Estudos preliminares dos fatores secretados pela cultura de células da medula óssea estimulada com tarina na formação de colônias hematopoiéticas

• Autor(a) principal: Araújo, Laísla Rita Silva
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
• Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/27362
• topic: Colocasia esculenta; Taro; Lectinas; Tarina; Medula óssea; Hematopoiese; Imunomodulação; Progenitores granulocíticos; Células estromais; Unidade formadora de colônia; Colocasia esculenta; Medula óssea; Hematopoiese; Lectins; Tarin; Bone marrow; Hematopoiesis; Immunomodulation; Granulocytic progenitors; Stromal cells; Colony forming unit

Introdução: O cormo do Taro (Colocasia esculenta) é tradicionalmente consumido como planta medicinal para estimular as respostas imunes e restaurar o estado de saúde. A tarina, uma lectina do taro, é considerada responsável pelos efeitos imunomoduladores do sistema imune. Objetivo Geral: O objetivo geral deste trabalho é analisar e apurar o efeito da tarina sobre populações celulares da medula óssea de camundongos da linhagem C57BL/6. Materiais e Métodos: Células obtidas da medula óssea de camundongos C57Bl/6 foram cultivadas em meio RPMI somente (controle) ou estimuladas com 25 ou 50 μg/mL de tarina purificada durante 14 dias. O desenvolvimento das culturas foi analisado nos dias 5, 8, 12 e 14 quanto a morfologia e a densidade de células através da microscopia óptica e imagens digitais foram obtidas. No 14º dia os sobrenadantes das culturas (meio condicionados) foram coletados para realização de ensaios clonogênicos em ágar semi-sólido. As células foram analisadas quanto aos critérios de tamanho versus granulosidade pela citometria de fluxo. Resultados: Após cinco dias de cultura as culturas estimuladas tarina apresentaram maior área ocupada por células sendo possível visualizar células aderentes com aspecto fibroblastóides maiores e com maior confluência, quando comparadas às culturas não estimuladas (controle). Após 8 dias, nas culturas estimuladas com 25 μg/mL apresentaram alguns clusters ou aglomerações celulares, enquanto nas que receberam 50μg foi possível observar a presença de muitas células pequenas significativa diminuição de células de maior granulosidade, e dispersas no meio. Nas culturas não estimuladas verificou-se que os parâmetros de tamanho x granulosidade ficaram bastante evidentes aos contrários das que receberam a tarina. Nos ensaios clonogênicos a adição de 10% (volume final) de meio condicionado das culturas estimuladas com tarina em cultura foi capaz de estimular significativamente o número de unidade formadora de colônia (UFC). Associação do meio condicionado (M.C.) estimulado com tarina associado ao meio condicionado (M.C.) de células M3 (fonte de IL-3) e ao M.C. de WEHI (fonte de GM-CSF). Surpreendentemente, a associação de M.C. tarina ao M.C. de células M3 resultou em uma potente inibição do efeito da IL-3 no número médio de UFC/campo. Conclusão: O conjunto dos resultados obtidos até o momento sugerem que a tarina atua na diferenciação celular de células progenitoras mieloides em células da linhagem granulocítica e células estimuladas com tarina induzem a produção de fatores de crescimento