Investigação fenotípica e genotípica da ocorrência de produção de metal-beta-lactamases em amostras de pseudomonas aeruginosa isoladas na cidade de Aracaju, SE

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Costa, Lívia Maria do Amorim
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/27150
Resumo: Pseudomonas aeruginosa é a espécie de maior importância clínica entre os bacilos Gram negativos não-fermentadores. Esses micro-organismos são importantes agentes de infecções relacionadas com o cuidado em saúde. Uma característica marcante das infecções causadas por P. aeruginosa, especialmente naquelas adquiridas por pacientes internados em Unidades de Tratamento Intensivo, é a multirresistência. P. aeruginosa possui mecanismos intrínsecos de resistência frente a diferentes antimicrobianos, como a maioria dos -lactâmicos, tetraciclinas, cloranfenicol, quinolonas e aminoglicosídeos, devido à combinação da baixa permeabilidade da sua membrana externa com a presença de sistemas de bomba de efluxo. Além disso, esses micro-organismos têm adquirido mecanismos de resistência, como a produção de metalo-beta-lactamases, com atividade contra os carbapenêmicos, restringindo ainda mais as opções terapêuticas para o tratamento de infecções graves causadas por essas bactérias. No presente trabalho, foram estudadas 95 amostras de P. aeruginosa isoladas em três instituições de saúde de Aracaju e identificadas através do sistema automatizado Vitek 2. Os objetivos foram: avaliar os perfis de susceptibilidade de amostras de P. aeruginosa isoladas no município de Aracaju, SE; detectar fenotipicamente a produção de metalo-β-lactamases entre as amostras resistentes a ceftazidima; caracterizar o genótipo de resistência das amostras resistentes a ceftazidima; avaliar a diversidade genética das amostras resistentes a ceftazidima. O sítio de isolamento mais freqüente foi o trato respiratório inferior (25,3%, 24/95). Em relação ao setor de isolamento, a maioria das amostras avaliadas (62,1%, 59/95) foi oriunda de pacientes admitidos em Unidades de Tratamento Intensivo. A análise dos perfis de susceptibilidade mostrou um percentual alto de resistência em relação à ceftazidima (51,6%, 49/95) e taxas moderadas em relação aos carbapenêmicos testados (imipenem: 23,2%, 22/95; meropenem: 20%, 19/95). A menor taxa de resistência observada foi frente à amicacina (16,8%, 16/95). Os testes de disco-aproximação para investigação da produção de metalo-β-lactamases entre as amostras resistentes a ceftazidima revelaram que 28,6% das amostras (14/49) foram positivas. Os testes de disco combinado confirmaram os resultados obtidos pelo método de disco-aproximação (13/49) e revelaram mais três amostras, totalizando 35,6% (17/49) amostras metalo-β-lactamase positivas. De acordo com os resultados obtidos na PCR, duas amostras (4,1%) entre aquelas resistentes a ceftazidima possuíam o gene blaSPM-1. Nenhuma amostra apresentou os determinantes genéticos blaIMP-1, blaVIM-2, blaGIM-1. A técnica de PFGE, realizada em 49 amostras resistentes a ceftazidima, revelou a ocorrência de uma elevada diversidade genética (37 pulsotipos). Também foi observada a presença de nove grupos clonais, compostos por duas ou três amostras cada, sendo que as amostras SPM-1 positivas foram geneticamente relacionadas entre si e com o clone São Paulo epidêmico no nosso meio. Os resultados sugerem que a produção de metalo-beta-lactamases não seria o principal mecanismo de resistência à ceftazidima e/ou aos carbapenêmicos entre as amostras estudadas. A ocorrência de grupos clonais compreendendo amostras isoladas em diferentes instituições de saúde e diferentes setores dentro da mesma instituição sugere a disseminação inter e intra-hospitalar durante o período estudado.
