Estudo fitoquímico das folhas de Pseudoxandra leiophylla (Annonaceae) e investigação do seu efeito citotóxico

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Autor(a) principal: Nascimento Neto, Francisco Alberto
Data de Publicação: 2021
Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/3348947000848929
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM
Texto Completo: https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8348
Resumo: Pseudoxandra leiophylla (Diels) é uma espécie pertencente a família Annonaceae, nativa do território amazônico, com ocorrência na Venezuela, Colombia e Brasil. Possui como sinonímia a espécie Pseudoxandra coriacea R. E. Fr. De acordo com a literatura, não há registros de estudos químicos e farmacológicos a respeito desta espécie. Nesse trabalho, foi realizado o estudo fitoquímico e a investigação da citotoxicidade in vitro dos extratos brutos, frações (neutra e alcaloídica) e compostos isolados das folhas de P.leiophylla. O estudo das folhas resultou no isolamento de seis substâncias pertencentes à classe dos alcaloides, terpenos e lignoides. Para o isolamento dos constituintes químicos foram empregadas técnicas cromatográficas clássicas tais como cromatografia em coluna e cromatografia em camada delgada preparativa, e para a identificação foram utilizadas técnicas espectroscópicas (ressonância magnética nuclear de 1H e 13C 1D/2D) e espectrométrica (espectrometria de massas). Os alcaloides pertencem a classe dos aporfinos e oxoaporfinos e foram identificados como sendo a liriodenina e a asimilobina, respectivamente. Os terpenos se tratam dos triterpenos ácido heínico, a mistura de breina e maniladiol, e a lactona sesquiterpênica loliolida, além da lignana tetraidrofurânica identificada como grandisina. Estes compostos são descritos pela primeira vez na espécie. Os extratos (hexânico e metanólico), frações (neutra e alcaloídica), assim como as substâncias isoladas das folhas de P. leiophylla foram submetidas aos ensaios de ativididade citotóxica frente às linhagens de células tumorais utilizando o ensaio do Alamar Blue. Os resultados do ensaio de citotoxicidade dos extratos e frações evidenciaram potencial atividade citotóxica frente às linhagens de células tumorais com valores de CI50 abaixo de 50 μg.mL-1, onde dentre os extratos avaliados, o extrato hexânico foi o mais ativo com valores de CI50 iguais a 28,50 e 13,12 μg.mL-1 contra as células de carcinoma de colón humano (HCT116) e carcinoma hepatocelular humano (HepG2), respectivamente. O extrato metanólico foi ativo apenas frente ao tipo de célula tumoral HepG2 com valor de CI50 igual a 12,85 μg.mL-1. Por outro lado, as frações neutra e alcaloídica apresentaram valores de CI50 iguais a 42,47 e 8,32 μg.mL-1, e 31,86 e 9,85 μg.mL-1 para HCT116 e HepG2, respectivamente, melhorando a atividade do extrato metanólico com o tratamento ácido-base. Entretanto, os resultados são considerados próximos com ambas as frações ativas com prováveis substâncias promissoras. Para as substâncias isoladas apenas a mistura de breina e maniladiol apresentou alguma atividade citotóxica com valor de CI50 de 8,32 μg.mL-1 frente as células tumorais B16-F10. Os resultados contribuíram para o conhecimento químico e farmacológico das espécies de Annonaceae do Amazonas, particularmente para as espécies do gênero Pseudoxandra.
