Toxicidade, caracterização molecular de bacillus sphaericus da amazônia e parâmetros do crescimento microbiano para a produção de bioinseticida.

• Autor(a) principal: Litaiff, Eleilza de Castro
• Data de Publicação: 2006
• Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/7622922403539879
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM
• Texto Completo: http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/3063
• topic: Controle biológico; Mosquitos; Bacillus sphaericus; Caracterização molecular; Biolarvicidas; Entomopatogênicos; Biological control; Mosquitoes; Bacillus sphaericus; Molecular characterisation; Biolarvicides; Entomopatogenics; CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

A atividade larvicida de B. sphaericus, procedentes de diversas localidades da Amazônia, foi estimada por meio de bioensaios com Anopheles darlingi e Culex quinquefasciatus. Pela análise de Probit foi determinada a concentração letal mediana (CL50) e a potência em relação à estirpe padrão 2362. Os resultados apontaram as estirpes IB15 (CL50 = 0,040 ppm), IB19 e S1116 (CL50 = 0,048 ppm), IB16 (CL50 = 0,052 ppm) e S265 (CL50 = 0,057 ppm) como mais efetivas, sendo IB15 com potência cerca de 50% superior à estirpe 2362 nos bioensaios realizados contra A. darlingi e IB16 e S1116 mais potentes nos testes com C. quinquefasciatus, mostrando-se cerca de 300-400% superiores. Na caracterização molecular o gene da toxina binária foi diagnosticado em todas as estirpes estudadas e a toxina MTX1 foi observada em apenas quatorze estirpes. Com base nas sequências de BinA, foram observados 23 sítios polimórficos nas sequências, sendo apenas quatro informativos para parcimônia. Ao total obteve-se dez haplótipos entre as estirpes da Amazônia, sendo o haplótipo 1 (nove estirpes) similar a 2362 (Tipo 2) e o restante com sequências distintas. Os 16 sítios polimórficos observados nas sequências de aminoácidos resultaram em 19 aminoácidos variantes e, com base na distância genética, não foi possível estabelecer uma correlação entre variações nas sequências da toxina BinA e o nível de toxicidade, bem como a procedência das estirpes. Como B. sphaericus desperta um interesse biotecnológico na produção de biolarvicidas para controle de mosquitos vetores, foi estudado o crescimento microbiano da estirpe IB15 em meio NYSM, durante 24 horas de fermentação. IB15 apresentou um perfil de crescimento semelhante à estirpe 2362 quanto às produções de células, esporos, biomassa e em atividade larvicida ao longo da fermentação. Ao final, obteve-se 1,61x109 esporos.mL-1 com IB15 e 6,46x108 esporos.mL-1 com 2362. Os valores de TL50 foram semelhantes, sendo em média 2,5h nos testes com uma cultura do bacilo ao final de 24 horas. A estirpe IB15 demonstrou ser adequada para crescimento em meio NYSM, apresentando níveis desejados de produção de esporos e toxinas ao longo da fermentação. São necessários estudos complementares sobre produção em grande escala com essa estirpe para o desenvolvimento de biolarvicidas. Portanto, com os resultados obtidos nesse trabalho, verifica-se a grande importância do controle biológico de mosquitos com o emprego de bactérias entomopatogênicas, mostrando ser uma alternativa ou complemento viável no controle de mosquitos vetores na Amazônia.