Polimorfismo do RRE e ResistÃncia aos Antirretrovirais do VÃrus da ImunodeficiÃncia Humana e Efeito CitopÃtico e Replicativo In vitro da Enfuvirtida no CÃdon 36 do VÃrus Modificado pNL4-3

• Autor(a) principal: Melissa Soares Medeiros
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=10351
• topic: RRE; Enfuvirtida; 36D; Rev; RRE; Enfuvirtide; gp41; HIV; 36D; resistance; FARMACOLOGIA

IntroduÃÃo: Rev Responsive Element (RRE) à uma molÃcula RNA responsÃvel pelo transporte do mRNA viral do HIV-1 do nÃcleo para o citoplasma da cÃlula CD4, atravÃs da via RRE-Rev, essencial para a replicaÃÃo viral. As mutaÃÃes de resistÃncia a Enfuvirtida sÃo primariamente localizadas no perÃmetro de 10 aminoÃcidos do HR1, regiÃo correspondente no RRE. Caracterizar o RRE poderà fornecer uma nova abordagem terapÃutica para a terapia do HIV. Objetivos: Sequenciar e caracterizar o RRE da gp41 para avaliar sua variabilidade e correlaÃÃo com parÃmetros laboratoriais em sequÃncias de pacientes infectados pelo HIV-1 que receberam terapia antirretroviral ou virgens. Em estudo in vitro avaliar a mutaÃÃo 36D na presenÃa de Enfuvirtida. Metodologia: 62 amostras de pacientes com HIV-1 do Cearà foram coletadas e 35 sequÃncias de RRE foram obtidas e distribuÃdas em trÃs grupos para fins de anÃlise comparativa: N (virgens de terapia), T (uso de antirretroviral sem inibidor de fusÃo) e F (uso de antirretroviral associados a Enfuvirtida). SequÃncias obtidas foram alinhadas com o banco de dados de Los Alamos para HIV usando HIV BLAST Search. Estudo in vitro utilizou dois vÃrus de laboratÃrio pNLA-3 (36D e 36G) observando citopatogenicidade e proliferaÃÃo na presenÃa de doses crescentes de Enfuvirtida. Resultados: A anÃlise filogenÃtica demonstrou alta prevalÃncia do HIV-1 subtipo B (97,2%). Observou-se aumento da resposta imunolÃgica no grupo T (71,5%) comparado ao F (2,98%). MutaÃÃes mais comuns e polimorfismos do Grupo N foram Q32L (41,6%), N42S (8,3%), R46K (33,3%), L54M (41,6%); no grupo T: Q32R (8,3%), R46K (25%), L54M (33,3%); e no grupo F: Q32L (18,2%), G36D (9,1%), V38A (9,1%), N42S (27,3%), N42T (9,1%), R46K (27,3%), L54M (45,4%), K77R (54,5%). TrÃs amostras demonstraram mutaÃÃes de resistÃncia significativas para os inibidores de fusÃo. AnÃlise dos sÃtios primÃrios de ligaÃÃo do RRE observou presenÃa de mutaÃÃo 28A em 27,2% e 8,3% nos grupos F e N respectivamente, e 27S em 8,3% no grupo T. Houve pressÃo seletiva da regiÃo HR1 do HIV-1 de pacientes usando antirretroviral, independente da exposiÃÃo à Enfuvirtida. NÃo houve diferenÃa estatÃstica significativa nas curvas de p24 do vÃrus 36D comparado com 36G, independente de concentraÃÃes de T20 (p>0.05). Observou-se menor formaÃÃo de sincÃcio, com diminuiÃÃo da capacidade fusogÃnica, sem impacto na infectividade. ConclusÃo: O estudo definiu as mutaÃÃes e polimorfismos mais prevalentes no CearÃ, sugerindo alta preservaÃÃo nas regiÃes de sÃtio primÃrio de ligaÃÃo do Rev-RRE. Evidenciou baixo perfil de resistÃncia a Enfuvirtida em regimes com falha utilizando esta medicaÃÃo. Detectou-se pressÃo seletiva no HR1 do HIV-1 de pacientes em uso de Antirretroviral, independente de exposiÃÃo à Enfuvirtida. Evidenciado in vitro menor formaÃÃo sincicial no vÃrus 36D, com diminuiÃÃo na atividade fusogÃnica, mantendo infectividade.