Produção in vitro de embriões da Raça Santa Inês: avaliação da dose superovulatória de pFSH e do manejo da dor na coleta não cirúrgica de embriões

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Ribeiro, Ana Clara Sarzedas
Data de Publicação: 2024
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: https://app.uff.br/riuff/handle/1/35168
Resumo: Objetivou-se aprimorar a produção in vivo de embriões (PIVE) em ovinos, com ênfase no protocolo de superovulação (SOV) e no manejo da dor durante a coleta transcervical de embriões (CTE). Foi elaborada uma revisão sobre o bem-estar animal (BEA) nos procedimentos de PIVE em ovinos. O primeiro ensaio comparou a eficácia de doses de pFSH sobre o crescimento folicular e a produção embrionária em ovelhas Santa Inês. As ovelhas foram sincronizadas e superovuladas com 133 mg (G133, n=18) ou 200 mg (G200, n=18; Folltropin-V®). O status folicular foi avaliado por ultrassonografia. Os animais foram verificados quanto ao estro e acasalados naturalmente. A CTE foi realizada (aproximadamente seis dias após a ovulação). As estruturas recuperadas foram verificadas quanto a qualidade e o estágio de desenvolvimento; os embriões Grau 1, 2 ou 3 foram considerados viáveis e os Grau 1 ou 2 congeláveis. Uma amostra dos blastocistos (G133: n=7; G200: n=10) foi corada com Nile Red, para quantificar lipídeos, e Hoechst, para determinar o número de blastômeros. Ambas as doses promoveram resposta superovulatória eficiente e não afetaram o acúmulo de lipídios embrionários. O G200 teve um maior número e tamanho de folículos, apresentou estro mais longo e produziu mais embriões congeláveis do que o G133. No segundo ensaio os animais receberam o mesmo tratamento, porém foram superovulados com 333 UI (G333, n=20) ou 500 UI (G500, n=20) de pFSH (Pluset®). Uma amostra dos blastocistos (G333: n=10; G500: n=8) foi corada com Nile Red. Os tratamentos não interferiram no crescimento folicular, produção de embriões e acúmulo de lipídios embrionários. O terceiro ensaio avaliou o manejo da dor em ovelhas submetidas à CTE, em dois estudos. No Estudo 1, as ovelhas (n=12) receberam meloxicam (GM) antes da transposição cervical (1 mg.kg1 , i.v.) e 24 h após (1 mg.kg-1 , i.m.), enquanto o grupo controle (GC1; n=10) recebeu solução salina. No Estudo 2, foram divididos em um grupo tratado como o GM associado a dipirona (GMD; 50 mg.kg-1 , i.m.; n=15) antes da transposição, 12 h e 24 h depois e um grupo controle (GC2; n=14) tratado com solução salina. Em ambos, as frequências cardíaca e respiratória (FR) e a concentração de cortisol, glicose, proteínas totais (PT), albumina e globulinas foram registradas desde antes da sedação até 48 h após a coleta dos embriões (hAC). No Estudo 1, a FR tendeu a ser maior no GC1 e o GM apresentou PT e globulinas mais elevadas e albumina mais baixa. No Estudo 2, a glicemia tendeu a ser maior no GC2 depois da sedação e foi maior em 3hAC e 6hAC; cortisol tendeu a ser maior no GC2; e PT e globulinas foram maiores GC2. Conclui-se que a utilização de 200 mg ou 333 UI de pFSH em ovelhas Santa Inês promoveram SOV e produção de embriões eficientes e não afetaram o acúmulo de lipídios embrionários. A CTE promoveu alterações transitórias em marcadores de estresse e dor e os protocolos utilizados induziram efeitos leves sem modificar as principais respostas indicativas de BEA.