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P. aeruginosa possui mecanismos intrínsecos de resistência frente a diferentes antimicrobianos, como a maioria dos -lactâmicos, tetraciclinas, cloranfenicol, quinolonas e aminoglicosídeos, devido à combinação da baixa permeabilidade da sua membrana externa com a presença de sistemas de bomba de efluxo. Além disso, esses micro-organismos têm adquirido mecanismos de resistência, como a produção de metalo-beta-lactamases, com atividade contra os carbapenêmicos, restringindo ainda mais as opções terapêuticas para o tratamento de infecções graves causadas por essas bactérias. No presente trabalho, foram estudadas 95 amostras de P. aeruginosa isoladas em três instituições de saúde de Aracaju e identificadas através do sistema automatizado Vitek 2. Os objetivos foram: avaliar os perfis de susceptibilidade de amostras de P. aeruginosa isoladas no município de Aracaju, SE; detectar fenotipicamente a produção de metalo-β-lactamases entre as amostras resistentes a ceftazidima; caracterizar o genótipo de resistência das amostras resistentes a ceftazidima; avaliar a diversidade genética das amostras resistentes a ceftazidima. O sítio de isolamento mais freqüente foi o trato respiratório inferior (25,3%, 24/95). Em relação ao setor de isolamento, a maioria das amostras avaliadas (62,1%, 59/95) foi oriunda de pacientes admitidos em Unidades de Tratamento Intensivo. A análise dos perfis de susceptibilidade mostrou um percentual alto de resistência em relação à ceftazidima (51,6%, 49/95) e taxas moderadas em relação aos carbapenêmicos testados (imipenem: 23,2%, 22/95; meropenem: 20%, 19/95). A menor taxa de resistência observada foi frente à amicacina (16,8%, 16/95). 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Os resultados sugerem que a produção de metalo-beta-lactamases não seria o principal mecanismo de resistência à ceftazidima e/ou aos carbapenêmicos entre as amostras estudadas. A ocorrência de grupos clonais compreendendo amostras isoladas em diferentes instituições de saúde e diferentes setores dentro da mesma instituição sugere a disseminação inter e intra-hospitalar durante o período estudado.Pseudomonas aeruginosa is the species of greatest clinical relevance among Gram negative non-fermenters bacilli. These organisms are important agents of healthcare- associated infections. One striking feature of infections caused by P. aeruginosa, especially those acquired by patients hospitalized in Intensive Care Units, is the multidrug resistance having intrinsic mechanisms of resistance against different antibiotics, as most β-lactams, tetracyclines, chloramphenicol, quinolones, aminoglycosides, due to the combination of low permeability of its outer membrane with the presence of efflux pump systems. In addition, these organisms have acquired resistance mechanisms such as production of metallo-beta-lactamase (MβL), β-lactamases of Ambler class B, with activity against carbapenems, further restricting the therapeutic options for treating serious infections caused by these microorganisms. In this work we studied 95 strains of P. aeruginosa isolated from three health institutions of Aracaju and identified through the Vitek 2 automated system. The objectives of the study were to evaluate the susceptibility profiles of strains of P. aeruginosa isolated in the city of Aracaju, SE; detect phenotypically the production of metallo-beta-lactamase between strains resistant to ceftazidime; characterize the genotype resistance of strains resistant to ceftazidime; assess the genetic diversity of ceftazidime resistant strains. The most common site of isolation was lower respiratory tract (25.3%, 24/95). Most of the strains (62.1%, 59/95) were isolated from patients admitted to Intensive Care Units and the percentages of resistance among the isolates in this sector were higher. The analysis of the susceptibility profiles showed a high percentage of resistance to ceftazidime (51.6%, 49/95) and moderate rates in relation to the tested carbapenems (imipenem 23.2%, 22/95; meropenem: 20% , 19/95). The lower rate of resistance was observed against amikacin (16.8%, 16/95). The disk-approximation tests to investigate the production of metallo-beta-lactamase between strains resistant to ceftazidime revealed that 28,6% of the samples (13/49) were metallo-beta-lactamase positive. The combined disk tests confirmed the results obtained by disk-approximation (14/49) and three strains revealed a total of 35.6% (17/49) positive strains MβL. According to the results obtained in PCR, two strains carried the gene blaSPM-1. No strain showed the genetic determinants, blaIMP-1, blaVIM-2, blaGIM-1. The PFGE method, performed on 49 ceftazidime resistant strains, revealed the occurrence of a high genetic diversity (37 pulsotipes). It was also observed the presence of nine clonal groups, consisting of two or three strains each, and the SPM-1 positive strains were genetically related to each other and with the epidemic clone São Paulo in our midst. The results suggest that the production