Avaliação dos efeitos citotóxicos e antitumorais do extrato etanólico de Physalis angulata L. Em células de linhagem tumoral C6 de glioblastoma
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Data de Publicação: | 2022 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Texto Completo: | https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36456 |
Resumo: | Os glioblastomas são tumores cerebrais de células gliais de alto grau que apresentam um prognóstico ruim. Possuem grande capacidade de migração, proliferação e invasão ao tecido cerebral, o que reduz as chances de sucesso do tratamento. Novos alvos terapêuticos são estudados a fim de aumentar a eficácia dos tratamentos e diminuir efeitos colaterais. Análise e prospecção de metabólitos secundários de plantas são estudados surgindo como uma possibilidade no desenvolvimento de novas terapias. Physalis angulata L. é uma espécie vegetal rica em componentes químicos e promissora para a indústria farmacêutica. Possui dentre muitos benefícios comprovados, a ação antitumoral e citotóxica. O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato etanólico de Physalis angulata L. (EEPA) em células de linhagem tumoral C6 de glioblastoma murino. Como metodologia, a citotoxicidade foi avaliada por MTT. O óxido nítrico foi dosado pelo método de Griess. A migração celular foi analisada a partir do ensaio de migração. A morfologia celular foi avaliada por imunocitoquímica com imunomarcação de EGFR e método de coloração Rosenfeld. A expressão de proteínas foi avaliada pelo método western blotting. A capacidade de restauração tecidual foi analisada pelo ensaio de migração celular. Os resultados foram analisados pelo programa estatístico Graphpad Prism 8.10 e os dados foram expressos em média ± erro padrão da média dos parâmetros analisados. Como resultados, notou-se através do ensaio de MTT, que o EEPA foi citotóxico acima da concentração 5 μg/mL, sendo então escolhidas as concentrações 0,5 μg/mL, 1 μg/mL e 2,5 μg/mL para modulação dos experimentos seguintes. Na análise da expressão do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) por imunocitoquímica, houve a diminuição da expressão do EGFR nas concentrações 1 μg/mL e 2,5 μg/mL. Já no Rosenfeld, nas concentrações 1 μg/mL e 2,5 μg/mL tivemos uma quantidade menor de células e presença de prolongamentos menores e mais finos, e corpo celular menor quando comparado aos controles. O western blotting demonstrou uma menor expressão do EGFR nas concentrações testadas quando comparado ao controle. O ensaio de migração demonstrou capacidade inibitória do composto na migração celular. Os resultados obtidos neste estudo podem indicar capacidade citotóxica, redução da expressão e da capacidade migratória das células C6 quando moduladas com o EEPA. |
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2023-01-09T16:10:46Z2023-01-09T16:10:46Z2022-12-14SOUZA, B. V. Avaliação dos efeitos citotóxicos e antitumorais do extrato etanólico de Physalis angulata L. em células de linhagem tumoral C6 de glioblastoma. 2022. Dissertação (Mestrado em Imunologia) - Instituto de Ciências da Saúde, Universidade Federal da Bahia, Salvador.https://repositorio.ufba.br/handle/ri/36456Os glioblastomas são tumores cerebrais de células gliais de alto grau que apresentam um prognóstico ruim. Possuem grande capacidade de migração, proliferação e invasão ao tecido cerebral, o que reduz as chances de sucesso do tratamento. Novos alvos terapêuticos são estudados a fim de aumentar a eficácia dos tratamentos e diminuir efeitos colaterais. Análise e prospecção de metabólitos secundários de plantas são estudados surgindo como uma possibilidade no desenvolvimento de novas terapias. Physalis angulata L. é uma espécie vegetal rica em componentes químicos e promissora para a indústria farmacêutica. Possui dentre muitos benefícios comprovados, a ação antitumoral e citotóxica. O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato etanólico de Physalis angulata L. (EEPA) em células de linhagem tumoral C6 de glioblastoma murino. Como metodologia, a citotoxicidade foi avaliada por MTT. O óxido nítrico foi dosado pelo método de Griess. A migração celular foi analisada a partir do ensaio de migração. A morfologia celular foi avaliada por imunocitoquímica com imunomarcação de EGFR e método de coloração Rosenfeld. A expressão de proteínas foi avaliada pelo método western blotting. A capacidade de restauração tecidual foi analisada pelo ensaio de migração celular. Os resultados foram analisados pelo programa estatístico Graphpad Prism 8.10 e os dados foram expressos em média ± erro padrão da média dos parâmetros analisados. Como resultados, notou-se através do ensaio de MTT, que o EEPA foi citotóxico acima da concentração 5 μg/mL, sendo então escolhidas as concentrações 0,5 μg/mL, 1 μg/mL e 2,5 μg/mL para modulação dos experimentos seguintes. Na análise da expressão do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) por imunocitoquímica, houve a diminuição da expressão do EGFR nas concentrações 1 μg/mL e 2,5 μg/mL. Já no Rosenfeld, nas concentrações 1 μg/mL e 2,5 μg/mL tivemos uma quantidade menor de células e presença de prolongamentos menores e mais