Controle da antracnose pÃs-colheita do mamÃo com leveduras killer

• Autor(a) principal: Jaqueline Rabelo de Lima
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
• Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=9498
• topic: Biological control; Carica papaya; Colletotrichum gloeosporioides; Biological control; Carica papaya; Colletotrichum gloeosporioides; CIENCIA E TECNOLOGIA DE ALIMENTOS

Este trabalho objetivou isolar leveduras capazes de produzir e excretar a toxina killer a partir de frutos tropicais, para atuarem no controle biolÃgico de fitopatogenos em pÃs-colheita. Inicialmente, foram isoladas 580 leveduras a partir de 87 amostras de frutos tropicais (mamÃo, caju, sapoti, murici, manga e acerola), dentre as quais 29 exibiram o fenÃtipo killer. Todas as cepas killer foram identificadas pelo sequenciamento da regiÃo D1/D2 do 28S rRNA, em que ficou demonstrada a presenÃa de Candida aaseri, Wickerhamomyces anomalus, Pichia kluyveri, Meyerozyma guilliermondii, Kodamaea ohmeri. Cinco leveduras foram capazes de inibir em 100% a germinaÃÃo de conÃdios em meio lÃquido e reduzir o crescimento micelial, em meio sÃlido de Colletotrichum gloeosporioides in vitro, com destaque para M. guilliermondii (cepa 443) que foi capaz de reduzir o crescimento micelial do fitopatogeno em 60% em meio sÃlido. As duas leveduras com melhores resultados in vitro foram testadas in vivo, contra C. gloeosporioides, agente da antracnose em pÃs-colheita de mamÃo e outros frutos tropicais, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443). TambÃm foi investigada a ocorrÃncia de micoparasitismo como mecanismo de aÃÃo do antagonista por meio de microscopia eletrÃnica de varredura â MEV e detecÃÃo das enzimas hidrolÃticas, quitinase e β-1-3 glucanase. Os resultados demonstraram que, quando aplicada simultaneamente ao fitopatÃgeno e incubadas em cÃmara Ãmida (95% U.R.) a 28 ÂC, as leveduras W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) foram capazes de reduzir a ocorrÃncia da doenÃa em 24,62%, 7,0% e 20,68%, respectivamente, atà 06 dias apÃs a inoculaÃÃo. Verificou-se que o tempo de inoculaÃÃo da levedura teve significativa influÃncia sobre sua aÃÃo antagonista; a aplicaÃÃo dos agentes com 24 ou 12 horas de antecedÃncia em relaÃÃo ao fitopatÃgeno resultou em reduÃÃo de 30% e 13,75% para W. anomalus (cepa 422), em 40% e 35% para W. anomalus (cepa 440) e em, 41,17 e 31,35% para M. guilliermondii (cepa 443) respectivamente. A ocorrÃncia de micoparasitismo foi confirmada atravÃs de eletromicrografias que evidenciaram a uniÃo das leveduras Ãs hifas do C. gloeosporioides, provocando, em alguns casos, perda de turgidez e atà ruptura dessas; tudo isso associado à produÃÃo de β 1-3-glucanase. As leveduras killer, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) que apresentaram melhores resultados nos testes in vivo foram testadas associaÃÃo com cinco diferentes veÃculos de aplicaÃÃo na proteÃÃo em pÃs-colheita de mamÃo. ApÃs 90 dias de incubaÃÃo a 4 ÂC, essas leveduras mantiveram-se viÃveis em todos os veÃculos de aplicaÃÃo testados e durante todo o perÃodo de incubaÃÃo, frutos tratados com formulaÃÃes (leveduras + veÃculos de aplicaÃÃo) apresentaram incidÃncia de doenÃa, pelo menos 30% menores, quando comparadas aos frutos nÃo tratados. Para W. anomalus (cepa 422), o tratamento que utilizou amido (2%) reduziu em 48,3% a ocorrÃncia de doenÃas, jà para M. guilliermondii, (cepa 443), os tratamentos mais eficientes no controle da doenÃa foram os que utilizaram gelatina e cera lÃquida de carnaÃba (2%) como veÃculos de aplicaÃÃo, ambos foram capazes de reduzir em 50% a ocorrÃncia de doenÃas em pÃs-colheita de mamÃes. Eletromicrograficas revelaram que todos os veÃculos de aplicaÃÃo foram eficientes em permitir a fixaÃÃo das leveduras na superfÃcie do fruto. Leveduras killer podem atuar no biocontrole em pÃs-colheita de mamÃo e estes microrganismos atuam atravÃs de uma variedade de mecanismos de aÃÃo, o que potencializa seu efeito protetor e amplia sua eficiÃncia de aÃÃo.