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Os animais foram verificados quanto ao estro e acasalados naturalmente. A CTE foi realizada (aproximadamente seis dias após a ovulação). As estruturas recuperadas foram verificadas quanto a qualidade e o estágio de desenvolvimento; os embriões Grau 1, 2 ou 3 foram considerados viáveis e os Grau 1 ou 2 congeláveis. Uma amostra dos blastocistos (G133: n=7; G200: n=10) foi corada com Nile Red, para quantificar lipídeos, e Hoechst, para determinar o número de blastômeros. Ambas as doses promoveram resposta superovulatória eficiente e não afetaram o acúmulo de lipídios embrionários. O G200 teve um maior número e tamanho de folículos, apresentou estro mais longo e produziu mais embriões congeláveis do que o G133. No segundo ensaio os animais receberam o mesmo tratamento, porém foram superovulados com 333 UI (G333, n=20) ou 500 UI (G500, n=20) de pFSH (Pluset®). Uma amostra dos blastocistos (G333: n=10; G500: n=8) foi corada com Nile Red. Os tratamentos não interferiram no crescimento folicular, produção de embriões e acúmulo de lipídios embrionários. O terceiro ensaio avaliou o manejo da dor em ovelhas submetidas à CTE, em dois estudos. No Estudo 1, as ovelhas (n=12) receberam meloxicam (GM) antes da transposição cervical (1 mg.kg1 , i.v.) e 24 h após (1 mg.kg-1 , i.m.), enquanto o grupo controle (GC1; n=10) recebeu solução salina. No Estudo 2, foram divididos em um grupo tratado como o GM associado a dipirona (GMD; 50 mg.kg-1 , i.m.; n=15) antes da transposição, 12 h e 24 h depois e um grupo controle (GC2; n=14) tratado com solução salina. Em ambos, as frequências cardíaca e respiratória (FR) e a concentração de cortisol, glicose, proteínas totais (PT), albumina e globulinas foram registradas desde antes da sedação até 48 h após a coleta dos embriões (hAC). No Estudo 1, a FR tendeu a ser maior no GC1 e o GM apresentou PT e globulinas mais elevadas e albumina mais baixa. No Estudo 2, a glicemia tendeu a ser maior no GC2 depois da sedação e foi maior em 3hAC e 6hAC; cortisol tendeu a ser maior no GC2; e PT e globulinas foram maiores GC2. Conclui-se que a utilização de 200 mg ou 333 UI de pFSH em ovelhas Santa Inês promoveram SOV e produção de embriões eficientes e não afetaram o acúmulo de lipídios embrionários. A CTE promoveu alterações transitórias em marcadores de estresse e dor e os protocolos utilizados induziram efeitos leves sem modificar as principais respostas indicativas de BEA.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de JaneiroAimed to improve in vivo embryo production (IVEP) in sheep, with an emphasis on the superovulation (SOV) protocol and pain management during transcervical embryo collection (TEC). A review about animal welfare (AW) in the IVEP procedures in sheep was elaborated. The first essay compared the effectiveness of pFSH doses on follicular growth and embryo production in Santa Inês ewes. The ewes were synchronized and superovulated with 133 mg (G133, n=18) or 200 mg (G200, n=18; Folltropin-V®). The follicular status was evaluated by ultrasound. The animals were checked for estrous and mate naturally. TEC was performed (about six days after ovulation). The recovered structures were verified as to the quality and stage of development. The Grade 1, 2 or 3 embryos were considered viable and Grade 1 or 2 embryos were considered freezable. A sample of viable blastocysts (G133: n = 7; G200: n = 10) was stained with Nile Red, for quantification of lipids, and Hoechst, to determine the number of blastomeres. Both doses promoted an efficient superovulatory response and did not affect the accumulation of embryonic lipids. The G200 had a greater number and size of follicles, showed longer estrous, and produced more freezable embryos than G133. In the second essay, the animals received the same treatment but were superovulated with 333 IU (G333, n = 20) or 500 IU (G500, n = 20) of pFSH (Pluset®). A sample of viable blastocysts (G333: n = 10; G500: n = 8) was stained with Nile Red. The treatments did not interfere with follicular growth, embryo production, and accumulation of embryonic lipids. The third essay evaluated the pain management in ewes subjected to TEC in two studies. In Study 1, ewes (n=12) received meloxicam (GM) before cervical transposition (1 mg.kg-1 , i.v.) and 24 h after (1 mg.kg-1 , i.m.), while the control group (GC1; n=10) received saline solution. In Study 2, ewes were divided into a group treated as GM associated with dipyrone (GMD; 50 mg.kg-1 , i.m.; n=15) before transposition, 12 h and 24 h after, and a control group (GC2; n=14) treated with saline solution. In both studies, heart rate and respiratory rate (RR), and blood concentrations of cortisol, glucose, total proteins (TP), albumin, and globulins were recorded from before sedation until 48 h after embryo collection (hAC). In Study 1, RR tended to be higher in GC1; TP and globulin were higher, and albumin was lower in GM than in GC1. In Study 2, blood glucose tended to be higher in CG2 than in GMD after sedation and was higher at 3hAC and 6hAC; cortisol tended to be higher in CG2; and TP and globulins were higher in GC2. It was concluded that the use of 200 mg or 333 IU of pFSH in Santa Inês donors promoted superovulatory response and embryo production efficient, without affecting embryonic lipid accumulation. The TEC induced transient changes in stress and pain markers, and the protocols used induced mild effects without modifying the main responses indicative of AW.145 f.Brandão, Felipe Zandonadihttp://lattes.cnpq.br/5996890400232803Santos, Juliana Dantas RodriguesBalaro, Mario Felipe Alvarezhttp://lattes.cnpq.br/2322312095515370Mondadori, Rafael Gianellahttp://lattes.cnpq.br/8612494494829912Oliveira, Fernando Caetanohttp://lattes.cnpq.br/9969392380916734http://lattes.cnpq.br/4716104912260308Ribeiro, Ana Clara Sarzedas2024-10-31T17:34:49Z2024-10-31T17:34:49Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfRIBEIRO, Ana Clara Sarzedas. Produção in vitro de embriões da Raça Santa Inês: avaliação da dose superovulatória de pFSH e do manejo da dor na coleta não cirúrgica de embriões. 2024. 145 f. Tese (Doutorado em Medicina Veterinária) - Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária - Clínica e Reprodução Animal. Universidade Federal Fluminense. Niterói, 2024.https://app.uff.br/riuff/handle/1/35168CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2024-10-31T17:34:53Zoai:app.uff.br:1/35168Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202024-10-31T17:34:53Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false
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