Fotoinativação de Candida albicans utilizando azul de metileno como fotossensibilizador.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: QUEIROGA, Bruna Honorio de.
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFCG
Texto Completo: http://dspace.sti.ufcg.edu.br:8080/jspui/handle/riufcg/26091
Resumo: A Candida albicans é um grande desafio a saúde pública devido à quantidade de espécies resistentes aos tratamentos convencionais. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da terapia fotodinâmica na inativação de células planctônicas de Candida albicans (ATCC10231), empregando azul de metileno, 150 μg/mL, como fotossensibilizador. Alíquotas de 100 μg/mL da suspensão do fungo na concentração de 106 células/mL foram semeadas em placas de microtitulação com 96 poços, onde foi depositado o mesmo volume de azul de metileno, permanecendo em um período de pré-irradiação de 5 min. Em seguida, aplicou-se luz laser de baixa potência (comprimento de onda: 660 nm, potência: 100 mW e dose: 426 J/cm2) por 128s, utilizando um Laser semicondutor portátil (Laser DUO®, GaAlAs, InGaAlP, MM OPTICS LTDA, São Carlos, SP- Brasil). Experimentos controles foram realizados, sem iluminação e na ausência de azul de metileno, outro na presença de azul de metileno sem iluminação, e com iluminação, substituindo o fotossensibilizador por solução salina. De cada condição experimental, diluições em série (10-1 a 10-3) foram obtidas e alíquotas de 25 􀈝L foram plaqueadas em duplicata em Agar Sabouraud Dextrose. Após este período, o número de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL) foi determinado e os dados foram submetidos à análise de variância e teste de Kruskal Wallis (p <0,05). Na concentração de 150 􀈝g/mL e tempo de 5 minutos de incubação, pode- se constatar que a redução foi significativa (p˂0,05), e que na ausência de irradiação, o azul de metileno não produziu redução de UFC/mL. Conclui-se que a Terapia Fotodinâmica apresentou efeito antifúngico contra Candida albicans, podendo ser utilizada como coadjuvante ao tratamento convencional.
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Alíquotas de 100 μg/mL da suspensão do fungo na concentração de 106 células/mL foram semeadas em placas de microtitulação com 96 poços, onde foi depositado o mesmo volume de azul de metileno, permanecendo em um período de pré-irradiação de 5 min. Em seguida, aplicou-se luz laser de baixa potência (comprimento de onda: 660 nm, potência: 100 mW e dose: 426 J/cm2) por 128s, utilizando um Laser semicondutor portátil (Laser DUO®, GaAlAs, InGaAlP, MM OPTICS LTDA, São Carlos, SP- Brasil). Experimentos controles foram realizados, sem iluminação e na ausência de azul de metileno, outro na presença de azul de metileno sem iluminação, e com iluminação, substituindo o fotossensibilizador por solução salina. De cada condição experimental, diluições em série (10-1 a 10-3) foram obtidas e alíquotas de 25 􀈝L foram plaqueadas em duplicata em Agar Sabouraud Dextrose. Após este período, o número de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL) foi determinado e os dados foram submetidos à análise de variância e teste de Kruskal Wallis (p <0,05). Na concentração de 150 􀈝g/mL e tempo de 5 minutos de incubação, pode- se constatar que a redução foi significativa (p˂0,05), e que na ausência de irradiação, o azul de metileno não produziu redução de UFC/mL. Conclui-se que a Terapia Fotodinâmica apresentou efeito antifúngico contra Candida albicans, podendo ser utilizada como coadjuvante ao tratamento convencional.Candida albicans is a major challenge to public health because of to the amount of resistant species. Objective: To evaluate the effect of photodynamic therapy in the inactivation of Candida albicans planktonic cells (ATCC10231), using methylene blue, 150 mg / mL, as a photosensitizer. Method: Aliquots of 100 ug / ml of the fungal suspension in a 106 cells / ml concentration were seeded in microtiter plates with 96 wells, which was deposited with the same volume of methylene blue, remained at a 5 min pre-irradiation. Then, it was applied low power laser light (wavelength: 660 nm, power: 100 mW and dose: 426 J / cm2) for 128s using a portable semiconductor laser (Laser DUO®, GaAlAs, InGaAlP, MM OPTICS LTDA, São Carlos, SP Brazil). Control experiments were performed without illumination, in the absence and presence of methylene blue and with illumination replacing the photosensitizer by saline. In each experimental condition, serial dilutions (10-1 to 10-3) were obtained and 25 uL aliquots were seeded in Sabouraud Dextrose Agar duplicate . After this period, the number of colony forming units per milliliter (CFU / mL) was determined and the data were submitted to variance analysis and Kruskal Wallis test (p <0.05). Results: At the concentration of 150 ug / ml, and time of 5 min incubation, the reduction was significant (P0.05) in the absence of irradiation, methylene blue produced no reduction in CFU / mL. Conclusion: Photodynamic Therapy presented antifungal effect against Candida albicans and can be used as an adjunct to conventional treatment.Universidade Federal de Campina GrandeBrasilCentro de Saúde e Tecnologia Rural - CSTRUFCGSOUSA, João Nilton Lopes de.SOUSA, J. N. L.http://lattes.cnpq.br/9298652250197069RODRIGUES, Rachel de Queiroz Ferreira.RIBEIRO, Rodrigo Alves.QUEIROGA, Bruna Honorio de.20152022-06-30T18:38:29Z2022-06-302022-06-30T18:38:29Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://dspace.sti.ufcg.edu.br:8080/jspui/handle/riufcg/26091QUEIROGA, Bruna Honorio de. Fotoinativação de Candida albicans utilizando azul de metileno como fotossensibilizador. 2015. 68f. Trabalho de Conclusão de Curso (Artigo), Curso de Bacharelado em Odontologia, Centro de Saúde e Tecnologia Rural, Universidade Federal de Campina Grande - Patos - Paraíba - Brasil, 2015. Disponível em: http://dspace.sti.ufcg.edu.br:8080/jspui/handle/riufcg/26091porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFCGinstname:Universidade Federal de Campina Grande (UFCG)instacron:UFCG2022-06-30T18:38:59Zoai:localhost:riufcg/26091Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://bdtd.ufcg.edu.br/PUBhttp://dspace.sti.ufcg.edu.br:8080/oai/requestbdtd@setor.ufcg.edu.br || bdtd@setor.ufcg.edu.bropendoar:48512022-06-30T18:38:59Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFCG - Universidade Federal de Campina Grande (UFCG)false
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