Distribuição de espécies e caracterização de determinantes genéticos de resistência antimicrobiana de staphylococcus spp. e mammaliicoccus spp. isolados de gatos domésticos.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Carvalho, Luciana Guimarâes de
Data de Publicação: 2024
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: https://app.uff.br/riuff/handle/1/34753
Resumo: Staphylococcus spp. e Mammaliicoccus spp. são importantes tanto na medicina humana como na medicina veterinária, pelo crescente isolamento de cepas resistentes a meticilina e/ou multirresistentes em quadros infecciosos ou colonizando. Nos gatos além de serem encontrados na pele e mucosas de animais assintomáticos, também estão relacionados a graves quadros de piodermite, otites e infecções urinárias. Com o estreitamento do convívio entre animais e os seres humanos aumenta a possibilidade de compartilhamento desses microrganismos, bem como dos genes de resistência que carreiam. O uso inadequado de antimicrobianos favorece o aumento de bactérias multirresistentes, que já são um problema mundial. Trazendo assim a necessidade de aprofundar estudos sobre o tema e passar a ter uma nova leitura sobre a saúde animal influenciando na saúde humana (conceito Saúde única/ “One health”). Nesse estudo foram avaliados Staphylococcus pseudintermedius, Staphylococcus felis, Staphylococcus aures e Mammaliicoccus sciuri presentes em cem gatos assintomáticos no Rio de Janeiro, através da descrição da distribuição das espécies isoladas e determinação do perfil de resistência dessas amostras. Possibilitando assim disponibilizar um mapeamento sobre as estirpes colonizando esses animais e respectivo carreamento de genes de resistência por sítio de coleta. Para isso foram coletados, com auxílio de um swab estéril, amostras das regiões: orofaringe, perineal e fossa nasal. A identificação das espécies foi realizada pela espectrometria de massa – MALDI-TOF e confirmada com a reação em cadeia de polimerase do gene nuc para algumas estirpes. Suscetibilidade aos antimicrobianos foi testada pelo método de difusão em disco e na sequência identificação dos genes de resistência bacteriana através da reação em cadeia de polimerase dos genes blaZ, norA, ermB, tetM, aph(3”)-III, dfrG e lmrs. Esses foram previamente selecionados, a partir de uma análise dos genes resistência de todos os genomas dessas estirpes, de cães e gatos depositados no Genbank. Essa análise foi realizada com auxílio da ferramenta CARD (The comprehensive antibiotic resistance database). As amostras MRSP foram submetidas a técnica de MLST para identificação dos possíveis STs circulantes. Também foi avaliada da capacidade de formação de biofilme. A estirpe mais isolada foi S. felis na fossa nasal, seguido de S. pseudintermedius na região perineal. Cepas resistentes a meticilina e multirresistentes foram detectadas em dezenove felinos, sendo recuperadas, 50% MRMS, 39,2% MRSP e 10,8% MSSF. Não foi detectado MRSA nesse estudo. Os genes mais identificados foram blaZ, norA, ermB e aph(3”)-III. A multirresistência também foi observada em amostras sensíveis a meticilina. A partir da técnica MLST foram detectados onze novos STs de MRSP. Todas as estirpes apresentaram de moderada a forte produção de biofilme. Esses resultados são um importante mapeamento da resistência bacteriana em gatos assintomáticos nessas estirpes e um alerta para a necessidade de mais estudos sobre o tema.
