Analysis molecular and proteomic of Lasiodiplodia theobromae associated with tropical fruits

• Autor(a) principal: Josà Glauber Moreira Melo
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=13505
• topic: Resinose; Marcadores moleculares; Botryosphaeriaceae; Molecular markers; Botryosphaeriaceae; Gummosis; AGRONOMIA

Lasiodiplodia theobromae à um fungo fitopatogÃnico responsÃvel por inÃmeras doenÃas em variadas plantas, sendo um fungo tipicamente de regiÃes tropicais e subtropicais. O fungo atacadiversas plantas tropicais, dentre elas destacam-se a mangueira, as Spondiassp., o coqueiro, o cajueiro, entre tantas outras. Seu controle à basicamente genÃtico realizado com o plantio de clones resistentes, entretanto, para sua obtenÃÃo torna-se necessÃrio o conhecimento das caracterÃsticas do patÃgeno. As informaÃÃes disponÃveissobre a variabilidade genÃtica de L. theobromaesÃo insuficientes para assegurar o sucesso em qualquer programa de melhoramento genÃtico visando à resistÃncia a este patÃgeno. Levando-se em conta que as proteÃnas sÃo produtos funcionais dos genes, torna-se importante conhecÃ-las, visando um melhor entendimento do modo de aÃÃo dos patÃgenos, sendo este entendimento, Ãtil como estratÃgia a ser utilizada no melhoramento vegetal buscando a resistÃncia genÃtica. Assim, o objetivo desse estudo foi realizar um estudo genÃtico molecular em uma populaÃÃo de L. theobromae e uma anÃlise proteÃmica diferencial do fungo entre isolados, mais e menos agressivos, visando identificar proteÃnas responsÃveis por essa agressividade.Uma populaÃÃo composta de 105 isolados foi usada na caracterizaÃÃo molecular, extraindo-se o DNA a partir do micÃlio do fungo crescido em meio lÃquido. Cada amostra foi submetida à reaÃÃo em cadeia da polimerase (PCR) com 15 pares de primers especÃficos para essa espÃcie, alÃm de um par de primer da regiÃo ITS e outro da regiÃo EF-1α. Os produtos amplificados foram visualisados em gel de agarose, corados com brometo de etÃdio e os dados tabulados em planilha binÃria e foram analisados pelo mÃtodo de agrupamento nÃo balanceado baseado na mÃdia aritmÃtica (UPGMA) utilizando o programa MVSP. As similaridades genÃticas foram estimadas pelo coeficiente de Jaccard. Os resultados indicaram uma grande variabilidade genÃtica da populaÃÃo avaliada. Jà o estudo proteÃmico foi realizado visando avaliar diferenÃas qualitativas, ou seja, a presenÃa/ausÃncia de uma determinada proteÃna, em relaÃÃo ao grupo antagÃnico. Para tal, utilizaram-se dois isolados do mesmo fungo, diferenciando-se quanto a sua agressividade, em que um era altamente agressivo, enquanto o outro apresentava uma baixa agressividade quando inoculados em mudas de cajueiro. Quando o perfil eletroforÃtico foi analisado, foram evidenciados 96 spots diferencialmente expressos. AtravÃs da LC-ESI-Q-TOF MS/MS, foram identificadas 84 proteÃnasapresentando diversas funÃÃes celulares.Com essa abordagem foi possÃvel a caracterizaÃÃo preliminar do perfil proteico deste fungo, obtendo-se alguns indÃcios dos mecanismos envolvidos na sua agressividade. Este à o primeiro estudo buscando conhecer as proteÃnas responsÃveis pela agressividade de L. theobromae.