finos, e corpo celular menor quando comparado aos controles. O western blotting demonstrou uma menor expressão do EGFR nas concentrações testadas quando comparado ao controle. O ensaio de migração demonstrou capacidade inibitória do composto na migração celular. Os resultados obtidos neste estudo podem indicar capacidade citotóxica, redução da expressão e da capacidade migratória das células C6 quando moduladas com o EEPA.Glioblastomas are high grade glial cell brain tumors that have a poor prognosis. They have a great capacity for migration, proliferation and invasion into brain tissue, which reduces the chances of treatment success. New therapeutic targets are studied in order to increase the efficacy of treatments and decrease side effects. Analysis and prospection of plant secondary metabolites are being studied as a possibility in the development of new therapies. Physalis angulata L. is a plant species rich in chemical components and promising for the pharmaceutical industry. It has, among many proven benefits, the antitumor and cytotoxic action. The objective of this work is to study the action of P. angulata L. ethanolic extract (EEPA) on murine glioblastoma C6 tumor cells. As a methodology, cytotoxicity was evaluated by MTT. Nitric oxide was dosed by Griess method. Cell migration was analyzed from migration assay. Cell morphology was evaluated by immunocytochemistry with EGFR immunolabeling and Rosenfeld staining method. Protein expression was evaluated by Western blotting method. Cell migration was analyzed by cell migration assay. The results were analyzed by Graphpad Prism 8.10 statistical program and the data were expressed as mean ± standard error of the mean of the analyzed parameters. As results, it was noted through MTT assay, that EEPA was cytotoxic above the concentration 5 μg/mL, being then chosen the concentrations 0.5, 1 and 2.5μg/mL for modulation of the following experiments. In the analysis of EGFR expression by immunocytochemistry, there was a decrease in EGFR expression at concentrations 1 and 2.5μg/mL. In the Rosenfeld test, at concentrations 1 and 2.5μg/mL we had fewer cells and the presence of smaller and thinner prolongations, and a smaller cell body when compared to controls. Western blotting demonstrated a lower expression of EGFR at the concentrations tested when compared to the control. The migration assay demonstrated inhibitory capacity of the compound on cell migration. The results obtained in this study may indicate cytotoxic capacity, reduced expression and migratory capacity of C6 cells when modulated with EEPASubmitted by BRENDA SOUZA (brendavalerio@gmail.com) on 2023-01-06T20:54:58Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 701 bytes, checksum: 42fd4ad1e89814f5e4a476b409eb708c (MD5) VERSÃO-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdf: 1272853 bytes, checksum: 878643f6071814041ec73ab6d84a27b5 (MD5)Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2023-01-09T16:10:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 VERSÃO-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdf: 1272853 bytes, checksum: 878643f6071814041ec73ab6d84a27b5 (MD5) license_rdf: 701 bytes, checksum: 42fd4ad1e89814f5e4a476b409eb708c (MD5)Made available in DSpace on 2023-01-09T16:10:46Z (GMT). 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On glioblastoma c6 tumor line cellsMestrado Acadêmicoinfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionPinheiro, Alexandre Moraeshttp://lattes.cnpq.br/6309609498284949Costa, Silvia Limahttps://orcid.org/0000-0002-8975-3871http://lattes.cnpq.br/8965253841041518JUNIOR, ANÍBAL DE FREITAS SANTOSBranco, Alexsandrohttp://lattes.cnpq.br/3477981724349561Pinheiro, Alexandre Moraeshttp://lattes.cnpq.br/6309609498284949https://orcid.org/0000-0003-4991-9897http://lattes.cnpq.br/5397800188160217Souza, Brenda Valerioreponame:Repositório Institucional da UFBAinstname:Universidade Federal da Bahia (UFBA)instacron:UFBATEXTVERSÃO-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdf.txtVERSÃO-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdf.txtExtracted texttext/plain113805https://repositorio.ufba.br/bitstream/ri/36456/4/VERS%c3%83O-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdf.txt24381885b2c7da486cd9e7c110e0e966MD54ORIGINALVERSÃO-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdfVERSÃO-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdfapplication/pdf1272853https://repositorio.ufba.br/bitstream/ri/36456/1/VERS%c3%83O-FINAL-BRENDA-VALERIO.pdf878643f6071814041ec73ab6d84a27b5MD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8701https://repositorio.ufba.br/bitstream/ri/36456/2/license_rdf42fd4ad1e89814f5e4a476b409eb708cMD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain1715https://repositorio.ufba.br/bitstream/ri/36456/3/license.txt67bf4f75790b0d8d38d8f112a48ad90bMD53ri/364562023-01-14 02:03:37.209oai:repositorio.ufba.br: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Repositório InstitucionalPUBhttp://192.188.11.11:8080/oai/requestopendoar:19322023-01-14T05:03:37Repositório Institucional da UFBA - Universidade Federal da Bahia (UFBA)false |
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