AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Anderson Ramos da Silva
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
Texto Completo: http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=16738
Resumo: Atualmente, a incidÃncia de infecÃÃes fÃngicas tem aumentado significativamente, contribuindo assim para morbidade e mortalidade. Esse fato que tem como umas das principais causas o aumento da resistÃncia antimicrobiana, estando associado à produÃÃo de biofilme que tem um elevado nÃvel de resistÃncia antimicrobiana juntamente com o arsenal farmacolÃgico antifÃngico limitado, quando comparado ao arsenal antibacteriano, leva a necessidade do desenvolvimento de novas estratÃgias terapÃuticas. A berberina tem demonstrado ter ampla atividade antibacteriana e antifÃngica. Dentro desse contexto, o objetivo foi avaliar o potencial antifÃngico da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol, bem como avaliar o efeito da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. em forma de bioflme. A avaliaÃÃo do efeito antifÃngico foi determinada pelo mÃtodo de microdiluiÃÃo em caldo (M27-A3) e por meio de tÃcnicas de citometria de fluxo em que foram avaliados elementos que contribuam para elucidaÃÃo do provÃvel mecanismo de aÃÃo da berberina. Para a avaliaÃÃo da atividade de cÃlulas fÃngicas do biofilme, utilizou-se o ensaio colorimÃtrico com o sal de tetrazÃlio (MTT), a fim de determinar a suscetibilidade das cÃlulas sÃsseis. As cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol apÃs 24h e 72h apresentaram a ConcentraÃÃo InibitÃria MÃnima (CIM) igual 8 Âg/mL e 16 â 24 Âg/mL, respectivamente, demonstrando assim, apresentar atividade antifÃngica significativa, que sendo confirmada posteriormente por tÃcnicas da citometria de fluxo, apÃs a exposiÃÃo das cÃlulas ao composto sintÃtico cloreto de berberina, foram observadas alteraÃÃes concementes a ruptura da integridade da membrana plasmÃtica e mitocondrial, danos ao DNA e provavelmente o desencadeamento de tais eventos conduziu a morte celular por apoptose. Em relaÃÃo aos isolados formadores de biofilme, esses ao serem expostos a berberina apresentaram CIM inferior a 37,5 Âg/mL (CIM50), sendo a reduÃÃo considerada estatisticamente significativa na atividade celular do biofilme (P < 0,001). Sendo assim, as atividades, no presente estudo aliados a busca de mais elementos que contribuam para a melhor compreensÃo e o desenvolvimento biotecnolÃgico de um fitoproduto, tomando como exemplo a molÃcula de estudo, a berberina, sendo aqui elencada como possÃvel protÃtipo de molÃculas promissoras com propriedades antifÃngicas.
id UFC_fddd86292da39e3c3cca3e93785376c5
oai_identifier_str oai:www.teses.ufc.br:10935
network_acronym_str UFC
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
spelling info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisAvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.In vitro evaluation of berberine front of Candida spp strains. and Cryptococcus neoformans fluconazole-resistant and activity in isolated forming biofilms.2015-08-27HÃlio Vitoriano Nobre JÃnior76433102387http://lattes.cnpq.br/3748078587451434Thalles Barbosa Granjeiro31160166315Bruno CoÃlho Cavalcanti87697866315http://lattes.cnpq.br/5431203157672972 Hemerson Iury Ferreira MagalhÃes50614690382http://lattes.cnpq.br/496684400371186102501245300Anderson Ramos da SilvaUniversidade Federal do CearÃPrograma de PÃs-GraduaÃÃo em Microbiologia MÃdicaUFCBRFARMACIAAtualmente, a incidÃncia de infecÃÃes fÃngicas tem aumentado significativamente, contribuindo assim para morbidade e mortalidade. Esse fato que tem como umas das principais causas o aumento da resistÃncia antimicrobiana, estando associado à produÃÃo de biofilme que tem um elevado nÃvel de resistÃncia antimicrobiana juntamente com o arsenal farmacolÃgico antifÃngico limitado, quando comparado ao arsenal antibacteriano, leva a necessidade do desenvolvimento de novas estratÃgias terapÃuticas. A berberina tem demonstrado ter ampla atividade antibacteriana e antifÃngica. Dentro desse contexto, o objetivo foi avaliar o potencial antifÃngico da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol, bem como avaliar o efeito da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. em forma de bioflme. A avaliaÃÃo do efeito antifÃngico foi determinada pelo mÃtodo de microdiluiÃÃo em caldo (M27-A3) e por meio de tÃcnicas de citometria de fluxo em que foram avaliados elementos que contribuam para elucidaÃÃo do provÃvel mecanismo de