of metallo-beta-lactamase was not the main mechanism of resistance to ceftazidime and/or carbapenems between the studied strains. The occurrence of clonal groups comprising strains isolated in different health care institutions and different sectors within the same institution suggests the spread inter-and intra-hospital during the study period66 f.Mondino, Silvia Susana Bona dehttp://lattes.cnpq.br/3689131019686786Souza, Cláudia Rezende Vieira Mendonça dehttp://lattes.cnpq.br/9742270645420446Alves, Fábio Aguiarhttp://lattes.cnpq.br/7912841775695894Kegele, Fabíola Cristina de OLiveirahttp://lattes.cnpq.br/2885874465136577Pellegrino, Flávia Lúcia Piffano Costahttp://lattes.cnpq.br/3356811239031225http://lattes.cnpq.br/6351032357425475Costa, Lívia Maria do Amorim2022-12-02T12:40:57Z2022-12-02T12:40:57Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfCOSTA, Lívia Maria do Amorim. Investigação fenotípica e genotípica da ocorrência de produção de metal-beta-lactamases em amostras de pseudomonas aeruginosa isoladas na cidade de Aracaju, SE. 2011. 66 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Programa de Pós-Graduação em Patologia, Faculdade de Medicina, Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2011.http://app.uff.br/riuff/handle/1/27150CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2022-12-02T12:41:01Zoai:app.uff.br:1/27150Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202022-12-02T12:41:01Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false
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description Pseudomonas aeruginosa é a espécie de maior importância clínica entre os bacilos Gram negativos não-fermentadores. Esses micro-organismos são importantes agentes de infecções relacionadas com o cuidado em saúde. Uma característica marcante das infecções causadas por P. aeruginosa, especialmente naquelas adquiridas por pacientes internados em Unidades de Tratamento Intensivo, é a multirresistência. P. aeruginosa possui mecanismos intrínsecos de resistência frente a diferentes antimicrobianos, como a maioria dos -lactâmicos, tetraciclinas, cloranfenicol, quinolonas e aminoglicosídeos, devido à combinação da baixa permeabilidade da sua membrana externa com a presença de sistemas de bomba de efluxo. Além disso, esses micro-organismos têm adquirido mecanismos de resistência, como a produção de metalo-beta-lactamases, com atividade contra os carbapenêmicos, restringindo ainda mais as opções terapêuticas para o tratamento de infecções graves causadas por essas bactérias. No presente trabalho, foram estudadas 95 amostras de P. aeruginosa isoladas em três instituições de saúde de Aracaju e identificadas através do sistema automatizado Vitek 2. Os objetivos foram: avaliar os perfis de susceptibilidade de amostras de P. aeruginosa isoladas no município de Aracaju, SE; detectar fenotipicamente a produção de metalo-β-lactamases entre as amostras resistentes a ceftazidima; caracterizar o genótipo de resistência das amostras resistentes a ceftazidima; avaliar a diversidade genética das amostras resistentes a ceftazidima. O sítio de isolamento mais freqüente foi o trato respiratório inferior (25,3%, 24/95). Em relação ao setor de isolamento, a maioria das amostras avaliadas (62,1%, 59/95) foi oriunda de pacientes admitidos em Unidades de Tratamento Intensivo. A análise dos perfis de susceptibilidade mostrou um percentual alto de resistência em relação à ceftazidima (51,6%, 49/95) e taxas moderadas em relação aos carbapenêmicos testados (imipenem: 23,2%, 22/95; meropenem: 20%, 19/95). A menor taxa de resistência observada foi frente à amicacina (16,8%, 16/95). Os testes de disco-aproximação para investigação da produção de metalo-β-lactamases entre as amostras resistentes a ceftazidima revelaram que 28,6% das amostras (14/49) foram positivas. Os testes de disco combinado confirmaram os resultados obtidos pelo método de disco-aproximação (13/49) e revelaram mais três amostras, totalizando 35,6% (17/49) amostras metalo-β-lactamase positivas. De acordo com os resultados obtidos na PCR, duas amostras (4,1%) entre aquelas resistentes a ceftazidima possuíam o gene blaSPM-1. Nenhuma amostra apresentou os determinantes genéticos blaIMP-1, blaVIM-2, blaGIM-1. A técnica de PFGE, realizada em 49 amostras resistentes a ceftazidima, revelou a ocorrência de uma elevada diversidade genética (37 pulsotipos). Também foi observada a presença de nove grupos clonais, compostos por duas ou três amostras cada, sendo que as amostras SPM-1 positivas foram geneticamente relacionadas entre si e com o clone São Paulo epidêmico no nosso meio. Os resultados sugerem que a produção de metalo-beta-lactamases não seria o principal mecanismo de resistência à ceftazidima e/ou aos carbapenêmicos entre as amostras estudadas. A ocorrência de grupos clonais compreendendo amostras isoladas em diferentes instituições de saúde e diferentes setores dentro da mesma instituição sugere a disseminação inter e intra-hospitalar durante o período estudado.
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