Caracterização de compostos antimicrobianos produzidos por Streptomyces sp

• Autor(a) principal: Silva, Ingrid Reis da
• Data de Publicação: 2016
• Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/2315332373878201
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM
• Texto Completo: http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/5655
• topic: Actinomicetos; Antibiótico; Antibacterianos naturais; Actinomicinas; Actinomycetes; Antibiotic; Actinomycins; CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

O aumento de bactérias resistentes a antibióticos incentiva a pesquisa por novas substâncias antibacterianas. Diante disso, a seleção de microrganismos com potencial para a produção de novos compostos antimicrobianos tem sido amplamente estudada. Dentre estes microrganismos uma especial atenção é dada aos actinomicetos que apresentam capacidade de produzir uma ampla variedade de compostos bioativos como antibióticos, antifúngicos, antitumorais entre outros compostos que podem ser aplicados nos mais diversos segmentos da indústria. O gênero Streptomyces é considerado de grande importância industrial devido à sua capacidade de produzir muitos metabólitos secundários, respondendo por 80% dos antibióticos utilizados atualmente. Em trabalhos anteriores, foi possível reportar a atividade antimicrobiana de uma linhagem de Streptomyces spp. que apresentou atividade inibitória frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923, Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 e Enterococcus faecalis ATCC 292123. Posteriormente, verificou-se ainda a sua atividade tuberculicida inibindo o crescimento da M. tuberculosis H37Rv (ATCC 27294). A partir desses resultados preliminares, o presente trabalho teve por objetivo analisar os extratos e frações de metabólitos de Streptomyces sp. visando isolar, purificar e identificar quimicamente o(s) composto(s) com atividade antimicrobiana e tuberculicida. A partir dos metabólitos obtidos em meio AC líquido e por partição líquido-líquido utilizando solventes de polaridade crescente, obteve-se as frações em hexano (fr-Hex), acetato de etila (fr-AcoEt) e clorofórmio (fr-Clo). A fr-Clo foi escolhida para dar continuidade aos ensaios pois o seu rendimento foi maior, apresentando alta atividade antibacteriana nos testes de Concentração Inibitória Mínima (CIM), contra as bactérias Staphylococcus aureus e Mycobacterium smegmatis. Dessa forma, a fr-Clo foi submetida à Cromatografia em Camada Delgada (CCD) utilizando vários sistemas de eluentes e, em seguida, a técnica de Bioautografia foi realizada para identificar os compostos com atividade. Dessa purificação foram obtidas duas subfrações bioativas, as quais foram submetidas ao isolamento dos compostos pela técnica de CCD preparativa e HPLC – DAD-MS. As substâncias isoladas foram denominados Clarina A e Clarina B, as mesmas apresentaram uma Concentração Inibitória Mínima (CIM) de 1,0 μg/mL para a Clarina A e 0,5 μg/mL para Clarina B frente a bactéria Staphylococcus aureus e 16 μg/mL frente a Mycobacterium smegmatis. As mesmas não apresentaram citotoxidade para céluas não tumorais 3T3-L1. As substâncias Clarina A e Clarina B foram analisadas por meio das técnicas de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e Espectrometria de Massas de baixa e alta resolução para identificação química. As substâncias isoladas foram identificadas como Actinomicina D e Actinomicina X2 com m/z de 1277 [M + Na] e 1291 [M+Na]. A forte atividade antibacteriana apresentada pelas substâncias isoladas torna este produto uma importante fonte de compostos antibacterianos naturais