EFEITOS DA REDUÇÃO DO TEMPO DE FIXAÇÃO EM GLUTARALDEÍDO E DA DESCELULARIZAÇÃO SOBRE AS CARACTERÍSTICAS DO PERICÁRDIO BOVINO E SUA CALCIFICAÇÃO IN VIVO

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Dourado, Raísa Cavalcante
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFBA
Texto Completo: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36312
Resumo: Introdução: Biopróteses valvulares cardíacas, fabricadas com pericárdio bovinofixado em glutaraldeído, são as mais utilizadas para substituir valvas defeituosas na doença valvar cardíaca. Entretanto, requerem substituição entre 10 a 15 anos após implantação, por degeneração estrutural associada à calcificação que ocorre nos folhetos de pericárdio bovino da bioprótese. As principais estratégias para minimizar a calcificação tardia pós-implante são voltadas para o processamento químico desse pericárdio. A redução do tempo de fixação com glutaraldeído, a incubação em aminoácidos para a inativação dos aldeídos residuais de glutaraldeído e a descelularização prévia do pericárdio bovino já foram sugeridas na literatura, mas carecem de maior investigação para uma efetiva aplicação clínica. Além disso, o efeito combinado das referidas técnicas anticalcificantes ainda não foi estudado. Objetivo: Avaliar o efeito da descelularização e da redução do tempo de fixação com glutaraldeído sobre as propriedades físicas de pericárdios bovinos, em comparação com pericárdios certificados, bem como analisar o efeito desses tratamentos sobre a calcificação in vivo de pericárdios bovinos destinados ao uso em biopróteses valvulares cardíacas. Material e métodos: Os pericárdios bovinos foram divididos em grupos: PB10d (fixados com glutaraldeído por 10 dias), PB5d (fixadas com glutaraldeído por 5 dias) – ambos celularizados, e PB5dAC (amostras acelulares e fixadas com glutaraldeído por 5 dias). Após a fixação, todas as amostras foram tratadas em solução do aminoácido ácido glutâmico e caracterizadas por testes mecânicos e de estabilidade térmica, além da avaliação histológica por microscopia de luz, microscopia eletrônica de varredura e análise para o teor de cálcio por espectrometria de emissão ótica, com plasma indutivamente acoplado. Os tecidos foram implantados em tecido subcutâneo de ratos e foram obtidos explantes seriados após 7, 14, 28, 60 e 120 dias foram submetidos à nova avaliação com as mesmas técnicas supracitadas. Resultados: A análise microscópica revelou modificações nas fibras colágenas e elásticas nos grupos de PB10d e PB5dAC, mas não houve alterações nas propriedades mecânicas e térmicas teciduais. Para todos os tempos biológicos empregados no estudo, a reação inflamatória foi similar entre PB5d e PB5dAC e menos intensa em comparação com PB10d. Os valores de calcificação foram baixos em todos os grupos, com um menor conteúdo de cálcio em PB5dAC. Conclusão: O tratamento combinado de descelularização, fixação com glutaraldeído por 5 dias e pós-tratamento com ácido glutâmico diminuiu a calcificação e a inflamação do pericárdio bovino em um modelo de implantação subcutânea em ratos, sem alterar as propriedades físicas e biológicas, importantes para a confecção de BVCs
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Objetivo: Avaliar o efeito da descelularização e da redução do tempo de fixação com glutaraldeído sobre as propriedades físicas de pericárdios bovinos, em comparação com pericárdios certificados, bem como analisar o efeito desses tratamentos sobre a calcificação in vivo de pericárdios bovinos destinados ao uso em biopróteses valvulares cardíacas. Material e métodos: Os pericárdios bovinos foram divididos em grupos: PB10d (fixados com glutaraldeído por 10 dias), PB5d (fixadas com glutaraldeído por 5 dias) – ambos celularizados, e PB5dAC (amostras acelulares e fixadas com glutaraldeído por 5 dias). Após a fixação, todas as amostras foram tratadas em solução do aminoácido ácido glutâmico e caracterizadas por testes mecânicos e de estabilidade térmica, além da avaliação histológica por microscopia de luz, microscopia eletrônica de varredura e análise para o teor de cálcio por espectrometria de emissão ótica, com plasma indutivamente acoplado. 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Conclusão: O tratamento combinado de descelularização, fixação com glutaraldeído por 5 dias e pós-tratamento com ácido glutâmico diminuiu a calcificação e a inflamação do pericárdio bovino em um modelo de implantação subcutânea em ratos, sem alterar as propriedades físicas e biológicas, importantes para a confecção de BVCsIntroduction: Bioprosthetic heart valves manufactured with bovine pericardium fixed in glutaraldehyde are the most used to replace defective valves in heart valve disease. However, they require replacement between 10 and 15 years after implantation, due to structural degeneration that is associated with calcification that occurs in bovine pericardium leaflets of bioprosthesis. The main strategies to minimize late post-implantation calcification are focused on the chemical processing of bovine pericardium. The reduction of fixation time with glutaraldehyde, the incubation in amino acids for the inactivation of residual glutaraldehyde aldehydes and the previous decellularization of bovine pericardium have already been suggested by literature, but they need further investigation for an effective clinical application. Furthermore, the combined effect of said anti-calcification techniques has not yet been studied. Objective: To evaluate the effect of decellularization and reduction of fixation time with glutaraldehyde on physical properties of bovine pericardium samples compared to bovine certified pericardium samples, as well as to analyze the effect of these treatments on in vivo calcification of bovine pericardium samples intended for use in heart valves bioprostheses. Material and methods: The bovine pericardium samples were divided into groups: BP10d (fixed with glutaraldehyde for 10 days), BP5d (fixed with glutaraldehyde for 5 days) - both cellularized, and BP5dAC (acellular samples and fixed with glutaraldehyde for 5 days). After fixation, all samples were treated in glutamic acid amino acid solution and characterized by mechanical and thermal stability tests, in addition to histological evaluation by light microscopy, scanning electron microscopy and analysis for the content of calcium by inductively coupled plasma optical emission spectrometry. The tissues were implanted in subcutaneous tissue of rats and serial explants that were obtained after 7, 14, 28, 60 and 120 days were submitted to a new evaluation by ML, SEM and ICP-OES. Results: Microscopic analysis revealed changes in collagen and elastic fibers in the BP10d and BP5dAC groups, but there were no changes on tissue mechanical and thermal properties. For all biological times employed in the study, inflammatory reaction was similar between BP5d and BP5dAC and less intense compared to BP10d. Calcification values were low in all groups, with a lower calcium content in BP5dAC. Conclusion: The combined treatment of decellularization, fixation with glutaraldehyde for 5 days and post-treatment with glutamic acid decreased bovine pericardium calcification and inflammation in a model of subcutaneous implantation in rats, without altering physical and biological properties which are important for the manufacture of bioprosthetic heart valves.Submitted by Raísa Dourado (raisadourado@yahoo.com.br) on 2022-11-19T23:48:17Z No. of bitstreams: 1 TESE FINAL 17.11.2022 - 21h40min.pdf: 3204436 bytes, checksum: c7fcd36eba9d1926bc6fa71cc2da3b18 (MD5)Approved for entry into archive by Rafael Nunes (rafaeln@ufba.br) on 2022-11-21T16:23:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE FINAL 17.11.2022 - 21h40min.pdf: 3204436 bytes, checksum: c7fcd36eba9d1926bc6fa71cc2da3b18 (MD5)Made available in DSpace on 2022-11-21T16:23:42Z (GMT). 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