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Com o estreitamento do convívio entre animais e os seres humanos aumenta a possibilidade de compartilhamento desses microrganismos, bem como dos genes de resistência que carreiam. O uso inadequado de antimicrobianos favorece o aumento de bactérias multirresistentes, que já são um problema mundial. Trazendo assim a necessidade de aprofundar estudos sobre o tema e passar a ter uma nova leitura sobre a saúde animal influenciando na saúde humana (conceito Saúde única/ “One health”). Nesse estudo foram avaliados Staphylococcus pseudintermedius, Staphylococcus felis, Staphylococcus aures e Mammaliicoccus sciuri presentes em cem gatos assintomáticos no Rio de Janeiro, através da descrição da distribuição das espécies isoladas e determinação do perfil de resistência dessas amostras. Possibilitando assim disponibilizar um mapeamento sobre as estirpes colonizando esses animais e respectivo carreamento de genes de resistência por sítio de coleta. Para isso foram coletados, com auxílio de um swab estéril, amostras das regiões: orofaringe, perineal e fossa nasal. A identificação das espécies foi realizada pela espectrometria de massa – MALDI-TOF e confirmada com a reação em cadeia de polimerase do gene nuc para algumas estirpes. Suscetibilidade aos antimicrobianos foi testada pelo método de difusão em disco e na sequência identificação dos genes de resistência bacteriana através da reação em cadeia de polimerase dos genes blaZ, norA, ermB, tetM, aph(3”)-III, dfrG e lmrs. Esses foram previamente selecionados, a partir de uma análise dos genes resistência de todos os genomas dessas estirpes, de cães e gatos depositados no Genbank. Essa análise foi realizada com auxílio da ferramenta CARD (The comprehensive antibiotic resistance database). As amostras MRSP foram submetidas a técnica de MLST para identificação dos possíveis STs circulantes. Também foi avaliada da capacidade de formação de biofilme. A estirpe mais isolada foi S. felis na fossa nasal, seguido de S. pseudintermedius na região perineal. Cepas resistentes a meticilina e multirresistentes foram detectadas em dezenove felinos, sendo recuperadas, 50% MRMS, 39,2% MRSP e 10,8% MSSF. Não foi detectado MRSA nesse estudo. Os genes mais identificados foram blaZ, norA, ermB e aph(3”)-III. A multirresistência também foi observada em amostras sensíveis a meticilina. A partir da técnica MLST foram detectados onze novos STs de MRSP. Todas as estirpes apresentaram de moderada a forte produção de biofilme. Esses resultados são um importante mapeamento da resistência bacteriana em gatos assintomáticos nessas estirpes e um alerta para a necessidade de mais estudos sobre o tema.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorFundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de JaneiroStaphylococcus spp. and Mammaliicoccus spp. are important both in human and veterinary medicine due to the increasing isolation of methicillin-resistant and/or multidrug-resistant strains in infectious conditions or in healthy animals and humans. In cats, besides being found on the skin and mucous membranes of asymptomatic animals, they are also associated with severe cases of pyoderma, otitis, and urinary tract infections. With the narrowing of the gap between animals and humans, there is an increased possibility of sharing these microorganisms, as well as the resistance genes they carry. The inappropriate use of antimicrobials promotes the rise of multidrug-resistant bacteria, which is already a global issue. This underscores the need to deepen studies on the subject and to adopt a new perspective on animal health influencing human health (One Health concept). This study evaluated Staphylococcus pseudintermedius, Staphylococcus felis, Staphylococcus aureus, and Mammaliicoccus sciuri present in one hundred asymptomatic cats in Rio de Janeiro, through the description of the distribution of isolated species and determination of the resistance profile of these samples. Thus, allowing for the provision of a mapping of the strains colonizing these animals and their respective carriage of resistance genes by collection site. For this purpose, samples from the oropharyngeal, perineal, and nasal fossa regions were collected using a sterile swab. Species identification was performed by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF) and confirmed with polymerase chain reaction targeting the nuc gene for some strains. Antimicrobial susceptibility was tested by the disk diffusion method, followed by identification of bacterial resistance genes through polymerase chain reaction targeting the blaZ, norA, ermB, tetM, aph(3”)-III, dfrG, and lmrs genes. These genes were previously selected based on an analysis of resistance genes from all genomes of these strains, dogs, and cats deposited in the GenBank. This analysis was conducted using the Comprehensive Antibiotic Resistance Database (CARD) tool. MRSP strains underwent multilocus sequence typing (MLST) to identify possible circulating sequence types (STs). Biofilm formation capacity was also evaluated. The most isolated strain was S. felis in the nasal fossa, followed by S. pseudintermedius