Paracoccidioidomicose experimental: uma avaliação da ativação policlonal em linhagens murinas resistentes e sensiveis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Cardoso, Rodrigo Andrade
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: spa
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/30261
Resumo: Contém ilustrações e gráficos
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spelling Paracoccidioidomicose experimental: uma avaliação da ativação policlonal em linhagens murinas resistentes e sensiveisParacoccidioidomicoseP. brasiliensisCélulas T regulatóriasParacoccidioidomicoseParacoccidioidesLinfócitos T reguladoresParacoccidioidomycosisP. brasiliensisRegulatory T cellsContém ilustrações e gráficosPortadores de Paracoccidioidomicose (PCM) apresentam uma elevação da freqüência de células T regulatórias naturais (CD4+CD25+ FoxP3+) na circulação periférica e nas lesões provocadas pelo fungo P. brasiliensis (Pb). Estas observações sugerem que células T regulatórias (Treg) podem controlar a resposta imune local e sistêmica desta doença. A utilização do modelo experimental murino pode permitir o estabelecimento de protocolos capazes de verificar de forma mais direta a influência das células Treg na suscetibilidade à infecção por Pb e seu envolvimento em diferentes etapas no curso da infecção. No presente estudo, avaliamos a freqüência de células CD4+CD25+, de células B e a produção de anticorpos específicos e inespecíficos no curso da infecção experimental por P. brasiliensis. Assim, camundongos das linhagens A/J (resistentes a infecção) e BALB/c (de sensibilidade moderada à infecção), foram infectados pela via intratraqueal com 1x106 leveduras da cepa virulenta Pb18 e nas 2ª e 4ª semanas após a infecção, foram analisados por citometria de fluxo a freqüência de células CD45RO/B220+ e CD4+CD25+ no sangue periférico, gânglios linfáticos proximais ao sito de infecção e no baço. Avaliamos também a produção de anticorpos específicos e inespecíficos. Nossos resultados mostram que entre a 2ª e a 4ª semana de infecção, as porcentagens de células T CD4+CD25+ e células B nos gânglios mediastínicos dos camundongos BALB/c foram significativamente superiores aos animais da linhagem A/J. Já no baço e no sangue periférico nenhuma diferença na freqüência destas subpopulações celulares foi observada. Avaliando os níveis dos anticorpos específicos verificamos que ambas as linhagens apresentaram altos níveis de anticorpos específicos diferindo, no entanto, no padrão de reatividade antigênica. Com relação à produção de autoanticorpos, observamos que camundongos BALB/c infectados apresentaram níveis mais elevados de anticorpos anti-DNAds e anti-actina, imunocomplexos circulantes e de células esplênicas secretoras de IgG e anticorpos anti-hemácias autólogas tratadas com bromelaina. Estudando a secreção de citocinas IL-10 e IFN- nos sobrenadantes de culturas de células esplênicas, verificamos que somente nas culturas celulares de BALB/c os níveis de IL-10 estavam elevados. Com relação ao IFN- nenhuma diferença significativa foi observada entre os dois grupos. Nossos resultados sugerem que o aumento de células CD4+CD25+ no sitio proximal ao foco inicial de infecção pode influenciar na reatividade humoral bem como na diferença de sensibilidade apresentado pelas duas linhagens estudadas.Patients with Paracoccidioidomicosis (PCM) present an elevation in the frequency of natural T regulatory lymphocytes (CD4+CD25+ FoxP3+) both in the peripheral blood and in the lesions caused by the fungus P. brasiliensis. (Pb). These observations suggest that the regulatory T cells (Tregs) can control the local and systemic immune response due to this infection. The utilization of an experimental mouse model may permit the establishment of new protocols able to verify in a more direct manner the influence of the Tregs in the susceptibility to infection due to Pb and their involvement in the different stages of disease. In the present study the frequency of CD4+CD25+ cells, B cells and the production of specific and non specific antibodies were measured in the course of an experimental infection with P.brasiliensis. Thus A/J mice (resistant to infection) and Balb/c mice (with moderate susceptibility to the infection) were infected through the intratracheal rout with 1x106 yeast cells of the Pb18 strain - a virulent strain. The frequency of CD45RO/B220+ and CD4+CD25+ cells from the peripheral blood, draining lymph nodes and spleen were analyzed through flow cytometry at the 2nd and 4th week after infection. We also evaluated the production of specific and non specific antibodies. Our results demonstrate that between the 2nd and the 4th week of infection the percentages of CD4+CD25+ T cells and B cells in the mediastinic lymph nodes from BALB/C mice were significantly higher than those derived from A/J mice. On the other hand no difference was observed in the cell populations derived from the spleen and peripheral blood. Evaluating the specific antibodies we verified that both strains of mice presented elevated antibody titers however with distinct immunoreactivity patterns. In relation to the production of autoantibodies we observed that infected BALB/C mice presented higher titers of immunocomplexes, anti-DNA and anti-actin antibodies. These mice also presented higher IgG secreting spleen cells and antibodies specific to bromalaine treated red blood cells. Studying the secretion pattern of cytokines (IL-10 e IFN-) from cultured spleen cells we observed that BALB/C mice presented higher titers of IL10 when compared to A/J mice. No differences were observed between both strains when titrating IFN-. Our results suggest that the increment of CD4+CD25+ cells at the focus of infection may influence the humoral reactivity as well as the differences in susceptibility between strains112 f.Verícimo, Maurício Afonsohttp://lattes.cnpq.br/3542098570637209Teixeira, Gerlinde Agate Platais Brasilhttp://lattes.cnpq.br/6220755242684276Silva, Andréa Alice dahttp://lattes.cnpq.br/4836406900271376Veto, Andréa Cristina Arnholdhttp://lattes.cnpq.br/4091439444304434Tavares, Daniel Augusto Gonçalveshttp://lattes.cnpq.br/7020160917975945Amaral, Verônica Figueiredo dohttp://lattes.cnpq.br/2432524610182899Souza, Clóvis José Pascarellihttp://lattes.cnpq.br/8511086121224904http://lattes.cnpq.br/9952836877390190Cardoso, Rodrigo Andrade2023-09-06T14:22:58Z2023-09-06T14:22:58Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfCARDOSO, Rodrigo Andrade. 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