Influência da atividade protetora da PrPC contra o estresse oxidativo em agregações protéicas e na expressão da proteína SOD1

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Cipriano, Samantha dos Santos
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFABC
Texto Completo: http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=79208
Resumo: Orientador: Profa. Dra. Giselle Cerchiaro
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spelling Influência da atividade protetora da PrPC contra o estresse oxidativo em agregações protéicas e na expressão da proteína SOD1SUPERÓXIDO DISMUTASEPROTEÍNA PRÍON CELULARASTRÓCITOSSUPEROXIDE DISMUTASECELLULAR PRION PROTEINASTROCYTESPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIA E TECNOLOGIA/QUÍMICA - UFABCOrientador: Profa. Dra. Giselle CerchiaroDissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC. Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia/Química, 2014.A proteina prion celular (PrPC) e expressa em varios tipos celulares, especialmente no tecido nervoso. Sua funcao fisiologica completa ainda nao e bem conhecida, no entanto,sua influencia no desenvolvimento de doencas neurodegenerativas foi bem descrito. Essas doencas, mais tarde denominadas encefalopatias espongiformes, resultam de uma mudanca conformacional da PrPC (rica em ¿¿ helices) para a forma Scrapie (PrPSC, rica em folhas ¿À). Diversos estudos mostraram a associacao da PrPC, o metabolismo do cobre e a atividade antioxidante da superoxido dismutase (SOD). Contudo, mecanismos de atuacao da PrPC, neste contexto, permanecem indefinidos. Considerando o papel protetor da PrPC amplamente reportado na literatura, foram comparados os comportamentos de celulas de astrocitos de camundongo do tipo selvagem (WWT), e nocaute para a PrPC (WKO), sob condicoes de estresse oxidativo induzido por peroxido de hidrogenio. A ativacao de caspases 3 e 8 foi avaliada, observando-se que a linhagem WKO sofre apoptose de maneira mais lenta que a linhagem WWT; e que a ativacao da apoptose na linhagem nocaute ocorre pela via extrinseca, enquanto que na linhagem selvagem ocorre pela via intrinseca. Os niveis de atividade e expressao da enzima SOD1 tambem foram acompanhados, mostrando que a PrPC modula a ativacao de SOD1 a curto prazo, mas tambem induz o aumento da expressao a medio prazo. No caso da WKO, os niveis de atividade e expressao de SOD1 se mantiveram constantes. Testes de viabilidade celular confirmaram que a linhagem WKO morre mais lentamente, e os parametros bioquimicos de oxidacao (TBARS e carbonilacao de proteinas) elevados mostraram que o delay observado e potencialmente prejudicial a cultura. Os niveis de expressao de APP bem como de GFAP foram monitorados, mostrando que a linhagem selvagem possui menor pre-disposicao a formacao de agregados proteicos e maior capacidade de recuperacao pos-estresse.The cellular prion protein (PrPC) is expressed in many cell types, especially in nervous tissue. Its physiological function is still unclear, however, his influence on the development of neurodegenerative diseases has been well described. These diseases, later called spongiform encephalopathies, are the result of a conformational change of PrPC (rich in á-helix) to the scrapie form (PrPSC rich in â-sheet). Several studies have demonstrated the association between PrPC, copper metabolism and antioxidant activity of Cu,Zn-Superoxide Dismutase (SOD1). However, action mechanisms of PrPC in this context remain undefined. Considering the protective role of the PrPC widely reported in the literature, the behavior of mouse astrocytes cells were compared to wild type (WWT), and knockout to PrPC (WKO), under conditions of oxidative stress induced by hydrogen peroxide. The activation of caspase 3 and 8 and has been evaluated, and it was observed that the knockout strain undergoes apoptosis more slowly than the wild type strain. The activation of apoptosis in the knockout strain occurs by the extrinsic route, whereas the wild type strain occurs by the intrinsic pathway. Activity levels and expression of SOD1 were also followed, showing that PrPC modulates short-term activation SOD1, and also induces increased expression in the medium term. The WKO cell type, keep activity levels and SOD1 expression constant. Cell viability tests confirmed that the strain WKO die more slowly, and biochemical parameters oxidation (TBARS and protein carbonylation) showed that the higher observed delay is potentially harmful to the cell culture. APP and GFAP expression levels were monitored, showing that the wild type has a lower predisposition to the formation of protein aggregates and higher capacity to post-stress recovery.Cerchiaro, GiselleDau, Ana Paula de Mattos ArêasSantos, Tiago Gróss dosCipriano, Samantha dos Santos2014info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf72 f. : il.http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=79208http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=79208&midiaext=71803http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=79208&midiaext=71802Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=79208porreponame:Repositório Institucional da UFABCinstname:Universidade Federal do ABC (UFABC)instacron:UFABCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2016-08-30T15:25:42Zoai:BDTD:79208Repositório InstitucionalPUBhttp://www.biblioteca.ufabc.edu.br/oai/oai.phpopendoar:2016-08-30T15:25:42Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)false
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