Proteína anticongelante (AFP) na criopreservação de sêmen e embriões ovinos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Correia, Lucas Francisco Leodido
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/26673
http://dx.doi.org/10.22409/MPV-CV.2022.d.15154286723
Resumo: A criopreservação de sêmen e embriões é fundamental para a disseminação de material genético de animais de elevado mérito. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da adição de proteína anticongelante (AFP) na solução de congelamento de sêmen e de embriões produzidos in vivo. O primeiro estudo compondo esta tese foi focado em uma revisão sistemática sobre os efeitos da AFP em células e tecidos reprodutivos. Posteriormente, a fim de definir o melhor tipo e concentração de AFP para criopreservação de sêmen, foram formados cinco grupos, com adição de: 0,1 ou 0,5 µg/mL de AFP I ou AFP III, e um grupo controle sem adição. O uso de AFP tipo I promoveu efeito benéfico na proteção celular de espermatozoides, com maiores porcentagens de cinética espermática, integridade de membrana plasmática e morfologia espermática. Em um terceiro estudo, com o intuito de utilizar a AFP para melhorar a criotolerância de ejaculados de baixa congelabilidade, ejaculados de 10 carneiros foram criopreservados com 0,1 µg/mL de AFP I ou não (controle). No qual, a adição AFP I no diluidor de sêmen promoveu efeito benéfico na motilidade total, integridade de membrana plasmática, congelabilidade e capacidade fecundante após a criopreservação. No quarto estudo, a produção de embriões in vivo foi realizada em 37 ovelhas e os embriões coletados classificados quanto à sua qualidade. Os embriões de boa qualidade (GI e GII; n = 135) foram divididos em três grupos e submetidos a congelamento lento com a adição de 0 (controle), 0,1 ou 0,5 µg/mL de AFP I. A adição de AFP I na solução de congelamento lento não afetou a sobrevivência embrionária, e promoveu maior atividade mitocondrial após 24 h de cultivo in vitro. Além disso, a concentração de 0,1 µg/mL de AFP I resultou no menor nível de espécies reativas de oxigênio em 24 h de cultivo, sugerindo uma maior capacidade de produção de energia nos embriões deste grupo.
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O uso de AFP tipo I promoveu efeito benéfico na proteção celular de espermatozoides, com maiores porcentagens de cinética espermática, integridade de membrana plasmática e morfologia espermática. Em um terceiro estudo, com o intuito de utilizar a AFP para melhorar a criotolerância de ejaculados de baixa congelabilidade, ejaculados de 10 carneiros foram criopreservados com 0,1 µg/mL de AFP I ou não (controle). No qual, a adição AFP I no diluidor de sêmen promoveu efeito benéfico na motilidade total, integridade de membrana plasmática, congelabilidade e capacidade fecundante após a criopreservação. No quarto estudo, a produção de embriões in vivo foi realizada em 37 ovelhas e os embriões coletados classificados quanto à sua qualidade. Os embriões de boa qualidade (GI e GII; n = 135) foram divididos em três grupos e submetidos a congelamento lento com a adição de 0 (controle), 0,1 ou 0,5 µg/mL de AFP I. A adição de AFP I na solução de congelamento lento não afetou a sobrevivência embrionária, e promoveu maior atividade mitocondrial após 24 h de cultivo in vitro. Além disso, a concentração de 0,1 µg/mL de AFP I resultou no menor nível de espécies reativas de oxigênio em 24 h de cultivo, sugerindo uma maior capacidade de produção de energia nos embriões deste grupo.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de JaneiroThe cryopreservation of semen and embryos are essential for genetic material dissemination of high merit animals. The aim of this study was to evaluate the effect of adding antifreeze protein (AFP) into the slow-freezing solution of semen and in in vivo-derived sheep embryos. The first study comprising this thesis focused on a systematic review of the effects of AFP on reproductive cells and tissues. Subsequently, to define the best type and concentration of AFP for semen cryopreservation, five groups were formed, with the addition of 0.1 or 0.5 µg/mL of AFP I or AFP III, and a control group without addition. The use of type I AFP promoted a beneficial effect on sperm cell protection, with higher percentages of sperm kinetics, plasma membrane integrity and sperm morphology. In a third study, aiming to use AFP I to improve the cryotolerance of low-freezability ejaculates, ejaculates from 10 rams were cryopreserved with 0.1 µg/mL AFP I or not (control). In which, the addition of AFP I in the semen extender promoted a beneficial effect on total motility, plasma membrane integrity, freezability and fertilizing capacity after cryopreservation. In the fourth study, superovulation in 37 sheep and transcervical embryo collection were performed to obtain in vivo-derived embryo to cryopreservation. Good quality embryos (GI and GII; n = 135) were divided into three groups and subjected to slow freezing with the addition of 0 (control), 0.1 or 0.5 µg/mL of AFP I. The AFP I in slow freezing solution did not affect embryonic survival, and promoted higher mitochondrial activity after 24 h of in vitro culture. Furthermore, the concentration of 0.1 µg/mL of AFP I resulted in the lowest level of reactive oxygen species in 24 h of in vitro culture, suggesting a greater energy production capacity in the embryos of this group.268 f.Fabjan, Joanna Maria Gonçalves de Souzahttp://lattes.cnpq.br/0752418539162223Batista, Ribrio Ivan Tavares Pereirahttp://lattes.cnpq.br/1434409628176942Siqueira, Luiz Gustavo Brunohttp://lattes.cnpq.br/6075552707625018Celeghini, Eneiva Carla Carvalhohttp://lattes.cnpq.br/9718361385144600Ferraz, Marcia de Almeida Monteiro Melohttp://lattes.cnpq.br/5204846013100417Varela Junior, Antonio Sergiohttp://lattes.cnpq.br/8041711996066835http://lattes.cnpq.br/4716034480780284Correia, Lucas Francisco Leodido2022-10-26T17:27:13Z2022-10-26T17:27:13Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfCORREIA, Lucas Francisco Leodido. Proteína anticongelante (AFP) na criopreservação de sêmen e embriões ovinos. 2022. 268 f. 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