BioprospecÃÃo de substÃncias com potencial antitumoral em ascÃdias do litoral cearense: estudos com Eudistoma vannamei Millar, 1977 (Urochordata, Ascidiacea)

• Autor(a) principal: Paula Christine Jimenez
• Data de Publicação: 2004
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=2999
• topic: 1. Farmacologia. 2. Produtos naturais marinhos. 3. Citotoxicidade. 4. AscÃdias. 5. Eudistoma vannamei.; 1. Pharmacology. 2. Marine natural products. 3. Cytotoxicity. 4. Ascidians. 5. Eudistoma vannamei.; FARMACOLOGIA

Este trabalho avaliou, inicialmente, a citotoxicidade dos extratos hidroalcoÃlicos das 10 espÃcies de ascÃdias mais abundantes do litoral cearense atravÃs dos seguintes mÃtodos: toxicidade aguda em larvas de artemias, inibiÃÃo do desenvolvimento dos ovos de ouriÃo-do-mar, potencial hemolÃtico e inibiÃÃo da proliferaÃÃo celular de linhagens tumorais. A espÃcie Eudistoma vannamei mostrou-se a mais ativa em 3 dos 4 ensaios performados, sendo, portanto, selecionada para prosseguir com a caracterizaÃÃo quÃmica e farmacolÃgica de seus princÃpios ativos. O extrato foi particionado em diversos solventes e fracionados por cromatografia em sÃlica gel 60 e sephadex LH-20. A atividade das amostras foi monitorada pelo mÃtodo do MTT. Das 60 amostras coletadas, 15 foram ativas. A CI50 dessas 15 amostras foi verificada, novamente pelo mÃtodo do MTT, em 5 linhagens celulares tumorais: CEM, HL-60, MCF-7, HCT-8 e B-16. As fraÃÃes DCM-14 a DCM-18, derivadas da fase diclorometÃnica e quimicamente muito semelhantes entre si, como evidenciado por CCDC, foram as mais ativas, apresentando CI50 de atà 1,0 ug/mL na maioria das linhagens. A dicetopiperazina 6-etilamino-1-metil-piperazina-2,5-diona foi isolada da fase CHCl2 e detectada como o componente majoritÃrio, no entanto, foi inativa sobre a proliferaÃÃo celular. O espectro de H1RNM das fraÃÃes DCM-14 a 18 indicou, como componentes minoritÃrios, uma sÃrie de derivados desta dicetopiperazina, que nÃo foram identificados. O estudo dos efeitos das fraÃÃes sobre a viabilidade (exclusÃo por azul de tripan), proliferaÃÃo (incorporaÃÃo de BrdU e curva de crescimento) e induÃÃo de morte (morfologia celular â coloraÃÃo por H/E â anexina e coloraÃÃo por BE/AO) nas cÃlulas HL-60 demonstrou que DCM-16 e 17 sÃo as mais fortes redutoras da proliferaÃÃo celular. DCM-16 apresentou um pronunciado efeito inibitÃrio sobre a incorporaÃÃo de BrdU, o que pode indicar uma interferÃncia na duplicaÃÃo de DNA. DCM-17 inibiu satisfatoriamente a incorporaÃÃo de BrdU, mas a induÃÃo de apoptose Ã, aparentemente, seu mecanismo predominante. DCM-14 e 15 tambÃm apresentam perfis de indutoras de apoptose celular, sendo que a Ãltima demonstra alguns indÃcios de atividade necrÃtica. Os efeitos de DCM-18 foram pouco pronunciados. As atividades apresentadas por essas fraÃÃes sÃo concentraÃÃo-dependente e o aumento do tempo de contato intensifica o efeito citotÃxico.