aÃÃo da berberina. Para a avaliaÃÃo da atividade de cÃlulas fÃngicas do biofilme, utilizou-se o ensaio colorimÃtrico com o sal de tetrazÃlio (MTT), a fim de determinar a suscetibilidade das cÃlulas sÃsseis. As cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol apÃs 24h e 72h apresentaram a ConcentraÃÃo InibitÃria MÃnima (CIM) igual 8 Âg/mL e 16 â 24 Âg/mL, respectivamente, demonstrando assim, apresentar atividade antifÃngica significativa, que sendo confirmada posteriormente por tÃcnicas da citometria de fluxo, apÃs a exposiÃÃo das cÃlulas ao composto sintÃtico cloreto de berberina, foram observadas alteraÃÃes concementes a ruptura da integridade da membrana plasmÃtica e mitocondrial, danos ao DNA e provavelmente o desencadeamento de tais eventos conduziu a morte celular por apoptose. Em relaÃÃo aos isolados formadores de biofilme, esses ao serem expostos a berberina apresentaram CIM inferior a 37,5 Âg/mL (CIM50), sendo a reduÃÃo considerada estatisticamente significativa na atividade celular do biofilme (P < 0,001). Sendo assim, as atividades, no presente estudo aliados a busca de mais elementos que contribuam para a melhor compreensÃo e o desenvolvimento biotecnolÃgico de um fitoproduto, tomando como exemplo a molÃcula de estudo, a berberina, sendo aqui elencada como possÃvel protÃtipo de molÃculas promissoras com propriedades antifÃngicas. Currently, the incidence of fungal infections has increased significantly, contributing to morbidity and mortality. It has as one of its main causes the increase of antibiotic resistance. Recently associated with biofilm production, which has a high level of antibiotic resistance, coupled with the limited antifungal pharmacological when compared to antibacterial, it leads to the need for the development of new therapeutic strategies. The berberine has shown to have broad antibacterial and antifungal activity. In this context, the objective was to evaluate the antifungal potential of berberine against strains of Candida spp. and Cryptococcus neoformans resistant to fluconazole and evaluate the effect of berberine against strains of Candida tropicalis in biofilm formation. The evaluation of the antifungal effect was determined by microdilution in broth (M27-A3) and by flow cytometry techniques, in which the likely mechanism of action of that compound was evaluated. For the assessment of the biofilm, a colorimetric assay (MTT) was used to determine the susceptibility of sessile cells. Strains of Candida spp. and Cryptococcus neoformans resistant to fluconazole after 24h and 72h showed the minimum inhibitory concentration (MIC) equal to 8 &#956;g/mL and 16-24 &#956;g/ml, respectively. It demonstrates a significant antifungal activity, which, in accordance with cytometry, after the cells were treated with berberine, promoted damage to DNA, changes in the integrity of the plasma and mitochondrial membrane, caused and probably led to cell death by apoptosis. Regarding isolated biofilm formers, when exposed to berberine, they showed a MIC of less than 37.5 mg/mL (MIC 50%), causing a statistically significant reduction in the cellular activity of the biofilm (P <0.001). Therefore, considering these activities, coupled with the lack of studies related to biotechnological development of a phytoproduct, berberine becomes a source of promising molecules with antifungal properties.CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superiorhttp://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=16738application/pdfinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFCinstname:Universidade Federal do Cearáinstacron:UFC2019-01-21T11:30:07Zmail@mail.com -
dc.title.pt.fl_str_mv AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
dc.title.alternative.en.fl_str_mv In vitro evaluation of berberine front of Candida spp strains. and Cryptococcus neoformans fluconazole-resistant and activity in isolated forming biofilms.
title AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
spellingShingle AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
Anderson Ramos da Silva
FARMACIA
title_short AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
title_full AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
title_fullStr AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
title_full_unstemmed AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
title_sort AvaliaÃÃo in vitro da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol e sua atividade em isolados formadores de biofilme.
