Tipagem de papilomavírus humanos em amostras cervicais de pacientes coinfectadas pelo vírus da imunodeficiência humana

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Melgaço, Fabiana Gil
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/30484
Resumo: Contém ilustrações e tabelas
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spelling Tipagem de papilomavírus humanos em amostras cervicais de pacientes coinfectadas pelo vírus da imunodeficiência humanaPapilomavírus humano (HPV)Vírus da imunodeficiência humana (HIV)PCR-RFLPGenótipos oncogênicosLesões cervicaisPapillomavírus humanoHIVReação em cadeia da polimeraseGenótipoHuman papillomavirus (HPV)Human immunodeficiency virus (HIV)PCR-RFLPOncogenic genotypesCervical lesionsContém ilustrações e tabelasOs papilomavírus humanos (HPV) mucosotrópicos são potenciais agentes de possível lesões pré-malignas e malignas. O vírus da imunodeficiência humana (HIV), por diminuir a imunidade do hospedeiro, é um dos co-fatores que facilitam o desenvolvimento destas lesões. Um dos objetivos deste trabalho foi estabelecer a técnica de polimorfismo dos fragmentos obtidos por enzimas de restrição (RFLP) para detecção de genótipos de HPV em amostras cervicais de citologia de 140 pacientes infectadas por HIV atendidas no Serviço de Colposcopia do Hospital dos Servidores do Estado (HSE), Rio de Janeiro, no período de 2003 a 2005. A detecção e a tipificação de HPV foi realizada pela técnica de reação em cadeia pela polimerase, utilizando-se os oligonucleotídeos iniciadores My09/11, associada à técnica de polimorfismo dos fragmentos obtidos por enzimas de restrição (PCR-RFLP). Os produtos resultantes da amplificação por PCR, foram clivados por seis enzimas de restrição BamHI, DdeI, HaeIII, HinfI, PstI, RsaI. Os fragmentos gerados pela clivagem foram submetidos à eletroforese em gel de agarose 1,5%, corados com brometo de etídeo e visualizados sob luz U.V. Do total de 140 amostras, 83 (60,0%) foram positivas para o HPV. Vinte e quatro tipos diferentes de HPV foram detectados, com prevalência dos tipos de alto risco HPV 16 (16,4%), HPV 58 (7,5%) e HPV 53 (6,8%). A infecção por tipos oncogênicos de HPV apresentou uma associação significativa entre mulheres jovens (≤30 anos) (p=0,02), de etnia branca (p=0,004), com maior número de parceiros sexuais (p=0,06), com mais de um filho (p=0,06) e cujo diagnóstico para HIV foi conhecido há menos de quatro anos (p=0,001). A infecção por tipos de baixo risco foi associada a início da atividade sexual precoce (p=0,06). Genótipos oncogênicos ou não oncogênicos foram associados significativamente a alterações citológicas (p<0,001 e p=0,004, respectivamente). As pacientes que tinham contagem de células CD4 abaixo de 200/mm3 e 350/mm3 apresentaram maior probabilidade de desenvolver lesão cervical (p=0,009 e p=0,017, respectivamente) e de estarem infectadas por tipos de alto potencial oncogênico (p=0,025 e p=0,043, respectivamente). Concluímos que a implantação da técnica de PCR-RFLP permitiu a detecção de um grande número de genótipos distintos de HPV, como esperado em uma população HIV positiva. Considerando que nesta população, regularmente submetida a exames ginecológicos, foi encontrado um alto índice de lesões cervicais de alto grau, mas nenhum caso de câncer, ressaltamos a importância dos exames preventivos no controle desta doença.Human papillomaviruses (HPV) are potential agents of pre-malignant and malignant lesions in the cervical mucosa. Human immunodeficiency virus (HIV) is able to decrease host immunity acting as a co-factor in the development of these cervical lesions. The present work aimed to establish the restriction fragment length polymorphism technique for the detection of HPV types in cervical samples from 140 HIV soropositive women attending the Cervical Pathology Service of Hospital dos Servidores de Estado (HSE), Rio de Janeiro, from 2003 to 2005. The HPV detection and typing was carried out by polymerase chain reaction (PCR), using My09/11 generic primers followed by restriction fragment length polymorphism method (PCR-RFLP). The PCR products were digested by six restriction enzymes (BamHI, DdeI, HaeIII, HinfI, PstI, RsaI) and the fragments were analyzed in 1,5% agarose gels stained by ethidium bromide and visualized on U.V. light. From the 140 studied samples, 83 (60,0%) were HPV positive. Twenty four different HPV genotypes were detected. Among them, the most prevalent were the high risk HPV types HPV 16 (16,4%), 58 (7,5%) and 53 (6,8%). The oncogenic HPV types infection were significantly associated with young female patients (≤30 years) (p=0,02), white ethnicity (p=0,004), high number of sexual partners (p=0,06), more one parities (p=0,06) and recent HIV diagnosis (less than 4 years) (p=0,001). The low-risk HPV types infection were associated with early first sexual intercourse (p=0,06). Both oncogenic and non oncogenic genotypes were associated with abnormal cytology (p<0,001 and p=0,004, respectively). The patients that presented CD4 count less than 200/mm3 and 350/mm3 were in the greatest risk to develop cervical lesions (p=0,009 and p=0,017, respectively), and to be infected by high-risk HPV types (p=0,025 and p=0,043, respectively). We concluded that the use of PCR-RFLP method allowed the detection of a large spectrum of distinct HPV genotypes, as expected for HIV-infected patients. Considering that among the studied population, submitted to ginecological exams regularly, was found a frequent diagnosis of high-grade cervical lesions, but no cervical cancer, we highlighted the importance of preventive exams in disease control.91 f.Oliveira, Ledy do Horto dos Santoshttp://lattes.cnpq.br/9165123835667787Cavalcanti, Silvia Maria Baetahttp://lattes.cnpq.br/2365295393530809Rosa, Maria Luiza Garciahttp://lattes.cnpq.br/8552358503431338Guimarães, Isabel Cristina Chulvis Do Valhttp://lattes.cnpq.br/1963104885387212Wigg, Márcia Dutrahttp://lattes.cnpq.br/7603310511246027http://lattes.cnpq.br/2501823375304836Melgaço, Fabiana Gil2023-09-21T13:52:57Z2023-09-21T13:52:57Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfMELGAÇO, Fabiana Gil. Tipagem de papilomavírus humanos em amostras cervicais de pacientes coinfectadas pelo vírus da imunodeficiência humana. 2009. 91 f. 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