Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Gonçalves, Priscilla de Simone
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/28974
Resumo: Trabalho desenvolvido no Laboratório de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos Centro de Desenvolvimento Tecnológico em Saúde-FIOCRUZ
id UFF-2_9c524e9a633b587048ba3e0f6582d1fc
oai_identifier_str oai:app.uff.br:1/28974
network_acronym_str UFF-2
network_name_str Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
repository_id_str 2120
spelling Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicosImmune mapping of five proteins from Leptospira interrogans for the development of specific IgM and IgG diagnostic testsLeptospira interrogansLeptospiroseEpítopos IgMEpítopos IgGELISA-peptídeoInsumos diagnósticosDoença transmissívelBactériaPeptídeo hidrolaseAnticorpoSíntese químicaImunoensaioELISALeptospira interrogansLeptospirosisPeptide microarrayIgM epitopesIgG epitopesELISA-peptideDiagnostic inputsTrabalho desenvolvido no Laboratório de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos Centro de Desenvolvimento Tecnológico em Saúde-FIOCRUZA notificação de casos de Leptospirose no mundo vem crescendo anualmente, entretanto no Brasil tem se mantido com cerca de 3.600 casos/ano e recrudesce quando existem catástrofes ambientais. Quando diagnosticada rapidamente pode ser tratada adequadamente, contudo o diagnóstico incorreto pode levar a lesões renais e hepáticas graves e ao óbito. A dificuldade diagnóstica laboratorial ocorre por falta de um teste específico e sensível. O teste diagnóstico ainda utilizado em muitos países é o de aglutinação microscópica (MAT) e pesquisa de Leptospira. Apesar destes testes não serem específicos e apresentarem baixa sensibilidade, ainda são recomendados e distribuídos pelo Ministério da Saúde no Brasil (MS/Brasil). Visando identificar estruturas antigênicas que possam contribuir para o desenvolvimento de testes de diagnósticos rápidos e específicos, os epitopos IgM e IgG de 5 proteínas de Leptospira interrogans (Lip32, Lip41, Lp49, ICD e Lpsinal) foram mapeadas, utilizando a técnica de microarranjo de peptídeos por Spot-synthesis. Um total de 112 epítopos majoritários foram identificados (54 IgM e 58 IgG) e destes 33 compartilhavam reatividade tanto IgM quanto IgG. Após eliminação dos epítopos que apresentaram reação cruzada, cinco epitopos (Lip32/05-M, Lip32/11-M, Lip41/02-M, Lip41/03-M, Lip41/06-M), considerados específicos por análise in silicos e reatores tanto para IgM quanto IgG foram selecionados. Uma análise por modelagem molecular, mostrou que estes epitopos estavam dispostos na superfície molecular, portanto acessíveis ao solvente. Dois destes epitopos foram selecionados e sintetizadas quimicamente (Lip32/05-M e Lip41/02-M) sob forma de peptídeos multiantigênicos (MAP4) e analisadas por ELISA com um painel de soros de pacientes saudáveis e com doenças não relacionadas. Os resultados da curva ROC, mostraram que os peptídeos apresentaram uma lata sensibilidade (100%) e especificidade (100%) com ótimo desempenho (p<0.05), indicando assim, que estes peptídeos são elegíveis para passarem para estudos de fase 2 de desenvolvimento de um teste diagnóstico específico para Leptosirose.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de JaneiroPró-Reitoria de Pesquisa, Pós-Graduação e Inovação - Universidade Federal FluminenseThe notification of Leptospirosis cases in the world has been growing annually, however, in Brazil, it has remained with about 3,600 cases/year and increases when there are environmental catastrophes. When diagnosed quickly it can be treated appropriately, however, the incorrect diagnosis can lead to severe kidney and liver damage and death. The laboratory diagnostic difficulty occurs due to the lack of a specific and sensitive test. The diagnostic test still used in many countries is microscopic agglutination (MAT) and Leptospira research. Although these tests are not specific and have low sensitivity, they are still recommended and distributed by the Ministry of Health in Brazil (MS / Brazil). To identify antigenic structures that may contribute to the development of rapid and specific diagnostic tests, the IgM and IgG epitopes of 5 Leptospira interrogans proteins (Lip32, Lip41, Lp49, ICD, and Lpsinal) were mapped, using the peptide microarray technique by Spot-synthesis. A total of 112 major epitopes were identified (54 IgM and 58 IgG) and of these 33 shared reactivity with both IgM and IgG. After eliminating the cross-reacting epitopes, five epitopes (Lip32/05-M, Lip32/11-M, Lip41/02-M, Lip41/03-M, Lip41/06-M), considered specific by in silico analysis and reactors for both IgM and IgG were selected. An analysis by molecular modeling showed that these epitopes were distributed on the molecular surface, therefore accessible to the solvent. Two of these epitopes were selected