Estudo do efeito da modulação de caveolina-1 em carcinoma epidermóide de boca

• Autor(a) principal: Nascimento, Rebeca Barros
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFBA
• Texto Completo: https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36779
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIA; Carcinoma epidermóide de boca; Transição epitelial-mesenquimal; Caveolina1; Depleção de colesterol; Oral squamous cell carcinoma; Epitelial-mesenchymal transition; Caveolin-1; Cholesterol depletion

Introdução: O Carcinoma epidermóide bucal (CEB) apresenta capacidade invasiva e metastática como consequência de alterações fenotípicas e genotípicas, como o processo de transição epitelial-mesenquimal (TEM). Alterações nas membranas das células podem afetar a estrutura de cavéolas, compostas por colesterol e caveolinas (CAV), estando associadas ao processo de tumorigênese. A depleção de colesterol e alteração da expressão de CAV1 podem afetar células tumorais e interferir na carcinogênese. Objetivo: Avaliar a expressão de CAV1 em tumores de CEB e o efeito da depleção de colesterol e do silenciamento de CAV1 (siCAV1) em linhagens celulares de CEB de língua. Material e métodos: Hibridização por microarray, expressão de mRNA e imunohistoquímica foram realizadas em amostras de CEB e de tecido não tumoral (margem). Os tumores foram divididos nos grupos: mais (T1 / T2 N +, n = 14) e menos (T3 / T4 N0, n = 19) agressivos. O efeito da depleção de colesterol e do silenciamento de CAV1 foram analisados em linhagens celulares SCC-25, com perfil não metastático, e HSC-3, com perfil metastático, e foram avaliados viabilidade celular, fluidez da membrana, expressão gênica e protéica de CAV1 e dos marcadores de TEM (E-caderina, N-caderina, β-catenina e Vimentina) e suas capacidades migratória e invasiva. Resultados: CAV1 foi 1,77 vezes mais expressa em tumores do que em tecidos não tumorais e cerca de 2 x mais expresso em tumores mais agressivos do que em menos agressivos. qRT-PCR não mostrou diferença na expressão de CAV1 em nenhuma comparação feita. A proteína CAV1 foi localizada tanto no epitélio tumoral quanto no estroma, em três padrões diferentes. Positividade no estroma foi associado a tumores de maior tamanho. Além disso, as células epiteliais tumorais positivas para CAV1 tenderam a estar associadas a CAV1 baixo ou negativo no estroma tumoral. A depleção de colesterol reudziu a viabilidade celular e fluidez de membrana nas células SCC-25, enquanto que a viabilidade das células HSC-3 foi menos afetada pela depleção e sem alterações na fluidez da membrana. A depleção de colesterol interferiu na expressão de CAV1 e de marcadores de TEM em ambas as células, e diminuiu sua capacidade migratória, sendo a SCC-25 mais afetada. A capacidade invasiva das células metastáticas também reduziu, mas a das células não metastáticas aumentou com a depleção de colesterol. O siCAV-1 aumentou a viabilidade celular apenas em SCC-25 e a expressão gênica de marcadores de TEM (N-caderina e β-catenina), mas não os níveis de proteína, apenas em HSC-3. Além disso, o siCAV1 estimulou a capacidade de invasão de células metastáticas. Conclusão: A mudança da expressão de CAV1 de células epiteliais tumorais para células estromais tumorais pode ser útil para prever a agressividade do CEB. Tanto a depleção de colesterol quando o siCAV1 alteram a viabilidade de células tumorais e afetam a expressão de marcadores de TEM, o que interfere nas capacidades migratória e invasiva. A resposta celular à depleção de colesterol foi diferente da resposta ao silenciamento de CAV1, o que também variou entre as células não metastáticas e metastáticas.