Desenvolvimento e análise do efeito de um extrato combinado de andiroba, copaíba e guaraná em modelos de cicatrização in vitro e in vivo
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Data de Publicação: | 2019 |
Outros Autores: | , |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM |
Texto Completo: | https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8324 |
Resumo: | JUSTIFICATIVA: A pele é o maior órgão do corpo humano e tem como funções revestir, delimitar, proteger e interagir com o meio exterior. Assim, a cicatrização da pele é um elemento fundamental para a saúde humana, tanto na ocorrência de lesões quanto em procedimentos cirúrgicos. A eficácia do processo de cicatrização pode ainda ser apriomorada através do desenvolvimento de produtos que tenham origem em plantas com uso tradicional, esta importância é potencializada quando levamos em consideração que o Brasil é um país megadiverso, sendo a região Amazônica o grande celeiro desta diversidade. Assim, neste estudo buscamos deselvolver um composto pró cicatrização a base dos óleos de andiroba (Carapa guianensis), copaíba (Copaifera langsdorffii) e do pó de Guaraná (Paullinia Cupana), três plantas de origem amazônica que possuem potencial efeito cicatrizante via modulação da fase inflamatória e proliferativa de fibroblastos. É possível que a combinação dos óleos e guaraná resulte em um potencial produto farmacológico inovador, com alto potencial prócicatricial. OBJETIVOS: Geral: Desenvolver e Analisar o efeito de um produto obtido via extração combinada de andiroba, copaíba e guaraná (ACG) sob a forma de óleo bifásico e emulsão através da análise de modelos de cicatrização in vitro e in vivo. Específicos: Realizar as análises utilizando fibroblastos dérmicos e minhoca californiana Eisenia fetida, modelo in vivo de regeneração corporal via incisão cirúrgica da região caudal. MÉTODO: Por se tratar de um estudo que não envolve contato direto com vertebrados, não houe necessidade de aprovação em Comitê de ética. Após a obtenção do ACG a capacidade antioxidante e genotóxica/ genoprotetora foi avaliada em testes não celulares. Para os testes utilizando-se a linhagem comercial de fibroblastos dérmicos HFF-1 e minhocas californianas (Eisenia Fetida), também obtidas comercialmente. As células foram cultivadas em condições padronizadas, e nestas foi realizado o teste strach assay (modelo in vitro de lesão na pele) as células foram tratadas com o ACG em diferentes concentrações e após inclubção de 24/72 horas, testes de viabilidade/ proliferação celular marcadores de crescimento, estresse oxidativo e inflamação foram analisados. No modelo in vivo, os animais tiveram uma incisão caudal foram imediatamente tratados com ACG sob a forma de óleo e emulsão, após 24 horas foi analisada a expressão gênica e após 7 dias fez se a análise dos padrões de regeneração. A análise estatística foi realizada por análise de variância de uma via seguida de teste post hoc de Tukey. Sendo considerados significativos testes com p < 0.05. RESULTADOS:Como resultados do estudo o ACG demonstrou forte atividade antioxidante, e não foi genotóxico nos testes aqui realizados. Frente aos modelos celulares apresentou ação antioxidante, antiinflamatória e pró-cicatricial. Nos testes in vivo foi capaz de modular positivamente o gene SOX-4 totalmente relacionado ao processo de regeneração/ cicatrização, ainda na presença do óleo ACG o processo de regeneração se deu de maneira mais intensa inclusive com melhor angiogenese. CONCLUSÕES: Assim, apesar das limitações metodológicas, consideramos relavantes os dados obtidos neste estudo uma vez que foi desenvolvido um novo produto aqui denominado ACG, cujo os resultados iniciais mostram ação antioxidante, anti-inflamatória e pró-cicatrização do composto desenvolvido, mais estudos precisam ser realizados para comprovação dos resultados aqui obtidos, entretanto acreditamos que futuramente o desenvolvimento de um produto comercial com fins clínicos poderá ser uma realidade. |