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Para o isolamento dos constituintes químicos foram empregadas técnicas cromatográficas clássicas tais como cromatografia em coluna e cromatografia em camada delgada preparativa, e para a identificação foram utilizadas técnicas espectroscópicas (ressonância magnética nuclear de 1H e 13C 1D/2D) e espectrométrica (espectrometria de massas). Os alcaloides pertencem a classe dos aporfinos e oxoaporfinos e foram identificados como sendo a liriodenina e a asimilobina, respectivamente. Os terpenos se tratam dos triterpenos ácido heínico, a mistura de breina e maniladiol, e a lactona sesquiterpênica loliolida, além da lignana tetraidrofurânica identificada como grandisina. Estes compostos são descritos pela primeira vez na espécie. Os extratos (hexânico e metanólico), frações (neutra e alcaloídica), assim como as substâncias isoladas das folhas de P. leiophylla foram submetidas aos ensaios de ativididade citotóxica frente às linhagens de células tumorais utilizando o ensaio do Alamar Blue. Os resultados do ensaio de citotoxicidade dos extratos e frações evidenciaram potencial atividade citotóxica frente às linhagens de células tumorais com valores de CI50 abaixo de 50 μg.mL-1, onde dentre os extratos avaliados, o extrato hexânico foi o mais ativo com valores de CI50 iguais a 28,50 e 13,12 μg.mL-1 contra as células de carcinoma de colón humano (HCT116) e carcinoma hepatocelular humano (HepG2), respectivamente. O extrato metanólico foi ativo apenas frente ao tipo de célula tumoral HepG2 com valor de CI50 igual a 12,85 μg.mL-1. Por outro lado, as frações neutra e alcaloídica apresentaram valores de CI50 iguais a 42,47 e 8,32 μg.mL-1, e 31,86 e 9,85 μg.mL-1 para HCT116 e HepG2, respectivamente, melhorando a atividade do extrato metanólico com o tratamento ácido-base. Entretanto, os resultados são considerados próximos com ambas as frações ativas com prováveis substâncias promissoras. Para as substâncias isoladas apenas a mistura de breina e maniladiol apresentou alguma atividade citotóxica com valor de CI50 de 8,32 μg.mL-1 frente as células tumorais B16-F10. Os resultados contribuíram para o conhecimento químico e farmacológico das espécies de Annonaceae do Amazonas, particularmente para as espécies do gênero Pseudoxandra.Pseudoxandra leiophylla (Diels) is a species belonging to the Annonaceae family, native to the Amazonian territory, occurring in Venezuela, Colombia and Brazil. Its synonymy is Pseudoxandra coriacea R. E. Fr. According to the literature, there are no records of chemical and pharmacological studies on this species. In this work, the phytochemical study and the "in vitro" cytotoxicity investigation of the extracts, fractions (neutral and alkaloidic) and isolated compounds from P. leiophylla leaves. The study of the leaves resulted in the isolation of six substances belonging to the class of alkaloids, terpenes and lignoids. Classical chromatographic techniques such as column chromatography and preparative thin-layer chromatography were used to isolate the chemical constituents, and spectroscopic (1H and 13C 1D/2D nuclear magnetic resonance) and spectrometric (mass spectrometry) techniques were used. The alkaloids belong to the aporphin and oxoaporphin classes and were identified as liriodenin and asimilobin, respectively. The terpenes are the triterpenes heynic acid, the mix of brein and manniladiol, and the sesquiterpene lactone loliolide, as well as the tetrahydrofuran lignan identified as grandisin. All these compounds are described for the first time in the species. The extracts (hexanic and methanolic), fractions (neutral and alkaloidic), as well as the substances isolated from P. leiophylla leaves were submitted to cytotoxic activity assays against tumor cell lines using the Alamar Blue assay. The results of the cytotoxicity assay of the extracts and fractions showed potential cytotoxic activity against tumor cell lines with IC50 values below 50 μg.mL-1, where among the extracts evaluated, the hexanolic extract was the most active with IC50 values equal to 28.50 and 13.12 μg.mL-1 against human colon carcinoma (HCT116) and human hepatocellular carcinoma (HepG2) cells, respectively. The methanolic extract was active only against the tumor cell type HepG2 with CI50 value equal to 12.85 μg.mL-1. On the other hand, the neutral and alkaloidic fractions showed IC50 values equal to 42.47 and 8.32 μg.mL-1, and 31.86 and 9.85 μg.mL-1 for HCT116 and HepG2, respectively, improving the activity of the methanolic extract with acid-base treatment. However, the results are considered close with both active fractions having probable promising substances. For the isolated substances only the brein and manniladiol mixture showed some cytotoxic activity with a IC50 value of 8.32 μg.mL-1 against B16-F10 tumor cells. The results contributed to the chemical and pharmacological knowledge of Annonaceae species from Amazonas, particularly for species of the gender Pseudoxandra.FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do AmazonasUniversidade Federal do AmazonasInstituto de Ciências ExatasBrasilUFAMPrograma de Pós-graduação em QuímicaCosta, Emmanoel Vilaçahttp://lattes.cnpq.br/9408756365965584Santos, Alan Diego da Conceiçãohttp://lattes.cnpq.br/0649468133431468Tavares, Josean Fechinehttp://lattes.cnpq.br/6009412640611523Nascimento Neto, Francisco Albertohttp://lattes.cnpq.br/33489470008489292021-07-13T15:49:55Z2021-03-29info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfNASCIMENTO NETO, Francisco Alberto. Estudo fitoquímico das folhas de Pseudoxandra leiophylla (Annonaceae) e investigação do seu efeito citotóxico. 2021. 128 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2021.https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8348porhttp://creativecommons.org/licenses/by-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAMinstname:Universidade Federal do Amazonas (UFAM)instacron:UFAM2021-07-14T05:03:49Zoai:https://tede.ufam.edu.br/handle/:tede/8348Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://200.129.163.131:8080/PUBhttp://200.129.163.131:8080/oai/requestddbc@ufam.edu.br||ddbc@ufam.edu.bropendoar:65922021-07-14T05:03:49Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM - Universidade Federal do Amazonas (UFAM)false
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