Estudo comparativo do isolamento e identificação de vesículas extracelulares urinárias frente ao congelamento à -80°C.
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2023 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) |
Texto Completo: | http://app.uff.br/riuff/handle/1/28438 |
Resumo: | As vesículas extracelulares urinárias (uEV) são nanomoléculas de origem celular variada, as quais são secretadas para o espaço extracelular. De fato, vesículas extracelulares urinárias vem sendo intensamente estudadas como potenciais biomarcadores em estudo sobre hipertensão, nefropatias, glomerulonefrites, câncer e doenças urogenitais. Apesar dos intensos estudos, ainda há falta de padronização nos relatos científicos sobre as condições de armazenamento e a influência do tempo de armazenamento das amostras em -80oC. Assim, as condições de armazenamento da urina podem influenciar a identificação e quantificação da uEV. Portanto, o objetivo deste trabalho é analisar a diferença na viabilidade de uEV frescas e congeladas a partir de amostras de urina de indivíduos saudáveis. Avaliamos as uEVs totais e derivadas de podócitos por citometria de fluxo nas urinas frescas e após um mês congeladas à -80oC. As amostras foram adquiridas e quantificadas no citômetro de fluxo Cytoflex (BC, USA) e a análise de dados foi feita no software FlowJo Versão 9.0. Como resultado, vimos que houve uma diminuição significativa da quantidade de vesículas extracelulares urinárias encontradas nas amostras que foram congeladas por um mês se comparadas às amostras frescas, indicando perda de viabilidade dessas urinas pelo tempo de congelamento, o que indica prejuízo em sua utilização como forma de controle de pacientes saudáveis em outros estudos que possam vir a ser realizados com amostras de urinas congeladas |
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Estudo comparativo do isolamento e identificação de vesículas extracelulares urinárias frente ao congelamento à -80°C.Vesículas extracelulares urináriasUrinaCongelamentoVesículas extracelularesUrinaCongelamentoUrinary extracellular vesiclesUrineFreezingAs vesículas extracelulares urinárias (uEV) são nanomoléculas de origem celular variada, as quais são secretadas para o espaço extracelular. De fato, vesículas extracelulares urinárias vem sendo intensamente estudadas como potenciais biomarcadores em estudo sobre hipertensão, nefropatias, glomerulonefrites, câncer e doenças urogenitais. Apesar dos intensos estudos, ainda há falta de padronização nos relatos científicos sobre as condições de armazenamento e a influência do tempo de armazenamento das amostras em -80oC. Assim, as condições de armazenamento da urina podem influenciar a identificação e quantificação da uEV. Portanto, o objetivo deste trabalho é analisar a diferença na viabilidade de uEV frescas e congeladas a partir de amostras de urina de indivíduos saudáveis. Avaliamos as uEVs totais e derivadas de podócitos por citometria de fluxo nas urinas frescas e após um mês congeladas à -80oC. As amostras foram adquiridas e quantificadas no citômetro de fluxo Cytoflex (BC, USA) e a análise de dados foi feita no software FlowJo Versão 9.0. Como resultado, vimos que houve uma diminuição significativa da quantidade de vesículas extracelulares urinárias encontradas nas amostras que foram congeladas por um mês se comparadas às amostras frescas, indicando perda de viabilidade dessas urinas pelo tempo de congelamento, o que indica prejuízo em sua utilização como forma de controle de pacientes saudáveis em outros estudos que possam vir a ser realizados com amostras de urinas congeladasUrinary extracellular vesicles (uEV) are nanomolecules of varied cellular origin, which are secreted into the extracellular space. In fact, extracellular vesicles have been intensely studied as potential biomarkers in studies on hypertension, nephropathy, glomerulonephritis, cancer and urogenital diseases. Despite intense studies, there is still a lack of standardization in scientific reports on the storage conditions and the influence of sample time storage at -80oC. Thus, urine storage conditions may influence the identification and quantification of uEVs. Therefore, the objective of this work is to analyze the difference in the viability of fresh and frozen uEVs from urine samples of healthy individuals. Samples were acquired and quantified using a Cytoflex flow cytometer (BC, USA) and data analysis was performed using FlowJo Version 9.0 software. As a result, we saw that there was a significant decrease in the amount of urinary extracellular vesicles found in the urines that were frozen for one month if compared to the fresh ones, indicating loss of viability of these urines due to storage time, which indicates a disadvantage in their use in other studies that may be performed with frozen urine samples28 f.Silva, Andrea Alice dahttp://lattes.cnpq.br/4836406900271376Alves, Lílian Santos da Silvahttp://lattes.cnpq.br/4591425692327788Avelar , Thalia Medeiros TitoCastro, Mauro Jorge CabralChagas, Thiago Pavoni Gomeshttp://lattes.cnpq.br/3956524320067518Martyres, Andreza2023-04-03T16:40:24Z2023-04-03T16:40:24Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisapplication/pdfhttp://app.uff.br/riuff/handle/1/28438CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2023-04-03T16:40:28Zoai:app.uff.br:1/28438Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202023-04-03T16:40:28Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false |
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As vesículas extracelulares urinárias (uEV) são nanomoléculas de origem celular variada, as quais são secretadas para o espaço extracelular. De fato, vesículas extracelulares urinárias vem sendo intensamente estudadas como potenciais biomarcadores em estudo sobre hipertensão, nefropatias, glomerulonefrites, câncer e doenças urogenitais. Apesar dos intensos estudos, ainda há falta de padronização nos relatos científicos sobre as condições de armazenamento e a influência do tempo de armazenamento das amostras em -80oC. Assim, as condições de armazenamento da urina podem influenciar a identificação e quantificação da uEV. Portanto, o objetivo deste trabalho é analisar a diferença na viabilidade de uEV frescas e congeladas a partir de amostras de urina de indivíduos saudáveis. Avaliamos as uEVs totais e derivadas de podócitos por citometria de fluxo nas urinas frescas e após um mês congeladas à -80oC. As amostras foram adquiridas e quantificadas no citômetro de fluxo Cytoflex (BC, USA) e a análise de dados foi feita no software FlowJo Versão 9.0. Como resultado, vimos que houve uma diminuição significativa da quantidade de vesículas extracelulares urinárias encontradas nas amostras que foram congeladas por um mês se comparadas às amostras frescas, indicando perda de viabilidade dessas urinas pelo tempo de congelamento, o que indica prejuízo em sua utilização como forma de controle de pacientes saudáveis em outros estudos que possam vir a ser realizados com amostras de urinas congeladas |
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