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Desenvolvimento e análise do efeito de um extrato combinado de andiroba, copaíba e guaraná em modelos de cicatrização in vitro e in vivoPele - CicatrizaçãoProcesso de cicatrizaçãoAndirobaRegeneração tecidualAtividade antioxidanteCIÊNCIAS DA SAÚDEPeleCirurgiaCicatrizaçãoInflamaçãoProliferação celularJUSTIFICATIVA: A pele é o maior órgão do corpo humano e tem como funções revestir, delimitar, proteger e interagir com o meio exterior. Assim, a cicatrização da pele é um elemento fundamental para a saúde humana, tanto na ocorrência de lesões quanto em procedimentos cirúrgicos. A eficácia do processo de cicatrização pode ainda ser apriomorada através do desenvolvimento de produtos que tenham origem em plantas com uso tradicional, esta importância é potencializada quando levamos em consideração que o Brasil é um país megadiverso, sendo a região Amazônica o grande celeiro desta diversidade. Assim, neste estudo buscamos deselvolver um composto pró cicatrização a base dos óleos de andiroba (Carapa guianensis), copaíba (Copaifera langsdorffii) e do pó de Guaraná (Paullinia Cupana), três plantas de origem amazônica que possuem potencial efeito cicatrizante via modulação da fase inflamatória e proliferativa de fibroblastos. É possível que a combinação dos óleos e guaraná resulte em um potencial produto farmacológico inovador, com alto potencial prócicatricial. OBJETIVOS: Geral: Desenvolver e Analisar o efeito de um produto obtido via extração combinada de andiroba, copaíba e guaraná (ACG) sob a forma de óleo bifásico e emulsão através da análise de modelos de cicatrização in vitro e in vivo. Específicos: Realizar as análises utilizando fibroblastos dérmicos e minhoca californiana Eisenia fetida, modelo in vivo de regeneração corporal via incisão cirúrgica da região caudal. MÉTODO: Por se tratar de um estudo que não envolve contato direto com vertebrados, não houe necessidade de aprovação em Comitê de ética. Após a obtenção do ACG a capacidade antioxidante e genotóxica/ genoprotetora foi avaliada em testes não celulares. Para os testes utilizando-se a linhagem comercial de fibroblastos dérmicos HFF-1 e minhocas californianas (Eisenia Fetida), também obtidas comercialmente. As células foram cultivadas em condições padronizadas, e nestas foi realizado o teste strach assay (modelo in vitro de lesão na pele) as células foram tratadas com o ACG em diferentes concentrações e após inclubção de 24/72 horas, testes de viabilidade/ proliferação celular marcadores de crescimento, estresse oxidativo e inflamação foram analisados. No modelo in vivo, os animais tiveram uma incisão caudal foram imediatamente tratados com ACG sob a forma de óleo e emulsão, após 24 horas foi analisada a expressão gênica e após 7 dias fez se a análise dos padrões de regeneração. A análise estatística foi realizada por análise de variância de uma via seguida de teste post hoc de Tukey. Sendo considerados significativos testes com p < 0.05. RESULTADOS:Como resultados do estudo o ACG demonstrou forte atividade antioxidante, e não foi genotóxico nos testes aqui realizados. Frente aos modelos celulares apresentou ação antioxidante, antiinflamatória e pró-cicatricial. Nos testes in vivo foi capaz de modular positivamente o gene SOX-4 totalmente relacionado ao processo de regeneração/ cicatrização, ainda na presença do óleo ACG o processo de regeneração se deu de maneira mais intensa inclusive com melhor angiogenese. CONCLUSÕES: Assim, apesar das limitações metodológicas, consideramos relavantes os dados obtidos neste estudo uma vez que foi desenvolvido um novo produto aqui denominado ACG, cujo os resultados iniciais mostram ação antioxidante, anti-inflamatória e pró-cicatrização do composto desenvolvido, mais estudos precisam ser realizados para comprovação dos resultados aqui obtidos, entretanto acreditamos que futuramente o desenvolvimento de um produto comercial com fins clínicos poderá ser uma realidade.BACKGROUND: The skin is the largest organ of the human body and its functions are to coat, delimit, protect and interact with the external environment. Thus, skin healing is a fundamental element for human health, both in the occurrence of injuries and in surgical procedures. The effectiveness of the