Avaliação da ação do hormônio de crescimento na proliferação/viabilidade in vitro de células de Schwann normais, de neurofibroma plexiforme e tumor maligno da bainha do nervo periférico de indivíduos com neurofibromatose tipo 1
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Tese |
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Título da fonte: | Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) |
Texto Completo: | https://app.uff.br/riuff/handle/1/12275 |
Resumo: | Introdução: Indivíduos com neurofibromatose tipo 1 podem ser candidatos à utilização de hormônio do crescimento recombinante devido à alta frequência de baixa estatura, levando a discussão sobre possível ação do hormônio do crescimento nos tumores associados a neurofibromatose, visto que neurofibromas expressam o receptor deste hormônio. Desta forma, foi formulada a seguinte hipótese: o hormônio do crescimento promove a proliferação/viabilidade de células de Schwann dos neurofibromas plexiformes e tumores malignos da bainha do nervo periférico associados à neurofibromatose tipo 1 em modelos de cultivo 2D e 3D. Objetivo geral: Avaliar a ação in vitro em modelos de cultivo 2D e 3D do hormônio de crescimento em células de Schwann de neurofibroma plexiforme e de tumor maligno da bainha de nervo periférico de indivíduos com neurofibromatose tipo 1. Material e Métodos: A amostra é constituída de linhagens de células de Schwann: uma NF1+/+ de nervo ciático (IPN0.23) de indivíduo sem neurofibromatose tipo 1 e duas linhagens NF1-/- de indivíduos com neurofibromatose tipo 1, de neurofibroma plexiforme (IPNF04.4) e de tumor maligno da bainha de nervo periférico (SNF94.3). A expressão do receptor do hormônio do crescimento foi avaliada por imunofluorescência e por citometria de fluxo. A ação do hormônio do crescimento foi analisada através da avaliação da proliferação/ viabilidade celular em cultura 2D e avaliando em 3D a morfologia, volume, área e excentricidade de esferoides com diferentes concetrações iniciais de células. Resultados: Todas as linhagens de células de Schwann expressam o receptor do hormônio do crescimento. O hormônio do crescimento promoveu a manutenção da viabilidade das células IPNF04.4 após 72 horas, não tendo ação nas células IPN02.3 e SNF94.3 no modelo 2D. No modelo 3D, o hormônio estimulou alteração de excentricidade e morfologia de todos os esferoides e aumento de volume dos esferoides de alta concentração iniciail das células da IPN02.3, de baixa/média concentração de SNF94.3 e de todos os esferoides das células IPNF04.4. Conclusão: O hormônio do crescimento, independente da concentração utilizada, atua no aumento de volume dos esferoides das células de Schwann normais, mas seu efeito é mais evidente nas células de Schwann neoplásicas de neurofibroma plexiforme e de tumor maligno da bainha do nervo periférico quando cultivadas em modelo 3D |
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Avaliação da ação do hormônio de crescimento na proliferação/viabilidade in vitro de células de Schwann normais, de neurofibroma plexiforme e tumor maligno da bainha do nervo periférico de indivíduos com neurofibromatose tipo 1Neurofibromatose tipo 1Neoplasias da bainha neuralHormônio do crescimentoReceptor do hormônio do crescimentoTécnicas de cultura celularNeurofibromatose 1Neoplasias da bainha neuralHormônio do crescimentoTécnicas de cultura de célulasNeurofibromatosis type 1Neural sheath neoplasmsGrowth hormoneGrowth hormone receptorCell culture techniquesIntrodução: Indivíduos com neurofibromatose tipo 1 podem ser candidatos à utilização de hormônio do crescimento recombinante devido à alta frequência de baixa estatura, levando a discussão sobre possível ação do hormônio do crescimento nos tumores associados a neurofibromatose, visto que neurofibromas expressam o receptor deste hormônio. Desta forma, foi formulada a seguinte hipótese: o hormônio do crescimento promove a proliferação/viabilidade de células de Schwann dos neurofibromas plexiformes e tumores malignos da bainha do nervo periférico associados à neurofibromatose tipo 1 em modelos de cultivo 2D e 3D. Objetivo geral: Avaliar a ação in vitro em modelos de cultivo 2D e 3D do hormônio de crescimento em células de Schwann de neurofibroma plexiforme e de tumor maligno da bainha de nervo periférico de indivíduos com neurofibromatose tipo 1. Material e Métodos: A amostra é constituída de linhagens de células de Schwann: uma NF1+/+ de nervo ciático (IPN0.23) de indivíduo sem neurofibromatose tipo 1 e duas linhagens NF1-/- de indivíduos com neurofibromatose tipo 1, de neurofibroma plexiforme (IPNF04.4) e de tumor maligno da bainha de nervo periférico (SNF94.3). A expressão do receptor do hormônio do crescimento foi avaliada por imunofluorescência e por citometria de fluxo. A ação do hormônio do crescimento foi analisada através da avaliação da proliferação/ viabilidade celular em cultura 2D e avaliando em 3D a morfologia, volume, área e excentricidade de esferoides com diferentes concetrações iniciais de células. Resultados: Todas as linhagens de células de Schwann expressam o receptor do hormônio do crescimento. O hormônio do crescimento promoveu a manutenção da viabilidade das células IPNF04.4 após 72 horas, não tendo ação nas células IPN02.3 e SNF94.3 no modelo 2D. No modelo 3D, o hormônio estimulou alteração de excentricidade e morfologia de todos os esferoides e aumento de volume dos esferoides de alta concentração iniciail das células da IPN02.3, de baixa/média concentração de SNF94.3 e de todos os esferoides das células IPNF04.4. Conclusão: O hormônio do crescimento, independente da concentração utilizada, atua