Piericidina A1 de Streptomyces SP. recuperada de sedimento do arquipÃlago Fernando de Noronha altera fenÃtipo de cÃlulas tumorais

• Autor(a) principal: Katharine Gurgel Dias FlorÃncio
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=18698
• topic: FARMACOLOGIA

O cÃncer à um grande problema de saÃde e apresenta grande complexidade biolÃgica, tornando extremamente difÃcil o desenvolvimento de estratÃgias terapÃuticas eficazes para tratamento da doenÃa sobretudo em estados avanÃados. Os produtos naturais desempenham um papel relevante na farmacologia pela notÃria contribuiÃÃo para desenvolvimento de fÃrmacos como de ferramentas farmacolÃgicas. O sedimento marinho à uma fonte profÃcua de microrganismos produtores de metabÃlitos secundÃrios com propriedades biomÃdicas e os actinomicetos, bactÃrias Gram-positivas, sÃo excelentes produtores de compostos com diversas atividades biolÃgicas. Neste trabalho, o potencial farmacolÃgico da microbiota recuperada do sedimento marinho coletado no ArquipÃlago Fernando de Noronha foi investigado em cÃlulas tumorais em cultura. Dezesseis linhagens de actinomicetos foram isoladas, sendo que 7 renderam extratos brutos (EB) citotÃxicos (inibiÃÃo do crescimento > 75%) em cÃlulas de cÃncer colorretal humano HCT-116. Os valores de concentraÃÃo inibitÃria mÃdia (CI50) dos EBs variaram de 0,06 a 10 Âg/mL. A linhagem BRA-399, identificada como Streptomyces sp., apresentou a maior potÃncia (CI50 = 0,06 Âg/mL) e foi selecionada para prosseguir com a purificaÃÃo do princÃpio ativo e caracterizaÃÃo do efeito biolÃgico em cÃlulas tumorais. AtravÃs de um fracionamento quÃmico bioguiado com diferentes polaridades, isolou-se a Piericidina A1 (PA1), e outras molÃculas da mesma classe foram identificadas. A citotoxicidade da PA1 foi entÃo investigada em 2 linhagens tumorais, HCT-116 e em melanoma metastÃtico murino (B16-F10). Os ensaios do MTT, do SRB e de contagem de cÃlulas e integridade de membrana por citometria foram realizados com ambas linhagens celulares para se obter um perfil de inibiÃÃo da proliferaÃÃo celular causado pela PA1 apÃs 24, 48 e 72h. Os resultados mostraram inibiÃÃo da proliferaÃÃo celular em ambas linhagens nas concentraÃÃes mais altas testadas (entre 3,8 nM e 12 ÂM). Nas concentraÃÃes mais baixas (entre 0,1 aM e 24 pM) houve inibiÃÃo da proliferaÃÃo na linhagem HCT-116, mas nÃo em B16-F10. Apesar da potÃncia singular, as cÃlulas tinham a integridade da membrana preservada em quase todas as concentraÃÃes, exceto a maior de 12 ÂM. A PA1 à um bloqueador do complexo I da cadeia transportadora de elÃtrons e a alteraÃÃo do metabolismo energÃtico à uma caracterÃstica das cÃlulas tumorais envolvida com a agressividade do tumor. A partir destas observaÃÃes alguns experimentos foram realizados para avaliar a influÃncia da PA1 na induÃÃo de alteraÃÃes fenotÃpicas associadas à agressividade nas duas linhagens tumorais utilizadas (HCT-116 e B16-F10) na concentraÃÃo de 500 fM. As cÃlulas prÃ-tratadas com PA1 apresentaram aumento da CI50 frente ao tratamento com o quimioterÃpico doxorrubicina. O tratamento com PA1 tambÃm aumentou a taxa de migraÃÃo celular em B16-F10, bem como induziu alteraÃÃes morfolÃgicas compatÃveis com cÃlulas com maior atividade migratÃria, reforÃando a hipÃtese de que a alteraÃÃo causada pela PA1 no metabolismo da cÃlula tumoral pode induzir alteraÃÃo no fenÃtipo destas.