healing process can be further enhanced through the development of products that originate from plants with traditional use, this importance is enhanced when we consider that p Brazil is a megadiverse country, being the Amazon region the great granary of this diversity. Thus, in this study we sought to develop a healing compound based on andiroba (Carapa guianensis), copaíba (Copaifera langsdorffii) and Guarana (Paullinia Cupana) oils, three plants of Amazonian origin that have potential healing effect via phase modulation inflammatory and proliferative fibroblasts. It is possible that the combination of oils and guarana will result in a potential innovative pharmacological product with high pro-healing potential. OBJECTIVES: General: Develop and analyze the effect of a product obtained via combined extraction of andiroba, copaiba and guarana (ACG) in the form of biphasic oil and emulsion through the analysis of in vitro and in vivo healing models. Specific: Perform the analysis using dermal fibroblasts and Californian worm Eisenia fetida, in vivo model of body regeneration via surgical incision of the caudal region. METHOD: Because it is a study that does not involve direct contact with vertebrates, there is no need for approval by the Ethics Committee. After obtaining the ACG the antioxidant and genotoxic / genoprotective capacity was evaluated in non-cellular tests. For the tests using the commercially derived dermal fibroblast line HFF-1 and Californian worms (Eisenia Fetida), also commercially obtained. The cells were cultured under standard conditions, and in these strach assay (in vitro skin lesion model) tests were performed. The cells were treated with ACG at different concentrations and after 24/72 hour inclination, viability tests / cell proliferation. Growth markers, oxidative stress and inflammation were analyzed. In the in vivo model, the animals had a caudal incision were immediately treated with ACG in the form of oil and emulsion, after 24 hours gene expression was analyzed and after 7 days regeneration patterns were analyzed. Statistical analysis was performed by one-way analysis of variance followed by Tukey post hoc test. Considering significant tests with p <0.05. RESULTS: As a result of the study, ACG demonstrated strong antioxidant activity, and was not genotoxic in the tests performed here. In front of the cellular models presented antioxidant action, anti-inflammatory and pro-cicatricial. In in vivo tests it was able to positively modulate the SOX-4 gene totally related to the regeneration / healing process, even in the presence of ACG oil the regeneration process was more intense even with better angiogenesis. CONCLUSIONS: Thus, despite the methodological limitations, we consider the data obtained in this study to be relevant since a new product called ACG was developed here, whose initial results show antioxidant action, anti-inflammatory and pro-healing of the developed compound, more studies need to be performed. To prove the results obtained here, however, we believe that in the future the development of a commercial product for clinicalSIM, NO PREENCHIMENTO, POIS O FORMULÁRIO APRESENTOU ALGUNS ENTRAVES, TIPO:TRAVAVA DE UM CAMPO PARA OUTRO.SIM, É UM TRABALHO RELEVANTE PARA A COMUNIDADE ACADÊMICA E PESQUISADORES EM GERAL DA ÁREA DA SAÚDE.Universidade Federal do AmazonasFaculdade de MedicinaBrasilUFAMPrograma de Pós-graduação em CirurgiaNunes, Juscimar Carneirohttp://lattes.cnpq.br/5176111589367570Byk, Jonashttp://lattes.cnpq.br/5345312521055243Costa, Cleinaldo de Almeidahttp://lattes.cnpq.br/1726129681219575Ribeiro Filho, Euler Esteveshttp://lattes.cnpq.br/8048560036844987https://orcid.org/0000-0001-8211-84642021-06-23T21:04:31Z2019-08-08info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfRIBEIRO FILHO, Euler Esteves. Desenvolvimento e análise do efeito de um extrato combinado de andiroba, copaíba e guaraná em modelos de cicatrização in vitro e in vivo. 2019. 83 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2019.https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8324porhttp://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAMinstname:Universidade Federal do Amazonas (UFAM)instacron:UFAM2021-06-24T05:04:01Zoai:https://tede.ufam.edu.br/handle/:tede/8324Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://200.129.163.131:8080/PUBhttp://200.129.163.131:8080/oai/requestddbc@ufam.edu.br||ddbc@ufam.edu.bropendoar:65922021-06-24T05:04:01Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM - Universidade Federal do Amazonas (UFAM)false |
