Produção e identificação de substâncias produzidas por Paecilomyces H59, inibidoras do crescimento de Staphylococcus aureus MRSA

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Autor(a) principal: Andrade, Sara Jéssica Teixeira de
Data de Publicação: 2018
Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/4745100709691050
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM
Texto Completo: https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7668
Resumo: Staphylococcus aureus é um patógeno humano oportunista mais frequentemente associado a infecções adquiridas na comunidade e no ambiente hospitalar. Esse organismo é extremamente adaptável e ao longo de um curto espaço de tempo desenvolveu estratégias de resistências aos antimicrobianos, dessa forma, a bioprospecção de novas drogas capazes de inibir Staphylococcus aureus resistentes a meticilina - MRSA é um importante campo para o desenvolvimento de pesquisas. Nesse contexto, recentemente, no laboratório de micologia – INPA foi identificada uma linhagem fúngica Paecilomyces H59 produtora de substâncias capazes de inibir o MRSA. Diante dessa descoberta, o objetivo do estudo foi investigar a produção e caracterização de substância com atividade inibitória frente à MRSA produzida por Paecilomyces H59. A estratégia metodológica para alcançar esse objetivo incluiu: a) Caracterização taxonômica de Paecilomyces H59; b) Otimização da produção de substâncias ativas por bioprocesso submerso e c) Isolamento e identificação das substâncias ativas frente o MRSA. A caracterização taxonômica de Paecilomyces H59 demonstrou todas as estruturas fúngicas relatadas em literatura identificando-o como pertencente ao gênero supracitado. Os fatores ajustados para a maior produção dos antimicrobianos foram: a) uso da glicose como fonte de carbono; b) qualquer fonte de nitrogênio testada; c) pH 5, d) inóculo 1x105 e ausência de agitação orbital. No isolamento e identificação das substancias ativas as análises da espectrometria de massas com ionização por Eletronspray (ESI-EM) das duas fases DCM e AcOEt (frações 5-9 obtidas com o sistema diclorometano/acetato de etila (20:80 – v/v) foi realizado comparações dos espectros e encontrados em ambas as frações picos majoritários e semelhantes com a massa de 155 m/z fórmula molecular C7H7O4, sugere-se que seja esse o responsável pela atividade antimicrobiana frente a Staphylococcus aureus resistente a meticilina - MRSA. E verificar a citotoxicidade in vitro da substância isolada pelo método de Alamar Blue. Os resultados desse trabalho indicam que a bioprospecção de substâncias com atividade antimicrobiana produzidas por Paecilomyces H59 é uma alternativa para a pesquisa e desenvolvimento de novas drogas com atividade antimicrobiana, sendo vital para proteger a saúde humana frente a bactérias multirresistentes. Pacientes, médicos e a indústria farmacêutica possuem grande interesse nessa abordagem.
