PurificaÃÃo, caracterizaÃÃo parcial e cristalizaÃÃo de uma lectina ligante de manose das sementes de Platymiscium floribundum Vogel
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2011 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC |
Texto Completo: | http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=5882 |
Resumo: | As sementes de Platymiscium floribundum Vogel, uma espÃcie pertencente à famÃlia Leguminosae, subfamÃlia Papilionoideae, tribo Dalbergieae, possuem uma lectina manose/N-acetil-D-glicosamina especÃfica, que aglutina eritrÃcitos nativos ou tratados com enzimas proteolÃticas de coelho. A lectina de sementes de P. floribundum foi purificada por precipitaÃÃo com sulfato de amÃnio seguida por cromatografia de afinidade em matriz de Sepharose-manose. Esse procedimento resultou na lectina purificada, nomeada de PFL. O processo de purificaÃÃo da PFL foi monitorado por SDS-PAGE e atividade hemaglutinante especÃfica, observou-se que a lectina purificada à caracterizada por um perfil eletroforÃtico composto por uma Ãnica banda, com massa molecular aparente de aproximadamente 29 kDa, tanto na presenÃa quanto na ausÃncia de um agente redutor. A anÃlise por espectrometria de massa indicou que PFL possui massa molecular de 27.054  2 Da, e teve sua estrutura primaria parcialmente sequenciada atravÃs de espectrometria de massa sequencial. PFL à uma glicoproteÃna e demonstra elevada estabilidade, sendo capaz de manter sua atividade hemaglutinante apÃs exposiÃÃo a temperaturas de atà 60  C por 1 hora e na faixa de pH de 7,0 a 9,0. A PFL nÃo apresentou atividade anti-inflamatÃria.em modelo de edema de pata. PFL foi cristalizada em diferentes condiÃÃes de cristalizaÃÃo. |
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