avaliaÃÃo dos efeitos citotÃxicos e renais promovidos pelo veneno da serpente Bothrops alternatus

• Autor(a) principal: Francisco Assis Nogueira JÃnior
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=18582
• topic: FARMACOLOGIA

As serpentes do gÃnero Bothrops sp. sÃo responsÃveis pelo maior nÃmero de acidentes ofÃdicos no Brasil, de acordo com o MinistÃrio da SaÃde. A insuficiÃncia renal aguda (IRA) à a complicaÃÃo grave mais associada nestes tipos de acidentes. A serpente Bothrops alternatus (Rhinocerophis alternatus) à uma espÃcie de importÃncia mÃdica responsÃvel por acidentes ofÃdicos, com predominÃncia no Sul do Brasil. Desta forma, investigou-se alteraÃÃes renais induzidas pelo veneno total de Bothrops alternatus (vBalt) em sistema de rim isolado de rato e em cultura de cÃlulas de tÃbulo proximal renal das linhagens LLC-MK2 (Macaco) e HK-2 (Humanas). No sistema de perfusÃo renal, utilizou-se ratos Wistar (250 a 300g), com dois grupos experimentais (1Âg/mL e 3 Âg/mL de vBalt; n=6). Foi verificado diminuiÃÃo na pressÃo de perfusÃo (PP) na concentraÃÃo de 1 μg/mL aos 90 e 120 min e na de 3 μg/mL aos 60, 90 e 120 min. Para ambas as concentraÃÃes, a resistÃncia vascular renal (RVR) e o fluxo urinÃrio (FU) diminuÃram aos 90 e 120 minutos e o ritmo de filtraÃÃo glomerular (RFG) mostrou-se reduzido a partir dos 60 min. Quando se analisou o percentual de transporte de eletrÃlitos, observou-se que o transporte tubular de sÃdio (%TNa+) foi reduzido aos 120 min para concentraÃÃo de 1 Âg/mL, e aos 90 e 120 min para a de 3 Âg/mL; o transporte tubular de cloreto (%TCl-) tambÃm foi reduzido aos 120 min para 1 Âg/mL e aos 60, 90 e 120 min para a concentraÃÃo de 3 Âg/mL; quando analisou-se os transportes tubulares proximais foi visto que o transporte tubular proximal de sÃdio (%TpNa+) e o transporte tubular proximal de cloreto (%TpCl-) diminuÃram a partir dos 60 min atà o fim o experimento, para concentraÃÃo de 1 Âg/mL, e aos 60, 90 e 120 para a de 3 Âg/mL. A anÃlise histopatolÃgica demonstrou presenÃa de alteraÃÃes morfolÃgicas microscÃpicas significativas, tais como acÃmulo de proteÃnas a nÃvel tubular e glomerular, dano glomerular e degeneraÃÃo hidrÃpica em ambas as concentraÃÃes estudadas. Na avaliaÃÃo do perfil do estresse oxidativo, observou-se que os nÃveis de glutationa reduzida (GSH) encontravam-se diminuÃdas em ambas as concentraÃÃes: 1Âg/mL (643,8  36,31 Âg/g de tecido) e 3Âg/mL (757,4 Â126,7 Âg/g de tecido), jà os nÃveis de malondiÃldeido (MDA) se encontravam aumentados em ambas as concentraÃÃes: 1Âg/mL (16,42  3,561 Âg/g de tecido) e 3Âg/mL (15,37Â2,237 Âg/g de tecido). Os nÃveis de nitrito tambÃm estavam aumentados em relaÃÃo ao controle: 1Âg/mL (309,4Â25,29 nM/g de tecido) e 3Âg/mL (330,7  29,19 nM/g de tecido). No cultivo de cÃlulas LLC-MK2 e HK-2, o vBalt diminuiu a viabilidade celular em altas concentraÃÃes (50, 100 e 200Âg/mL) apenas para a LLC-MK2, por outro lado, nas concentraÃÃes reduzidas (0,19, 0,39, 0,78, 1,56, 3,12, 6,25, 12,5, 25Âg/mL), observou-se um aumento na viabilidade celular, apresentando uma IC50 de 221,3μg/mL, para linhagem LLC-MK2. Na anÃlise do tipo de morte celular induzida, utilizou-se a citometria de fluxo com Anexina V-PE e 7-AAD, foi observado que a morte celular ocorreu de forma predominante por necrose. Esses resultados demonstraram que o veneno de Bothrops alternatus alterou todos os parÃmetros e funÃÃes renais avaliados no modelo de perfusÃo renal, demonstrando sua aÃÃo nefrotÃxica direta e seus efeitos citotÃxicos nos cultivos celulares estudados.