Avaliação de novos antígenos para imunodiagnóstico em Esquistossomose e Tricuríase

• Autor(a) principal: Santiago, Leonardo Freire
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFBA
• Texto Completo: http://repositorio.ufba.br/ri/handle/ri/24204
• topic: Biotecnologia; Diagnóstico; Esquistossomose; Tricuriase; Proteínas recombinantes Candidatos; Antígenos; rFBPA e Sm200 rSm200 (1) e (2

A esquistossomose e a tricuríase são consideradas um grave problema de saúde pública no Brasil e no mundo. Milhares de pessoas ainda sofrem com as consequências clinicas geradas por essas infecções. Métodos de diagnóstico práticos, sensíveis e específicos são considerados essenciais no auxílio ao controle dessas doenças, vistos que podem identificar os indivíduos e as comunidades que possuem a necessidade de intervenção. Dessa maneira, este trabalho buscou avaliar in vitro o potencial imunorreativo das proteínas recombinantes Frutose Bifosfato Aldolase (rFBPA) do Trichuris trichiura, e de dois fragmentos da proteína Sm200 (rSm200 (1) e (2)) do Schistosoma mansoni, para uso em imunodiagnóstico. Os genes correspondentes as proteínas selecionadas foram avaliados in silico e as sequências codificadoras foram clonadas em vetores de expressão, os quais foram transformados em várias linhagens de Escherichia coli. A purificação foi realizada através de cromatografia de afinidade usando colunas de Ni+ no ÄKTA TM Pure 25® (GE Healthcare). A avaliação da imunoreatividade das proteínas foi determinada por dot blot, utilizando soro de pacientes infectados com S. mansoni ou T. Trichiura e de pacientes sadios, todos provenientes de Salvador Bahia, previamente absorvidos com antígeno de Ascaris lumbricoides para evitar reação cruzada. O método utilizado para expressão, purificação e diálise das proteínas rFBPA e Sm200 rSm200 (1) e (2) mostrou-se eficiente, já que as proteínas recombinantes foram purificadas com alto grau de pureza e concentração. A partir da análise do dot blot foi possível determinar que os soros positivos para T trichiura reagiram com a rFBPA, bem como os soros positivos para S. mansoni reagiram com a rSm200 (1) e (2). Não houve reconhecimento antigênico entre os anticorpos presente nos soros negativos com as proteínas recombinantes rFBPA e rSm200 (1) e (2). Concluindo, nesse trabalho foi possível avaliar a imunoreatividade de IgG total contra as proteínas recombinantes de T. trichuria e S. mansoni, contudo mais estudos são necessários para testar a sensibilidade e especificidade desses antígenos utilizando outros testes imunológicos como ELISA.