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JUSTIFICATIVA: A pele é o maior órgão do corpo humano e tem como funções revestir, delimitar, proteger e interagir com o meio exterior. Assim, a cicatrização da pele é um elemento fundamental para a saúde humana, tanto na ocorrência de lesões quanto em procedimentos cirúrgicos. A eficácia do processo de cicatrização pode ainda ser apriomorada através do desenvolvimento de produtos que tenham origem em plantas com uso tradicional, esta importância é potencializada quando levamos em consideração que o Brasil é um país megadiverso, sendo a região Amazônica o grande celeiro desta diversidade. Assim, neste estudo buscamos deselvolver um composto pró cicatrização a base dos óleos de andiroba (Carapa guianensis), copaíba (Copaifera langsdorffii) e do pó de Guaraná (Paullinia Cupana), três plantas de origem amazônica que possuem potencial efeito cicatrizante via modulação da fase inflamatória e proliferativa de fibroblastos. É possível que a combinação dos óleos e guaraná resulte em um potencial produto farmacológico inovador, com alto potencial prócicatricial. OBJETIVOS: Geral: Desenvolver e Analisar o efeito de um produto obtido via extração combinada de andiroba, copaíba e guaraná (ACG) sob a forma de óleo bifásico e emulsão através da análise de modelos de cicatrização in vitro e in vivo. Específicos: Realizar as análises utilizando fibroblastos dérmicos e minhoca californiana Eisenia fetida, modelo in vivo de regeneração corporal via incisão cirúrgica da região caudal. MÉTODO: Por se tratar de um estudo que não envolve contato direto com vertebrados, não houe necessidade de aprovação em Comitê de ética. Após a obtenção do ACG a capacidade antioxidante e genotóxica/ genoprotetora foi avaliada em testes não celulares. Para os testes utilizando-se a linhagem comercial de fibroblastos dérmicos HFF-1 e minhocas californianas (Eisenia Fetida), também obtidas comercialmente. As células foram cultivadas em condições padronizadas, e nestas foi realizado o teste strach assay (modelo in vitro de lesão na pele) as células foram tratadas com o ACG em diferentes concentrações e após inclubção de 24/72 horas, testes de viabilidade/ proliferação celular marcadores de crescimento, estresse oxidativo e inflamação foram analisados. No modelo in vivo, os animais tiveram uma incisão caudal foram imediatamente tratados com ACG sob a forma de óleo e emulsão, após 24 horas foi analisada a expressão gênica e após 7 dias fez se a análise dos padrões de regeneração. A análise estatística foi realizada por análise de variância de uma via seguida de teste post hoc de Tukey. Sendo considerados significativos testes com p < 0.05. RESULTADOS:Como resultados do estudo o ACG demonstrou forte atividade antioxidante, e não foi genotóxico nos testes aqui realizados. Frente aos modelos celulares apresentou ação antioxidante, antiinflamatória e pró-cicatricial. Nos testes in vivo foi capaz de modular positivamente o gene SOX-4 totalmente relacionado ao processo de regeneração/ cicatrização, ainda na presença do óleo ACG o processo de regeneração se deu de maneira mais intensa inclusive com melhor angiogenese. CONCLUSÕES: Assim, apesar das limitações metodológicas, consideramos relavantes os dados obtidos neste estudo uma vez que foi desenvolvido um novo produto aqui denominado ACG, cujo os resultados iniciais mostram ação antioxidante, anti-inflamatória e pró-cicatrização do composto desenvolvido, mais estudos precisam ser realizados para comprovação dos resultados aqui obtidos, entretanto acreditamos que futuramente o desenvolvimento de um produto comercial com fins clínicos poderá ser uma realidade. |
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