Estudos químicos e biológicos de fungos endofíticos de Gustavia sp.

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Autor(a) principal: Almeida, Maria de Fátima Oliveira
Data de Publicação: 2014
Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/0109173119545141
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM
Texto Completo: http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5191
Resumo: ESTUDOS QUÍMICOS E BIOLÓGICOS DE FUNGOS ENDOFÍTICOS DE Gustavia sp. Fungos e bactérias endofíticas são os que vivem nos espaços intercelulares das plantas, pelo menos por um período de seu ciclo de vida, habitando todas as partes aéreas, mas também as raízes, sem lhes causar nenhum sintoma aparente. Para isolar os metabólitos de fungos endofíticos neste trabalho, foram realizados preliminarmente procedimentos de coleta, isolamento, purificação, identificação (pelo menos o gênero) e conservação dos mesmos. A partir de 384 fragmentos dos tecidos vegetais (folha, galho, caule e raiz) de Gustavia sp. foram isolados 93 fungos endofíticos dos quais foram conservados 67 linhagens pertencentes a sete gêneros (Fusarium, Xylaria, Pestalotiopsis, Penicillium, Cephalosporium, Aspergillus, Colletotrichum (Glomerella)) e linhagens de Ascomycetos. Os estudos químicos iniciaram com a prospecção química de 21 linhagens representantes de cada um dos sete gêneros identificados. Com base nos resultados de ensaios biológicos dos extratos obtidos nos screening, foram selecionadas quatro linhagens de fungos visando a obtenção de metabólitos bioativos. Por sequenciamento do rDNA foram identificadas três das quatro linhagens selecionadas: 400 (Nectria setofusariae), 401 (Penicillium chrysogenum) e 447 (Xylaria adscendens). Os estudos químicos dos extratos das quatro linhagens 400, 447, 455 e Aspergillus sp. resultaram na identificação de diversos constituintes: uma mistura do ácido pilifórmico e a 5-carboximeleina obtidos de X. adscendens; os peróxidos de ergosterol nas formas endo e exo, uma mistura dos bisorbicilinoides (trichodimerol, dihidrotrichodimerol e tetrahidrotrichodimerol) e a esterigmatocistina (STC), além de uma mistura de ácidos graxos, de P. chrysogenum; uma mistura dos ácidos fenilacético e 4-metoxifenilacético, de Aspergillus sp.; e os ácidos fusárico e fenilacético, de N. setofusariae. Além disso, estudos por espectrometria de massas revelaram outros componentes da classe dos sorbicilinoides em amostra oriunda do P. chrysogenum. Os constituintes foram identificados por RMN 1D e 2D e espectrometria de massas e por comparação com os dados da literatura. Ensaios de extratos, frações e substâncias indicaram elevado potencial citotóxico frente a três linhagens de células tumorais para uma fração de N. setofusariae e a STC obtidos de P. chrysogenum. Este trabalho proporcionou a descoberta de uma linhagem de P. chrysogenum produtora de metabólitos da classe dos bisorbicilinoides. Este é o primeiro relato dessas substâncias em estudos de fungos no Brasil e revelam a importância do referido trabalho e de se continuar a exploração desta linhagem.
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spelling Estudos químicos e biológicos de fungos endofíticos de Gustavia sp.Fungos endofíticosGustaviaBisorbicilinoidesEsterigmatocistinaCIÊNCIAS EXATAS E DA TERRA: QUÍMICA: QUÍMICA ORGÂNICAESTUDOS QUÍMICOS E BIOLÓGICOS DE FUNGOS ENDOFÍTICOS DE Gustavia sp. Fungos e bactérias endofíticas são os que vivem nos espaços intercelulares das plantas, pelo menos por um período de seu ciclo de vida, habitando todas as partes aéreas, mas também as raízes, sem lhes causar nenhum sintoma aparente. Para isolar os metabólitos de fungos endofíticos neste trabalho, foram realizados preliminarmente procedimentos de coleta, isolamento, purificação, identificação (pelo menos o gênero) e conservação dos mesmos. A partir de 384 fragmentos dos tecidos vegetais (folha, galho, caule e raiz) de Gustavia sp. foram isolados 93 fungos endofíticos dos quais foram conservados 67 linhagens pertencentes a sete gêneros (Fusarium, Xylaria, Pestalotiopsis, Penicillium, Cephalosporium, Aspergillus, Colletotrichum (Glomerella)) e linhagens de Ascomycetos. Os estudos químicos iniciaram com a prospecção química de 21 linhagens representantes de cada um dos sete gêneros identificados. Com base nos resultados de ensaios biológicos dos extratos obtidos nos screening, foram selecionadas quatro linhagens de fungos visando a obtenção de metabólitos bioativos. Por sequenciamento do rDNA foram identificadas três das quatro linhagens selecionadas: 400 (Nectria setofusariae), 401 (Penicillium chrysogenum) e 447 (Xylaria adscendens). Os estudos químicos dos extratos das quatro linhagens 400, 447, 455 e Aspergillus sp. resultaram na identificação de diversos