no aumento de volume dos esferoides das células de Schwann normais, mas seu efeito é mais evidente nas células de Schwann neoplásicas de neurofibroma plexiforme e de tumor maligno da bainha do nervo periférico quando cultivadas em modelo 3DIntroduction: Individuals with type 1 neurofibromatosis may be candidates for the use of recombinant growth hormone due to the high frequency of short stature, leading to discussion of possible action of growth hormone on tumors associated with neurofibromatosis, since neurofibromas express the receptor of this hormone. Growth hormone promotes the proliferation of Schwann cells from plexiform neurofibromas and malignant peripheral nerve sheath tumors associated with neurofibromatosis type 1 in 2D and 3D culture models.Aim: To evaluate the in vitro action of growth hormone in 2D and 3D culture models in Schwann cells of plexiform neurofibroma and malignant peripheral nerve sheath tumor of individuals with neurofibromatosis type 1. Methods: The sample consists of Schwann cell lines: one sciatic nerve NF1+/+ (IPN0.23) of individual without neurofibromatosis type 1 and two NF1-/- lines of individuals with neurofibromatosis type 1, of plexiform neurofibroma (IPNF04.4) and malignant peripheral nerve sheath tumor (SNF94.3). Expression of the growth hormone receptor was assessed by immunofluorescence and flow cytometry. The action of growth hormone was analyzed by evaluating cell proliferation in 2D and evaluating in 3D the morphology, volume, area and eccentricity of spheroids with different initial cell concentrations. Results: All Schwann cell lines of plexiform neurofibromas and malignant peripheral nerve sheath tumors express the growth hormone receptor. However, growth hormone promoted the maintenance of viability of plexiform neurofibroma cells (IPNF04.4) after 72 hours only, but ineffective in IPN02.3 e SNF94.3 cell lines. Growth hormone stimulated changes in the eccentricity and morphology of the spheroids of all Schwann cells lines analyzed regardless of their concentration. Growth hormone stimulated increased spheroid volume with high initial cell concentration of IPN02.3, had no effect on SNF94.3 spheroids with low/mean cells concentration and promoted volume increase in all spheroids of IPNF04.4 cells. Conclusion: GH, regardless of the concentração used, acts on the proliferation of normal Schwann cells, but mainly of neoplastic Schwann cells of plexiform neurofirboma and TMBNP when cultured in 3D model95f.Cunha, Karin Soares GonçalvesPaiva, Luciana Souza deVericimo, Mauricio AfonsoSousa, Marcus André Acioly deAmadeu, Thaís PortoOliveira, Felipe Leite deBrito Neto, José Marques dePetito, Rafael Bragahttp://lattes.cnpq.br/6949842141354299http://lattes.cnpq.br/2530104978789735http://lattes.cnpq.br/2881292492337530http://lattes.cnpq.br/5257634091758383http://lattes.cnpq.br/3542098570637209http://lattes.cnpq.br/2597262972255276http://lattes.cnpq.br/6782867090133372http://lattes.cnpq.br/2814013102319474Losso, Raquel Machado Andrade2019-11-25T12:53:17Z2019-11-25T12:53:17Z2017info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfLOSSO, Raquel Machado Andrade. 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Introdução: Indivíduos com neurofibromatose tipo 1 podem ser candidatos à utilização de hormônio do crescimento recombinante devido à alta frequência de baixa estatura, levando a discussão sobre possível ação do hormônio do crescimento nos tumores associados a neurofibromatose, visto que neurofibromas expressam o receptor deste hormônio. Desta forma, foi formulada a seguinte hipótese: o hormônio do crescimento promove a proliferação/viabilidade de células de Schwann dos neurofibromas plexiformes e tumores malignos da bainha do nervo periférico associados à neurofibromatose tipo 1 em modelos de cultivo 2D e 3D. Objetivo geral: Avaliar a ação in vitro em modelos de cultivo 2D e 3D do hormônio de crescimento em células de Schwann de neurofibroma plexiforme e de tumor maligno da bainha de nervo periférico de indivíduos com neurofibromatose tipo 1. Material e Métodos: A amostra é constituída de linhagens de células de Schwann: uma NF1+/+ de nervo ciático (IPN0.23) de indivíduo sem neurofibromatose tipo 1 e duas linhagens NF1-/- de indivíduos com neurofibromatose tipo 1, de neurofibroma plexiforme (IPNF04.4) e de tumor maligno da bainha de nervo periférico (SNF94.3). A expressão do receptor do hormônio do crescimento foi avaliada por imunofluorescência e por citometria de fluxo. A ação do hormônio do crescimento foi analisada através da avaliação da proliferação/ viabilidade celular em cultura 2D e avaliando em 3D a morfologia, volume, área e excentricidade de esferoides com diferentes concetrações iniciais de células. Resultados: Todas as linhagens de células de Schwann expressam o receptor do hormônio do crescimento. O hormônio do crescimento promoveu a manutenção da viabilidade das células IPNF04.4 após 72 horas, não tendo ação nas células IPN02.3 e SNF94.3 no modelo 2D. No modelo 3D, o hormônio estimulou alteração de excentricidade e morfologia de todos os esferoides e aumento de volume dos esferoides de alta concentração iniciail das células da IPN02.3, de baixa/média concentração de SNF94.3 e de todos os esferoides das células IPNF04.4. Conclusão: O hormônio do crescimento, independente da concentração utilizada, atua no aumento de volume dos esferoides das células de Schwann normais, mas seu efeito é mais evidente nas células de Schwann neoplásicas de neurofibroma plexiforme e de tumor maligno da bainha do nervo periférico quando cultivadas em modelo 3D |
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