Síntese e Caracterização de Membranas/Compósito de Colágeno e Hidroxiapatita para Reconstituição Óssea guiada.
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFEI (RIUNIFEI) |
Texto Completo: | https://repositorio.unifei.edu.br/jspui/handle/123456789/913 |
Resumo: | Quando defeitos ósseos assumem grandes dimensões podendo não ser mais regenerados naturalmente, faz-se necessário o uso de técnicas para a correção desses defeitos, entre esta destaca-se a Regeneração Óssea Guiada (ROG). A ROG utiliza-se de uma membrana sintética ou de origem natural para excluir as células do tecido conjuntivo (altamente competitivas) do defeito ósseo. Desta forma, as células ósseas reabsorvem preferencialmente o coágulo formado na região, acelerando o processo de reparo ósseo. O presente estudo propõem a síntese de compósitos de colágeno tipo I/ Hidroxiapatita (HAp) conformados na forma de membrana. Foi empregado como fonte de colágeno dois tipos de tecidos de origem bovina, o Pericárdio Bovino (PB) e do Tendão de Aquiles Bovino (TB), ambos ricas em colágeno do tipo I. As amostras de HAp de natureza sintética foram submetidas a tratamento térmico, entre 900 e 1100°C, caracterizadas por difração de Raio-X. Picos referentes à HAp foi observada, assim como o aparecimento de uma fase cristalina de β-fosfato de cálcio, com o aumento da temperatura de tratamento. Para extração de colágeno tipo I, PB e TB foram coletados de animais abatidos em frigorífico registrados pelo SIF (Serviço Federal de Inspeção) e devidamente conservados em gelo logo após a remoção. Em períodos de no máximo 48 horas após abate, artérias, tecidos conjuntivo suprajacentes, bem como tecidos adiposos foram removidos utilizando pinças e bisturi, mantendo sempre a assepsia no ambiente de trabalho. Os tecidos foram lavados em solução de ringer lactato, e água destilada gelada. Foram confeccionados retalhos de 30x50 mm para PB e fragmentos de 30mm de comprimento para TB. Estes retalhos foram conservados em glicerina, por período não superior a 3 meses. Na extração do colágeno, os retalhos de PB e TB foram tratados com acetona e hidróxido de sódio para desidratação e retirada de tecido adiposo. A pepsina em meio ácido (ácido acético) foi empregada para o rompimento das interações entre as cadeias de colágeno, empregando agitador tipo mixer (velocidade de 5000rpm), expondo as fibras à digestão péptica. O sobrenadante mais gelatinoso obtido, rico em colágeno, foi separado e caracterizado por eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE-SDS) e FTIR (espectroscopia na região do infravermelho com transformada de Fourier). O peso molecular e as bandas de absorção na região do IR (infravermelho) foram coerentes com a molécula de colágeno do tipo I. O compósito foi obtido após a homogeneização do colágeno disperso em meio ácido, com a HAp utilizando-se agitador magnético durante 1 h. Após dispersão a mistura foi acondicionada em formas e liofilizada em temperatura criogênica durante 72 h. As membranas obtidas foram caracterizadas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e devidamente esterilizadas para encaminhamento ao teste de citotoxicidade in vitro. Pôde-se notar a interação dos cristais de HAp à estrutura fibrilar (lamelar) do colágeno extraído, assim como a não citotoxicidade do material final obtido. |
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Foi empregado como fonte de colágeno dois tipos de tecidos de origem bovina, o Pericárdio Bovino (PB) e do Tendão de Aquiles Bovino (TB), ambos ricas em colágeno do tipo I. As amostras de HAp de natureza sintética foram submetidas a tratamento térmico, entre 900 e 1100°C, caracterizadas por difração de Raio-X. Picos referentes à HAp foi observada, assim como o aparecimento de uma fase cristalina de β-fosfato de cálcio, com o aumento da temperatura de tratamento. Para extração de colágeno tipo I, PB e TB foram coletados de animais abatidos em frigorífico registrados pelo SIF (Serviço Federal de Inspeção) e devidamente conservados em gelo logo após a remoção. Em períodos de no máximo 48 horas após abate, artérias, tecidos conjuntivo suprajacentes, bem como tecidos adiposos foram removidos utilizando pinças e bisturi, mantendo sempre a assepsia no ambiente de trabalho. Os tecidos foram lavados em solução de ringer lactato, e água destilada gelada. Foram confeccionados retalhos de 30x50 mm para PB e fragmentos de 30mm de comprimento para TB. Estes retalhos foram conservados em glicerina, por período não superior a 3 meses. Na extração do colágeno, os retalhos de PB e TB foram tratados com acetona e hidróxido de sódio para desidratação e retirada de tecido adiposo. A pepsina em meio ácido (ácido acético) foi empregada para o rompimento das interações entre as cadeias de colágeno, empregando agitador tipo mixer (velocidade de 5000rpm), expondo as fibras à digestão péptica. O sobrenadante mais gelatinoso obtido, rico em colágeno, foi separado e caracterizado por eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE-SDS) e FTIR (espectroscopia na região do infravermelho com transformada de Fourier). O peso molecular e as bandas de absorção na região do IR (infravermelho) foram coerentes com a molécula de colágeno do tipo I. O compósito foi obtido após a homogeneização do colágeno disperso em meio ácido, com a HAp utilizando-se agitador magnético durante 1 h. Após dispersão a mistura foi acondicionada em formas e liofilizada em temperatura criogênica durante 72 h. As membranas obtidas foram caracterizadas por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e devidamente esterilizadas para encaminhamento ao teste de citotoxicidade in vitro. Pôde-se notar a interação dos cristais de HAp à estrutura fibrilar (lamelar) do colágeno extraído, assim como a não citotoxicidade do material final obtido.Síntese e Caracterização de Membranas/Compósito de Colágeno e Hidroxiapatita para Reconstituição Óssea guiada.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisItajubáUniversidade Federal de Itajubá60 p.HidroxihapaptitaColágenoPericárdioTendãoMembranaRegeneração óssea guiadaCompósitoHydroxyapaptiteCollagenPericardiumTendonMembrane guided bone reconstructionCompositeGIMENES, RossanoMateriais para EngenhariappCABRAL, Glaubert Lucas de CarvalhoPrograma de Pós-Graduação: Mestrado - Materiais para EngenhariaIFQ - Instituto de Física e Químicaporreponame:Repositório Institucional da UNIFEI (RIUNIFEI)instname:Universidade Federal de Itajubá (UNIFEI)instacron:UNIFEIinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALdissertacao_cabral_2016.pdfdissertacao_cabral_2016.pdfapplication/pdf2753853https://repositorio.unifei.edu.br/jspui/bitstream/123456789/913/1/dissertacao_cabral_2016.pdf9c28939c0dc1dcb30a754e0fe93e83b3MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://repositorio.unifei.edu.br/jspui/bitstream/123456789/913/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52123456789/9132024-04-03 16:24:35.836oai:repositorio.unifei.edu.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.unifei.edu.br/oai/requestrepositorio@unifei.edu.br || geraldocarlos@unifei.edu.bropendoar:70442024-04-03T19:24:35Repositório Institucional da UNIFEI (RIUNIFEI) - Universidade Federal de Itajubá (UNIFEI)false |
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