author Anderson Ramos da Silva
author_facet Anderson Ramos da Silva
author_role author
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv HÃlio Vitoriano Nobre JÃnior
dc.contributor.advisor1ID.fl_str_mv 76433102387
dc.contributor.advisor1Lattes.fl_str_mv http://lattes.cnpq.br/3748078587451434
dc.contributor.referee1.fl_str_mv Thalles Barbosa Granjeiro
dc.contributor.referee1ID.fl_str_mv 31160166315
dc.contributor.referee2.fl_str_mv Bruno CoÃlho Cavalcanti
dc.contributor.referee2ID.fl_str_mv 87697866315
dc.contributor.referee2Lattes.fl_str_mv http://lattes.cnpq.br/5431203157672972
dc.contributor.referee3.fl_str_mv Hemerson Iury Ferreira MagalhÃes
dc.contributor.referee3ID.fl_str_mv 50614690382
dc.contributor.referee3Lattes.fl_str_mv http://lattes.cnpq.br/4966844003711861
dc.contributor.authorID.fl_str_mv 02501245300
dc.contributor.author.fl_str_mv Anderson Ramos da Silva
contributor_str_mv HÃlio Vitoriano Nobre JÃnior
Thalles Barbosa Granjeiro
Bruno CoÃlho Cavalcanti
Hemerson Iury Ferreira MagalhÃes
dc.subject.cnpq.fl_str_mv FARMACIA
topic FARMACIA
dc.description.sponsorship.fl_txt_mv CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior
dc.description.abstract.por.fl_txt_mv Atualmente, a incidÃncia de infecÃÃes fÃngicas tem aumentado significativamente, contribuindo assim para morbidade e mortalidade. Esse fato que tem como umas das principais causas o aumento da resistÃncia antimicrobiana, estando associado à produÃÃo de biofilme que tem um elevado nÃvel de resistÃncia antimicrobiana juntamente com o arsenal farmacolÃgico antifÃngico limitado, quando comparado ao arsenal antibacteriano, leva a necessidade do desenvolvimento de novas estratÃgias terapÃuticas. A berberina tem demonstrado ter ampla atividade antibacteriana e antifÃngica. Dentro desse contexto, o objetivo foi avaliar o potencial antifÃngico da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol, bem como avaliar o efeito da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. em forma de bioflme. A avaliaÃÃo do efeito antifÃngico foi determinada pelo mÃtodo de microdiluiÃÃo em caldo (M27-A3) e por meio de tÃcnicas de citometria de fluxo em que foram avaliados elementos que contribuam para elucidaÃÃo do provÃvel mecanismo de aÃÃo da berberina. Para a avaliaÃÃo da atividade de cÃlulas fÃngicas do biofilme, utilizou-se o ensaio colorimÃtrico com o sal de tetrazÃlio (MTT), a fim de determinar a suscetibilidade das cÃlulas sÃsseis. As cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol apÃs 24h e 72h apresentaram a ConcentraÃÃo InibitÃria MÃnima (CIM) igual 8 Âg/mL e 16 â 24 Âg/mL, respectivamente, demonstrando assim, apresentar atividade antifÃngica significativa, que sendo confirmada posteriormente por tÃcnicas da citometria de fluxo, apÃs a exposiÃÃo das cÃlulas ao composto sintÃtico cloreto de berberina, foram observadas alteraÃÃes concementes a ruptura da integridade da membrana plasmÃtica e mitocondrial, danos ao DNA e provavelmente o desencadeamento de tais eventos conduziu a morte celular por apoptose. Em relaÃÃo aos isolados formadores de biofilme, esses ao serem expostos a berberina apresentaram CIM inferior a 37,5 Âg/mL (CIM50), sendo a reduÃÃo considerada estatisticamente significativa na atividade celular do biofilme (P < 0,001). Sendo assim, as atividades, no presente estudo aliados a busca de mais elementos que contribuam para a melhor compreensÃo e o desenvolvimento biotecnolÃgico de um fitoproduto, tomando como exemplo a molÃcula de estudo, a berberina, sendo aqui elencada como possÃvel protÃtipo de molÃculas promissoras com propriedades antifÃngicas.
