Localização celular de metabólitos halogenados em Laurencia obtusa (Ceramiales, Rhodophyta)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Leal, Rachel Nunes
Data de Publicação: 2007
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: https://app.uff.br/riuff/handle/1/22626
Resumo: Os corpos em cereja são inclusões celulares encontradas nas células corticais e nos tricoblastos de algumas espécies do gênero Laurencia (Ceramiales, Rhodophyta), e são sugeridos como locais de síntese ou armazenamento de metabólitos secundários halogenados. Os corpos em cereja foram pouco estudados, sua composição é desconhecida e a maior parte dos trabalhos existentes os descrevem apenas com o uso da microscopia óptica convencional. Os objetivos desse trabalho são: descrever a estrutura dos corpos em cereja de L. obtusa por técnicas de microscopia óptica (MO) e microscopia eletrônica de transmissão (MET); determinar as vias de síntese dos metabólitos halogenados em L. obtusa e localizar os metabólitos halogenados nas células de L. obtusa. Foram utilizados três protocolos diferentes para processar as amostras a serem analisadas por MET As amostras fixadas da forma convencional à temperatura ambiente apresentaram corpos em cereja mais preservados e foram utilizadas para a descrição ultraestrutural destas inclusões por MET Estas estruturas são membranosas, ocupam a região central da célula e seu conteúdo varia de homogêneo a granular, podendo conter vesículas, e microvesículas. São osmiofílicas e sensíveis às técnicas de preservação. A presença de bromo e, consequentemente, a presença de metabólitos secundários bromados foi confirmada em corpos em cereja isolados por micromanipulação e depois analisados por microanálise de raios-X. Em MO no modo DIC e por epifluorescência, pôde-se verificar que o conteúdo dos corpos em cereja também está presente em vesículas distribuídas pelo citoplasma parietal. Também por MO foram observados corpos em cereja em espécimes vivos de L. obtusa, os quais estão presentes em número de um a três por célula cortical, se apresentam arredondados ou reniformes, são refrangentes e envoltos por uma dupla membrana. Canais de comunicação membranar conectam os corpos em cereja ao citoplasma periférico da célula, por meio do qual o conteúdo destas inclusões é transportado na forma de vesículas que se difundem pela parede celular em direção a superfície da macroalga. O processo de degradação dos corpos em cereja e morte celular foi acompanhado. Pelos resultados obtidos, confirmou-se que os corpos em cereja são sítios de localização de bromo, e conseqüentemente, local de substâncias halogenadas; que há transporte do material do corpo em cereja para a periferia da célula, possivelmente relacionado à exsudação de metabólitos para a superfície da alga; que a morte celular causada pela degradação dos corpos em cereja indica a natureza autotóxica de seu conteúdo e a necessidade de isolamento do corpo por membranas.
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Foram utilizados três protocolos diferentes para processar as amostras a serem analisadas por MET As amostras fixadas da forma convencional à temperatura ambiente apresentaram corpos em cereja mais preservados e foram utilizadas para a descrição ultraestrutural destas inclusões por MET Estas estruturas são membranosas, ocupam a região central da célula e seu conteúdo varia de homogêneo a granular, podendo conter vesículas, e microvesículas. São osmiofílicas e sensíveis às técnicas de preservação. A presença de bromo e, consequentemente, a presença de metabólitos secundários bromados foi confirmada em corpos em cereja isolados por micromanipulação e depois analisados por microanálise de raios-X. Em MO no modo DIC e por epifluorescência, pôde-se verificar que o conteúdo dos corpos em cereja também está presente em vesículas distribuídas pelo citoplasma parietal. Também por MO foram observados corpos em cereja em espécimes vivos de L. obtusa, os quais estão presentes em número de um a três por célula cortical, se apresentam arredondados ou reniformes, são refrangentes e envoltos por uma dupla membrana. Canais de comunicação membranar conectam os corpos em cereja ao citoplasma periférico da célula, por meio do qual o conteúdo destas inclusões é transportado na forma de vesículas que se difundem pela parede celular em direção a superfície da macroalga. O processo de degradação dos corpos em cereja e morte celular foi acompanhado. Pelos resultados obtidos, confirmou-se que os corpos em cereja são sítios de localização de bromo, e conseqüentemente, local de substâncias halogenadas; que há transporte do material do corpo em cereja para a periferia da célula, possivelmente relacionado à exsudação de metabólitos para a superfície da alga; que a morte celular causada pela degradação dos corpos em cereja indica a natureza autotóxica de seu conteúdo e a necessidade de isolamento do corpo por membranas.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorThe corps en cerise are cellular inclusions found in cortical cells and trichoblast in some species of Laurencia genus (Ceramiales, Rhodophyta). They are suggested as storage or synthesis site for halogenated secondary metabolites. Few studies were done about corps en cerise structure and composition, and the most available data describe it only by conventional optical microscopy. The aim of this work is to describe in Laurencia obtusa, the structure of corps en cerise by optical microscopy (OM) and transmission electron microscopy (TEM) techniques, determine the synthesis way of halogenated metabolites and locate the halogenated metabolites at sub-cellular level. Three different protocols of samples preparation for TEM were tested. The samples fixed in conventional way in ambient temperature presented well preserved corps en cerise and then were utilized for ultrastructural descriptions. The corps en cerise are protected by membranes, occupy the central region of the cells, their contents varied from homogeneous to granular, and could contain vesicles and microvesicles. They are osmiophilic and are sensible to preservation techniques. The presence of bromine in corps en cerise isolated by micromanipulation was confirmed by analytical electron microscopy. By using optical microscopy in DIC and in epifluorescence mode, it was verified that the same content of that found in corps en cerise were seen in vesicles spread at parietal cytoplasm. By optical microscopy observation of corps en cerise in live plants, it was seen that they are one to three per cell, with a round or kidney shape, present a refractile nature and are protected by double membrane layers. Membrane nature communication channels connects corps en cerise to periphery cytoplasm, through out the corps en cerise contents are transported in small vesicles to cell wall in direction to plant surface. The degradation process of corps en cerise and cellular death were observed. By the obtained results, it was possible to confirm that corps en cerise are the main bromine localization site and, consequently, of the halogenated substances; that transport of material exists from corps en cerise to cell periphery, possibly related to exudation of metabolites to plant surface and that cellular death induced for degradation of corps en cerise indicates the autotoxic nature of corps en cerise content and the necessity of isolation of corps en cerise by membranes.Amado Filho, Gilberto MenezesPereira, Renato CrespoAmado Filho, Gilberto MenezesPereira, Renato CrespoFujii, Mutue ToyotaTeixeira, Valéria LaneuvilleLeal, Rachel Nunes2021-07-15T17:34:06Z2021-07-15T17:34:06Z2007info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfLEAL, Rachel Nunes. Localização celular de metabólitos halogenados em Laurencia obtusa (Ceramiales, Rhodophyta). 2007. 32f. 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