Avaliação da resposta imune humoral a uma vacina recombinante multiproteica contra linfadenite caseosa
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2023 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Digital da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (RDU) |
Texto Completo: | https://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/9621 |
Resumo: | Vacinas recombinantes de subunidade têm despontado como alternativas na imunoprofilaxia da linfadenite caseosa, uma vez que vem apresentando níveis de proteção adequados e duradouros contra essa doença. Apesar de algumas formulações se apresentarem como promissoras, os testes desse tipo de vacina têm se limitado somente a modelos murinos, tornando escassos os dados nos modelos alvos da doença. Tendo em vista isso, este trabalho teve como objetivo avaliar a resposta imune humoral de ovinos inoculados com uma vacina recombinante contendo as proteínas recombinates rPLD, rCP01850, e rCP09720 de Corynebacterium pseudotuberculosis associadas ao adjuvante saponina. Para a obtenção das proteínas foi utilizada uma cepa de Escherichia coli, a mesma foi transformada com plasmídeo pAE/pld, ou pAE/rcp01850 ou pAE/rcp09720 e colocada em meio de cultivo LB liquido contendo ampicilina onde foi induzida a expressão pela aplicação de IPTG. As células foram lisadas e as proteínas purificadas por cromatografia de afinidade e dialisadas. Para os experimentos de imunização foram utilizados 12 animais, distribuídos aleatoriamente em 2 grupos de 6 animais cada. O grupo G1 foi inoculado com solução salina 0,9 % (grupo controle); o grupo G2 foi imunizado com a rPLD associada a adjuvante saponina. Amostras de sangue foram coletadas dos ovinos um dia antes da primeira imunização (dia 0), e nos dias 21, 49, 77, 105 e 133 do experimento. Para a realização do ensaio de ELISA para a detecção de anticorpos anti-PLD, anti-CP01850 e anti-CP09720. Os dados foram analisados , sendo possível confirmar a hipótese de que a vacina promoveu o aumento da resposta imune humoral. Os animais apresentaram um aumento nos níveis de anticorpos anti-PLD nos dias 49, 77, 105 e 133; de anti-rCP01850, nos dias 21, 49, 77, 105 e 133; e de anti-rCP09720 nos dias 21, 49, 105 e 133, sendo em ambos significativamente maior em relação aos animais não vacinados. |
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Avaliação da resposta imune humoral a uma vacina recombinante multiproteica contra linfadenite caseosaCIENCIAS BIOLOGICAS::BIOTECNOLOGIAVacinaLinfadeniteOvinosImunidadeVaccineLymphadenitisSheepImmunityVacinas recombinantes de subunidade têm despontado como alternativas na imunoprofilaxia da linfadenite caseosa, uma vez que vem apresentando níveis de proteção adequados e duradouros contra essa doença. Apesar de algumas formulações se apresentarem como promissoras, os testes desse tipo de vacina têm se limitado somente a modelos murinos, tornando escassos os dados nos modelos alvos da doença. Tendo em vista isso, este trabalho teve como objetivo avaliar a resposta imune humoral de ovinos inoculados com uma vacina recombinante contendo as proteínas recombinates rPLD, rCP01850, e rCP09720 de Corynebacterium pseudotuberculosis associadas ao adjuvante saponina. Para a obtenção das proteínas foi utilizada uma cepa de Escherichia coli, a mesma foi transformada com plasmídeo pAE/pld, ou pAE/rcp01850 ou pAE/rcp09720 e colocada em meio de cultivo LB liquido contendo ampicilina onde foi induzida a expressão pela aplicação de IPTG. As células foram lisadas e as proteínas purificadas por cromatografia de afinidade e dialisadas. Para os experimentos de imunização foram utilizados 12 animais, distribuídos aleatoriamente em 2 grupos de 6 animais cada. O grupo G1 foi inoculado com solução salina 0,9 % (grupo controle); o grupo G2 foi imunizado com a rPLD associada a adjuvante saponina. Amostras de sangue foram coletadas dos ovinos um dia antes da primeira imunização (dia 0), e nos dias 21, 49, 77, 105 e 133 do experimento. Para a realização do ensaio de ELISA para a detecção de anticorpos anti-PLD, anti-CP01850 e anti-CP09720. Os dados foram analisados , sendo possível confirmar a hipótese de que a vacina promoveu o aumento da resposta imune humoral. Os animais apresentaram um aumento nos níveis de anticorpos anti-PLD nos dias 49, 77, 105 e 133; de anti-rCP01850, nos dias 21, 49, 77, 105 e 133; e de anti-rCP09720 nos dias 21, 49, 105 e 133, sendo em ambos significativamente maior em relação aos animais não vacinados.51 f.BrasilUFERSAUniversidade Federal Rural do Semi-ÁridoBezerra, Francisco Silvestre BrilhanteBezerra, Francisco Silvestre BrilhanteBatista, Aline LidianeBarbosa, Tallyson NogueiraAlves, Thiago Vinicius Santos e2023-11-17T15:19:48Z2023-11-17T15:19:48Z2023-05-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesispdfapplication/pdfALVES, Thiago Vinicius Santos. Avaliação da resposta imune humoral a uma vacina recombinante multiproteica contra linfadenite caseosa. 2023. 37 f. TCC (Graduação) - Curso de Biotecnologia, Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró, 2023. Disponível em: https://repositorio.ufersa.edu.br/home. Acesso em: 14 nov. 2023.https://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/9621MossoróAttribution-ShareAlike 3.0 BrazilUFERSAhttp://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Digital da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (RDU)instname:Universidade Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA)instacron:UFERSA2024-05-29T00:00:00Zoai:repositorio.ufersa.edu.br:prefix/9621Repositório Institucionalhttps://repositorio.ufersa.edu.br/PUBhttps://repositorio.ufersa.edu.br/server/oai/requestrepositorio@ufersa.edu.br || admrepositorio@ufersa.edu.bropendoar:2024-05-29T00:00Repositório Digital da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (RDU) - Universidade Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA)false |
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