Diferenciação condrogênica de células tronco mesenquimais obtidas a partir de polpa de dente

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Katayose, Jackeline Suemi
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFABC
Texto Completo: http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=126580
Resumo: Orientador(a): Prof(a). Dr(a). Christiane Bertachini Lombello
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spelling Diferenciação condrogênica de células tronco mesenquimais obtidas a partir de polpa de denteCARTILAGEMCÉLULAS-TRONCODIFERENCIAÇÃO CELULARTÉCNICAS DE CULTURA CELULARCARTILAGESTEM CELLSCELL DIFFERENTIATIONCELL CULTURE TECHNIQUESPROGRAMA DE PÓS GRADUAÇÃO EM ENGENHARIA BIOMÉDICAOrientador(a): Prof(a). Dr(a). Christiane Bertachini LombelloDissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica, São Bernardo do Campo, 2023.Devido ao seu alto potencial proliferativo e capacidade de diferenciação, as célulastronco mesenquimais vêm sendo amplamente estudadas na aplicabilidade da terapia celular em conjunto com a engenharia biomédica como, por exemplo, no reparo do tecido cartilaginoso articular. Dentre as diversas fontes de células-tronco mesenquimais, a polpa do dente tem sido uma opção de escolha na engenharia de tecido devido ao fácil processo de obtenção e a alta capacidade de expansão celular. Deste modo, o objetivo do presente trabalho foi verificar o potencial de diferenciação condrogênica de células-tronco mesenquimais obtidas a partir da polpa de dente decíduo e serotino com a utilização de esponja de colágeno como arcabouço e a formação de micromassa. Com base nos melhores resultados de testes realizados, os protocolos foram estabelecidos internamente e seguidos para direcionar a diferenciação celular nas linhagens condrogênica, osteogênica e adipogênica. A caracterização celular se deu pela visualização da sua morfologia por meio de microscopia de luz e marcação de citometria de fluxo, a curva de crescimento também foi aplicada. Ademais, para a diferenciação condrogênica com formação de micromassa e utilização de arcabouço, as células foram visualizadas em microscopia de luz, microscopia de fluorescência por DAPI e microscopia eletrônica de varredura MEV. Os resultados obtidos resultaram em adesão ao plástico e boa capacidade proliferativa em ambas as fontes celulares, não sendo observado diferença significativa entre si, a análise morfológica seguiu os padrões esperados de células em formato de fibroblasto. Foi observado a capacidade de diferenciação celular nas três linhagens propostas partindo da visualização de coloração específica e, quanto à diferenciação condrogênica, foi verificado a presença de uma estrutura tridimensional com a formação de micromassa. Com a utilização de esponja de colágeno como arcabouço, foi possível observar por DAPI a presença de um núcleo celular arredondado, característico da diferenciação nesta linhagem. Verificando por MEV, foi possível observar que a formação de micromassa se deu independentemente da utilização de arcabouço, apresentando uma conformação celular com a produção de matriz e promoção de estruturas esferóides delimitando a sua camada externa. De tal modo, as células-tronco mesenquimais presentes na polpa de dente podem ser importantes fontes terapêuticas no reparo de tecido cartilaginoso tanto isoladamente quanto com a utilização de arcabouço. Área de Concentração: Engenharia BiomédicaDue to their high proliferative potential and differentiation capacity, mesenchymal stem cells have been widely studied in the applicability of cell therapy in conjunction with biomedical engineering, for example, in the repair of articular cartilaginous tissue. Among the various sources of mesenchymal stem cells, tooth pulp has been an option of choice in tissue engineering due to the easy obtaining process and the high capacity for cell expansion. Therefore, the objective of the present work was to verify the chondrogenic differentiation potential of mesenchymal stem cells obtained from the pulp of deciduous and serotine teeth using collagen sponge as a scaffold and the formation of micromass. Based on the best test results performed, protocols were established internally and followed to direct cell differentiation into the chondrogenic, osteogenic and adipogenic lineages. Cell characterization was carried out by visualizing their morphology through light microscopy and flow cytometry marking, the growth curve was also applied. Furthermore, for chondrogenic differentiation with micromass formation and use of scaffold, cells were visualized using light microscopy, DAPI fluorescence microscopy and SEM scanning electron microscopy. The results obtained resulted in adhesion to the plastic and good proliferative capacity in both cell sources, with no significant difference between them being observed. The morphological analysis followed the expected patterns of fibroblast-shaped cells. The capacity for cellular differentiation was observed in the three proposed lineages based on the visualization of specific staining and, regarding chondrogenic differentiation, the presence of a three-dimensional structure with the formation of a micromass was verified. Using a collagen sponge as a scaffold, it was possible to observe the presence of a rounded cell nucleus using DAPI, characteristic of differentiation in this lineage. Checking by SEM, it was possible to observe that the formation of micromass occurred independently of the use of the scaffold, presenting a cellular conformation with the production of matrix and promotion of spheroid structures delimiting its external layer. Therefore, mesenchymal stem cells present in the tooth pulp can be important therapeutic sources in the repair of cartilaginous tissue, both alone and with the use of a scaffold. Area of Concentration: Biomedical EngineeringLombello, Christiane BertachiniNascimento, Mônica Helena Monteiro doAna, Patrícia Aparecida daUniversidade Federal do ABCKatayose, Jackeline Suemi2023info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf95 f : il.http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=126580http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=126580&midiaext=81236Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=126580porreponame:Repositório Institucional da UFABCinstname:Universidade Federal do ABC (UFABC)instacron:UFABCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-05-06T14:18:17Zoai:BDTD:126580Repositório InstitucionalPUBhttp://www.biblioteca.ufabc.edu.br/oai/oai.phpopendoar:2024-05-06T14:18:17Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)false
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