animais infectados com a doença. Assim, podemos concluiu-se que epítopos de q2ANAP possuem epítopos imunogênicos, possibilitando a realização de novos estudos visando avaliar a resposta imune protetora de bovinos infectados.Bovine Anaplasmosis is a disease that affects ruminants, especially cattle in Brazil generating economic losses. Among the clinical signs, fever are present in high peaks of parasitemia, as well as anemia, which can lead the animal to death. Ways to combat the disease on the market are not efficient. Animals immunized with surface proteins of Anaplasma marginale (MSPs) showed the humoral immune response, and immunodominant epitopes of MSP1α has being proven an excellent alternative to adaptive immunity. Since immunity to A. marginale is associated with these proteins, which are exposed on the surface rickettsia and are easily accessible by the host immune system, can be neutralized by antibodies against epitopes exposed. In this study, the objective was to express immunogenic epitopes of MSP1α protein in E. coli and Bacillus subtilis. Methods: In this way, two proteins (q1ANAP and q2ANAP) were designed with surface protein epitopes of A. marginale. Results and Conclusion: Purification and protein expression in E. coli with q2ANAP-pRSET vector showed satisfactory results demonstrating that the protein is soluble, whereas in Bacillus subtilis no expression was obtained. The validation of the protein was performed with sera from animals infected with the disease. Thus, we can conclude that q2ANAP has immunogenic epitopes and further studies can be realized aiming to evaluate the protective immune response of infected cattle.FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do AmazonasUniversidade Federal do AmazonasInstituto de Ciências BiológicasBrasilUFAMPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaMariúba, Luís André Moraishttp://lattes.cnpq.br/4784959431673419Oliveira, Hugo Valério Corrêa dehttp://lattes.cnpq.br/6595179051283009Oliveira, Roseane Pinto Martins de Oliveirahttp://lattes.cnpq.br/6863733555530243Pereira, Keila Dayane do Espiríto Santohttp://lattes.cnpq.br/24677875818340132019-02-05T15:37:57Z2999-12-312015-04-02info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfPEREIRA, Keila Dayane do Espírito Santo. Clonagem e expressão de epítopos da proteína 1 maior de superfície de Anaplasma marginale em Escherichia coli e Bacillus subtilis. 2015. 68 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2015.https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6926porhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAMinstname:Universidade Federal do Amazonas (UFAM)instacron:UFAM2020-03-12T05:03:42Zoai:https://tede.ufam.edu.br/handle/:tede/6926Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://200.129.163.131:8080/PUBhttp://200.129.163.131:8080/oai/requestddbc@ufam.edu.br||ddbc@ufam.edu.bropendoar:65922020-03-12T05:03:42Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM - Universidade Federal do Amazonas (UFAM)false |
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