constituintes: uma mistura do ácido pilifórmico e a 5-carboximeleina obtidos de X. adscendens; os peróxidos de ergosterol nas formas endo e exo, uma mistura dos bisorbicilinoides (trichodimerol, dihidrotrichodimerol e tetrahidrotrichodimerol) e a esterigmatocistina (STC), além de uma mistura de ácidos graxos, de P. chrysogenum; uma mistura dos ácidos fenilacético e 4-metoxifenilacético, de Aspergillus sp.; e os ácidos fusárico e fenilacético, de N. setofusariae. Além disso, estudos por espectrometria de massas revelaram outros componentes da classe dos sorbicilinoides em amostra oriunda do P. chrysogenum. Os constituintes foram identificados por RMN 1D e 2D e espectrometria de massas e por comparação com os dados da literatura. Ensaios de extratos, frações e substâncias indicaram elevado potencial citotóxico frente a três linhagens de células tumorais para uma fração de N. setofusariae e a STC obtidos de P. chrysogenum. Este trabalho proporcionou a descoberta de uma linhagem de P. chrysogenum produtora de metabólitos da classe dos bisorbicilinoides. Este é o primeiro relato dessas substâncias em estudos de fungos no Brasil e revelam a importância do referido trabalho e de se continuar a exploração desta linhagem.CHEMICAL AND BIOLOGICAL STUDIES ON FUNGI endophytic from Gustavia sp. Endophytic fungi and bacteria are those living at least a period of their live into the intercellular spaces of plants colonizing all vegetal tissues without causing any apparent symptom. In order to obtain fungal metabolites in this work, the fungi were, first of all, collected, isolated, purified, identified (at least their genera) and preserved. From 384 plant-tissues fragments (leaf, stem, trunk and root) of Gustavia sp. 93 endophytic fungi had been isolated and 67 strains were preserved. Those strains were from seven genera (Fusarium, Xylaria, Pestalotiopsis, Penicillium, Cephalosporium, Aspergillus and Colletotrichum (Glomerella)) and some were ascomycetes. Chemical study began by chemical screening of 21 extracts of endophytic fungi representing each group isolated. On base in the bioassays of the extracts, four strains were selected to isolate bioactive metabolites. Three of thouse strains, Nectria setofusariae (400), Penicillium chrysogenum (401) and Xylaria adscendens (447), have been identified by rDNA sequencing. From their extracts, several chemical constituintes have been isolated: a mixture of piliformic acid and 5-carboxymelein from X. adscendens; the ergosterol peroxides in the endo and exo forms, a mixture of the bisorbicillinoids trichodimerol, dihydrotrichodimerol e tetrahydrotrichodimerol and the sterigmatocistin (STC), as well a mixture of fatty acids from P. chrysogenum; a mixture of the phenylacetic and 4-methoxyphenylacetic acids from Aspergillus sp.; and the fusaric and phenylacetic acids from N. setofusariae. Besides, mass spectrometry analysis have shown other sorbicillinoids components in an extract fraction from P. chrysogenum. 1D and 2D NMR spectroscopy and mass spectrometry have been used together with literature data for identify the metabolites. Citotoxic bioassays of the extracts, fractions and substances have shown high citotoxic potential against three tumoral strains form a fraction from N. setofusariae and the substance STC from P. chrysogenum. This work resulted in the discovery of a strain of P. chrysogenum producing metabolites of the class of bisorbicillinoids. This is the first report of these substances in studies of fungi from Brazilian Amazon and reveals the importance of such work to continue to operate this line.CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoUniversidade Federal do AmazonasInstituto de Ciências ExatasBrasilUFAMPrograma de Pós-graduação em QuímicaSouza, Afonso Duarte Leão dehttp://lattes.cnpq.br/5784405197320526Almeida, Maria de Fátima Oliveirahttp://lattes.cnpq.br/01091731195451412016-09-15T19:50:27Z2014-07-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfALMEIDA, Maria de Fátima Oliveira. Estudos químicos e biológicos de fungos endofíticos de Gustavia sp. 2014. 195 f. Tese (Doutorado em Química) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2014.http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5191porhttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAMinstname:Universidade Federal do Amazonas (UFAM)instacron:UFAM2016-09-16T05:03:59Zoai:https://tede.ufam.edu.br/handle/:tede/5191Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://200.129.163.131:8080/PUBhttp://200.129.163.131:8080/oai/requestddbc@ufam.edu.br||ddbc@ufam.edu.bropendoar:65922016-09-16T05:03:59Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM - Universidade Federal do Amazonas (UFAM)false
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