and chemically synthesized (LipL32 / 03-M and LipL41/02-M) in the form of multi-antigenic peptides (MAP4) and analyzed by ELISA with a panel including sera from healthy patients and with unrelated diseases. The results of the ROC curve showed that the peptides presents a high sensitivity (100%) and specificity (100%) with excellent performance (p<0.05), indicating, therefore, that these peptides are eligible to pass for phase 2 development studies, of a specific diagnostic test for Leptospirosis.61 f.Simone, Salvatore Giovanni dePêgo, Paloma NapoleãoRangel, Helena CarlaSilva, Flavio Rocha daGomes, Larissa RodriguesNovais, JulianaOliveira, Thatiane De SimoneGonçalves, Priscilla de Simone2023-05-23T19:32:13Z2023-05-23T19:32:13Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfGONÇALVES, Priscilla de Simone. Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos. 2020. 61 f. Dissertação (Mestrado em Ciências e Biotecnologia) – Programa de Pós-Graduação em Ciências e Biotecnologia, Instituto de Biologia, Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2020.http://app.uff.br/riuff/handle/1/28974CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2023-05-23T19:32:16Zoai:app.uff.br:1/28974Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202023-05-23T19:32:16Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false
dc.title.none.fl_str_mv Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
Immune mapping of five proteins from Leptospira interrogans for the development of specific IgM and IgG diagnostic tests
title Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
spellingShingle Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
Gonçalves, Priscilla de Simone
Leptospira interrogans
Leptospirose
Epítopos IgM
Epítopos IgG
ELISA-peptídeo
Insumos diagnósticos
Doença transmissível
Bactéria
Peptídeo hidrolase
Anticorpo
Síntese química
Imunoensaio
ELISA
Leptospira interrogans
Leptospirosis
Peptide microarray
IgM epitopes
IgG epitopes
ELISA-peptide
Diagnostic inputs
title_short Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
title_full Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
title_fullStr Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
title_full_unstemmed Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
title_sort Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos
author Gonçalves, Priscilla de Simone
author_facet Gonçalves, Priscilla de Simone
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Simone, Salvatore Giovanni de
Pêgo, Paloma Napoleão
Rangel, Helena Carla
Silva, Flavio Rocha da
Gomes, Larissa Rodrigues
Novais, Juliana
Oliveira, Thatiane De Simone
dc.contributor.author.fl_str_mv Gonçalves, Priscilla de Simone
dc.subject.por.fl_str_mv Leptospira interrogans
Leptospirose
Epítopos IgM
Epítopos IgG
ELISA-peptídeo
Insumos diagnósticos
Doença transmissível
Bactéria
Peptídeo hidrolase
Anticorpo
Síntese química
Imunoensaio
ELISA
Leptospira interrogans
Leptospirosis
Peptide microarray
IgM epitopes
IgG epitopes
ELISA-peptide
Diagnostic inputs
topic Leptospira interrogans
Leptospirose
Epítopos IgM
Epítopos IgG
ELISA-peptídeo
Insumos diagnósticos
Doença transmissível
Bactéria
Peptídeo hidrolase
Anticorpo
Síntese química
Imunoensaio
ELISA
Leptospira interrogans
Leptospirosis
Peptide microarray
IgM epitopes
IgG epitopes
ELISA-peptide
Diagnostic inputs
description Trabalho desenvolvido no Laboratório de Bioquímica de Proteínas e Peptídeos Centro de Desenvolvimento Tecnológico em Saúde-FIOCRUZ
publishDate 2023
dc.date.none.fl_str_mv 2023-05-23T19:32:13Z
2023-05-23T19:32:13Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv GONÇALVES, Priscilla de Simone. Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos. 2020. 61 f. Dissertação (Mestrado em Ciências e Biotecnologia) – Programa de Pós-Graduação em Ciências e Biotecnologia, Instituto de Biologia, Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2020.
http://app.uff.br/riuff/handle/1/28974
identifier_str_mv GONÇALVES, Priscilla de Simone. Mapeamento imunológico de cinco proteínas de Leptospira interrogans para o desenvolvimento de testes diagnósticos IgM E IgG específicos. 2020. 61 f. Dissertação (Mestrado em Ciências e Biotecnologia) – Programa de Pós-Graduação em Ciências e Biotecnologia, Instituto de Biologia, Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2020.
url http://app.uff.br/riuff/handle/1/28974
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv CC-BY-SA
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv CC-BY-SA
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)
instacron:UFF
instname_str Universidade Federal Fluminense (UFF)
instacron_str UFF
institution UFF
reponame_str Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
collection Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)
repository.mail.fl_str_mv riuff@id.uff.br
_version_ 1807838837624274944

Registros relacionados