Detecção laboratorial de resistência à polimixina entre amostras de klebsiella pneumoniae isoladas no Hospital Universitário Antônio Pedro

• Autor(a) principal: Fernandes, Daniela Greco Garcia
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
• Texto Completo: https://app.uff.br/riuff/handle/1/13150
• topic: Klebsiella pneumoniae; Resistência a polimixinas; Detecção laboratorial; Polimixinas; Klebsiella pneumoniae; Klebsiella pneumoniae; Polymyxin resistance; Laboratorial detection

A família Enterobacteriaceae contém alguns dos principais gêneros isolados em amostras biológicas que estão associados às infecções relacionadas à assistência à saúde (IRAS), bem como a infecções adquiridas na comunidade. Para tratamento de infecções causadas por essas bactérias os β-lactâmicos são uma das principais opções, porém a resistência a múltiplos antimicrobianos, incluindo aos carbapenêmicos, vem crescendo abruptamente, particularmente entre as enterobactérias e em especial, entre amostras de K. pneumoniae. Devido à dificuldade e limitação de opções terapêuticas para o tratamento de infecções por Gram-negativos resistentes aos carbapenêmicos, as polimixinas tornaram a ser consideradas opções de tratamento importantes pela escassez de novos antimicrobianos com ação contra esses microrganismos. Entretanto, consequentemente ao aumento do uso das polimixinas, a resistência a esses fármacos tem emergido no mundo, nos últimos anos, entre cepas de K. pneumoniae e outros Gram-negativos. A implementação de ferramentas de triagem rápidas e confiáveis para detectar e analisar patógenos resistentes à colistina de forma a se adotar medidas de precaução de contato e adaptação do tratamento do paciente é uma abordagem necessária. A microdiluição em caldo é considerada o método de referência para verificação dessa resistência, através da determinação das concentrações mínimas inibitórias (CMIs) frente a polimixina, porém é um método demorado e muito laborioso e por isso não muito adequado para as rotinas clínicas. O presente estudo teve como objetivo geral comparar métodos de detecção fenotípica de resistência a polimixina entre 17 amostras clínicas de K. pneumoniae, de uma coleção de amostras previamente caracterizadas como sendo resistentes (n=11) e sensíveis a polimixinas (n=6), obtidas de pacientes atendidos no Hospital Universitário Antônio Pedro, no período de maio de 2018 a junho de 2019. A identificação das amostras foi confirmada através de MALDI-TOF MS. Os métodos alternativos analisados foram: o sistema comercial Policimbac®, o sistema automatizado BD Phoenix™, o teste epsilométrico Etest® e o ágar Superpolimixina®. Também foram realizados testes de Hodge Modificado e o Método de Inibição do Carbapenêmico CIM, para detecção de amostras produtoras de carbanemases. A detecção genotípica dos genes blaKPC, blaNDM-1, blaOXA-48-like e mcr1-5 foi realizada através de Reações em Cadeia da Polimerase (PCR). A produção de carbapenemase foi observada em 84,6% (11/17) dos isolados pelos testes fenotípicos, sendo que 70,6% das 17 cepas foram positivas para o gene blaKPC; 5,9%, para o gene blaNDM-1 e nenhuma blaOXA-48-like. Todas as amostras foram negativas para o gene mcr, indicando a ocorrência de mecanismos de resistência a polimixinas associados com mutações cromossômicas, entre as amostras analisadas. As taxas obtidas para sensibilidade e especificidade, respectivamente, dos métodos alternativos em comparação ao padrão-ouro foram as seguintes: Policimbac (92,8% e 66,7%), Etest (86% e 100%), Ágar Superpolimixina (85% e 100%) e BD Phoenix (78,6% e 100%). Os resultados revelaram discrepâncias entre os métodos testados, levando à necessidade de mais estudos, com um número maior de amostras, para melhor avaliação do desempenho desses métodos.