in the perineal region. Methicillin resistance and multidrug resistance were detected in nineteen cats, with 50% of the recovered strains being methicillin-resistant Mammaliicoccus sciuri (MRMS), 39.2% methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius (MRSP), and 10.8% methicillin-susceptible S. felis (MSSF). MRSA was not detected in this study. The most identified genes were blaZ, norA, ermB, and aph(3”)-III. Multidrug resistance was also observed in samples sensitive to methicillin. Using MLST, eleven new STs of MRSP were detected. All strains showed moderate to strong biofilm production. These results represent an important mapping of bacterial resistance in asymptomatic cats among these strains and serve as a warning for the need for further studies on the subject.Staphylococcus spp. and Mammaliicoccus spp. are important both in human and veterinary medicine due to the increasing isolation of methicillin-resistant and/or multidrug-resistant strains in infectious conditions or in healthy animals and humans. In cats, besides being found on the skin and mucous membranes of asymptomatic animals, they are also associated with severe cases of pyoderma, otitis, and urinary tract infections. With the narrowing of the gap between animals and humans, there is an increased possibility of sharing these microorganisms, as well as the resistance genes they carry. The inappropriate use of antimicrobials promotes the rise of multidrug-resistant bacteria, which is already a global issue. This underscores the need to deepen studies on the subject and to adopt a new perspective on animal health influencing human health (One Health concept). This study evaluated Staphylococcus pseudintermedius, Staphylococcus felis, Staphylococcus aureus, and Mammaliicoccus sciuri present in one hundred asymptomatic cats in Rio de Janeiro, through the description of the distribution of isolated species and determination of the resistance profile of these samples. Thus, allowing for the provision of a mapping of the strains colonizing these animals and their respective carriage of resistance genes by collection site. For this purpose, samples from the oropharyngeal, perineal, and nasal fossa regions were collected using a sterile swab. Species identification was performed by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF) and confirmed with polymerase chain reaction targeting the nuc gene for some strains. Antimicrobial susceptibility was tested by the disk diffusion method, followed by identification of bacterial resistance genes through polymerase chain reaction targeting the blaZ, norA, ermB, tetM, aph(3”)-III, dfrG, and lmrs genes. These genes were previously selected based on an analysis of resistance genes from all genomes of these strains, dogs, and cats deposited in the GenBank. This analysis was conducted using the Comprehensive Antibiotic Resistance Database (CARD) tool. MRSP strains underwent multilocus sequence typing (MLST) to identify possible circulating sequence types (STs). Biofilm formation capacity was also evaluated. The most isolated strain was S. felis in the nasal fossa, followed by S. pseudintermedius in the perineal region. Methicillin resistance and multidrug resistance were detected in nineteen cats, with 50% of the recovered strains being methicillin-resistant Mammaliicoccus sciuri (MRMS), 39.2% methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius (MRSP), and 10.8% methicillin-susceptible S. felis (MSSF). MRSA was not detected in this study. The most identified genes were blaZ, norA, ermB, and aph(3”)-III. Multidrug resistance was also observed in samples sensitive to methicillin. Using MLST, eleven new STs of MRSP were detected. All strains showed moderate to strong biofilm production. These results represent an important mapping of bacterial resistance in asymptomatic cats among these strains and serve as a warning for the need for further studies on the subject.105 f.Penna, Bruno de Araujohttp://lattes.cnpq.br/1215713501500050Baptista, Andrea Regina de S.Medeiros, Luciana dos Santoshttp://lattes.cnpq.br/7336229288321275Fernandes, Júlio Israelhttp://lattes.cnpq.br/9221592908532393Cerqueira, Aloysio de Mello Figueiredohttp://lattes.cnpq.br/4995660558500048da Motta, Olney Vieirahttp://lattes.cnpq.br/4893056116591017http://lattes.cnpq.br/5928674092159872Carvalho, Luciana Guimarâes de2024-09-23T14:01:40Z2024-09-23T14:01:40Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfCARVALHO, Luciana Guimarâes de. Distribuição de espécies e caracterização de determinantes genéticos de resistência antimicrobiana de staphylococcus spp. e mammaliicoccus spp. isolados de gatos domésticos. 2024. 105 f. Tese (Doutorado em Medicina Veterinária) - Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária - Clínica e Reprodução Animal. Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2024.https://app.uff.br/riuff/handle/1/34753CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2024-09-23T14:01:45Zoai:app.uff.br:1/34753Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202024-09-23T14:01:45Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false
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