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Diante dessa descoberta, o objetivo do estudo foi investigar a produção e caracterização de substância com atividade inibitória frente à MRSA produzida por Paecilomyces H59. A estratégia metodológica para alcançar esse objetivo incluiu: a) Caracterização taxonômica de Paecilomyces H59; b) Otimização da produção de substâncias ativas por bioprocesso submerso e c) Isolamento e identificação das substâncias ativas frente o MRSA. A caracterização taxonômica de Paecilomyces H59 demonstrou todas as estruturas fúngicas relatadas em literatura identificando-o como pertencente ao gênero supracitado. Os fatores ajustados para a maior produção dos antimicrobianos foram: a) uso da glicose como fonte de carbono; b) qualquer fonte de nitrogênio testada; c) pH 5, d) inóculo 1x105 e ausência de agitação orbital. No isolamento e identificação das substancias ativas as análises da espectrometria de massas com ionização por Eletronspray (ESI-EM) das duas fases DCM e AcOEt (frações 5-9 obtidas com o sistema diclorometano/acetato de etila (20:80 – v/v) foi realizado comparações dos espectros e encontrados em ambas as frações picos majoritários e semelhantes com a massa de 155 m/z fórmula molecular C7H7O4, sugere-se que seja esse o responsável pela atividade antimicrobiana frente a Staphylococcus aureus resistente a meticilina - MRSA. E verificar a citotoxicidade in vitro da substância isolada pelo método de Alamar Blue. Os resultados desse trabalho indicam que a bioprospecção de substâncias com atividade antimicrobiana produzidas por Paecilomyces H59 é uma alternativa para a pesquisa e desenvolvimento de novas drogas com atividade antimicrobiana, sendo vital para proteger a saúde humana frente a bactérias multirresistentes. Pacientes, médicos e a indústria farmacêutica possuem grande interesse nessa abordagem.Staphylococcus aureus is the human pathogen more related to a disease acquired in the community and the hospital environment. This organism is extremely adaptable and over a short period of time has developed antimicrobial resistance strategies, thus, the bioprospection of new drugs capable of inhibiting methicillin resistant Staphylococcus aureus - MRSA is an important field for research development. In this recent context, in the laboratory of mycology - INPA has been identified a fungal strain,Paecilomyces H59 the production of substances capable of inhibiting MRSA. From this finding, the aim of this study was to investigate the production and characterization of an inhibitory component against MRSA produced by Paecilomyces H59. The methodological strategy to achieve this goal included:a) Taxonomic characterization of Paecilomyces H59;b) Optimization of the production of active substances by submerged bioprocess andc) Isolation and identification of substances active against MRSA.The taxonomic characterization of Paecilomyces H59 demonstrated all the fungal structures reported in the literature identifying it as belonging to the previously cited genus. The adjusted factors for the higher antimicrobial production were:a) Use of glucose as carbon source;b) Any source of nitrogen tested;c) pH 5; d) Inoculum 1x105 and absence of agitation.In the isolation and identification of active substances,a Eletronspray ionization mass spectrometry (ESI-EM) analyzes was performed in the two phases DCM and AcOEt (fractions 5-9 obtained with the dichloromethane / ethyl acetate system (20:80 v / v ) was performed comparisons of the spectra and found in both majority and similar peaks fractions with the mass of 155 m/z molecular formula C7H7O4, it is suggested that this is responsible for the antimicrobial activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus - MRSA. And check the in vitro cytotoxicity of the substance isolated by the Alamar Blue method. Results from this work indicate that the bioprospection of substances with antimicrobial activity produced by Paecilomyces H59 is an alternative for the research and development of new drugs with antimicrobial activity and is vital to protect human health against multiresistant bacteria.Patients, physicians and the pharmaceutical industry interest in this approach.Período de Embargo: 14/02/2020 - 29/03/2021Universidade Federal do AmazonasFaculdade de Ciências FarmacêuticasBrasilUFAMPrograma de Pós-graduação em Ciências FarmacêuticasSouza, João Vicente Braga dehttp://lattes.cnpq.br/7804981785557071Lima, Alita Moura dehttp://lattes.cnpq.br/1803863031568279Azevedo, Maria Ermelinda Filgueiras dehttp://lattes.cnpq.br/1763660104203876Andrade, Sara Jéssica Teixeira dehttp://lattes.cnpq.br/47451007096910502020-02-14T17:41:41Z2018-08-31info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfANDRADE, Sara Jéssica Teixeira de. Produção e identificação de substâncias produzidas por Paecilomyces H59, inibidoras do crescimento de Staphylococcus aureus MRSA. 2018. 86 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2018.https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7668porhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAMinstname:Universidade Federal do Amazonas (UFAM)instacron:UFAM2021-03-30T05:03:55Zoai:https://tede.ufam.edu.br/handle/:tede/7668Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://200.129.163.131:8080/PUBhttp://200.129.163.131:8080/oai/requestddbc@ufam.edu.br||ddbc@ufam.edu.bropendoar:65922021-03-30T05:03:55Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM - Universidade Federal do Amazonas (UFAM)false
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Andrade, Sara Jéssica Teixeira de
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