dc.description.abstract.eng.fl_txt_mv Currently, the incidence of fungal infections has increased significantly, contributing to morbidity and mortality. It has as one of its main causes the increase of antibiotic resistance. Recently associated with biofilm production, which has a high level of antibiotic resistance, coupled with the limited antifungal pharmacological when compared to antibacterial, it leads to the need for the development of new therapeutic strategies. The berberine has shown to have broad antibacterial and antifungal activity. In this context, the objective was to evaluate the antifungal potential of berberine against strains of Candida spp. and Cryptococcus neoformans resistant to fluconazole and evaluate the effect of berberine against strains of Candida tropicalis in biofilm formation. The evaluation of the antifungal effect was determined by microdilution in broth (M27-A3) and by flow cytometry techniques, in which the likely mechanism of action of that compound was evaluated. For the assessment of the biofilm, a colorimetric assay (MTT) was used to determine the susceptibility of sessile cells. Strains of Candida spp. and Cryptococcus neoformans resistant to fluconazole after 24h and 72h showed the minimum inhibitory concentration (MIC) equal to 8 &#956;g/mL and 16-24 &#956;g/ml, respectively. It demonstrates a significant antifungal activity, which, in accordance with cytometry, after the cells were treated with berberine, promoted damage to DNA, changes in the integrity of the plasma and mitochondrial membrane, caused and probably led to cell death by apoptosis. Regarding isolated biofilm formers, when exposed to berberine, they showed a MIC of less than 37.5 mg/mL (MIC 50%), causing a statistically significant reduction in the cellular activity of the biofilm (P <0.001). Therefore, considering these activities, coupled with the lack of studies related to biotechnological development of a phytoproduct, berberine becomes a source of promising molecules with antifungal properties.
description Atualmente, a incidÃncia de infecÃÃes fÃngicas tem aumentado significativamente, contribuindo assim para morbidade e mortalidade. Esse fato que tem como umas das principais causas o aumento da resistÃncia antimicrobiana, estando associado à produÃÃo de biofilme que tem um elevado nÃvel de resistÃncia antimicrobiana juntamente com o arsenal farmacolÃgico antifÃngico limitado, quando comparado ao arsenal antibacteriano, leva a necessidade do desenvolvimento de novas estratÃgias terapÃuticas. A berberina tem demonstrado ter ampla atividade antibacteriana e antifÃngica. Dentro desse contexto, o objetivo foi avaliar o potencial antifÃngico da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol, bem como avaliar o efeito da berberina frente Ãs cepas de Candida spp. em forma de bioflme. A avaliaÃÃo do efeito antifÃngico foi determinada pelo mÃtodo de microdiluiÃÃo em caldo (M27-A3) e por meio de tÃcnicas de citometria de fluxo em que foram avaliados elementos que contribuam para elucidaÃÃo do provÃvel mecanismo de aÃÃo da berberina. Para a avaliaÃÃo da atividade de cÃlulas fÃngicas do biofilme, utilizou-se o ensaio colorimÃtrico com o sal de tetrazÃlio (MTT), a fim de determinar a suscetibilidade das cÃlulas sÃsseis. As cepas de Candida spp. e Cryptococcus neoformans resistentes ao fluconazol apÃs 24h e 72h apresentaram a ConcentraÃÃo InibitÃria MÃnima (CIM) igual 8 Âg/mL e 16 â 24 Âg/mL, respectivamente, demonstrando assim, apresentar atividade antifÃngica significativa, que sendo confirmada posteriormente por tÃcnicas da citometria de fluxo, apÃs a exposiÃÃo das cÃlulas ao composto sintÃtico cloreto de berberina, foram observadas alteraÃÃes concementes a ruptura da integridade da membrana plasmÃtica e mitocondrial, danos ao DNA e provavelmente o desencadeamento de tais eventos conduziu a morte celular por apoptose. Em relaÃÃo aos isolados formadores de biofilme, esses ao serem expostos a berberina apresentaram CIM inferior a 37,5 Âg/mL (CIM50), sendo a reduÃÃo considerada estatisticamente significativa na atividade celular do biofilme (P < 0,001). Sendo assim, as atividades, no presente estudo aliados a busca de mais elementos que contribuam para a melhor compreensÃo e o desenvolvimento biotecnolÃgico de um fitoproduto, tomando como exemplo a molÃcula de estudo, a berberina, sendo aqui elencada como possÃvel protÃtipo de molÃculas promissoras com propriedades antifÃngicas.
publishDate 2015
dc.date.issued.fl_str_mv 2015-08-27
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
status_str publishedVersion
format masterThesis
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=16738
url http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=16738
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal do CearÃ
dc.publisher.program.fl_str_mv Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Microbiologia MÃdica
dc.publisher.initials.fl_str_mv UFC
dc.publisher.country.fl_str_mv BR
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal do CearÃ
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
instname:Universidade Federal do Ceará
instacron:UFC
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC
instname_str Universidade Federal do Ceará
instacron_str UFC
institution UFC
repository.name.fl_str_mv -
repository.mail.fl_str_mv mail@mail.com
_version_ 1643295220477984768