Otimização de protocolo de extração de DNA genômico para acácia-negra

• Autor(a) principal: Maximo, Yasmin Imparato
• Data de Publicação: 2020
• Outros Autores: Ikeda, Angela Cristina, Flôres Júnior, Paulo César, Alcantara, Giovana Bomfim de, Higa, Antonio
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: eng
• Título da fonte: Agrarian (Dourados. Online)
• Texto Completo: https://ojs.ufgd.edu.br/index.php/agrarian/article/view/9190
• topic: Acacia mearnsii. Ácidos nucleicos. CTAB. RNase.; Acacia mearnsii. CTAB. Nucleic acids. RNAse.

Considerando-se que a atual tendência do melhoramento florestal é a integração das técnicas clássicas com as de análise genética molecular, faz-se necessária a obtenção de protocolos de extração de DNA genômico ajustados a cada espécie estudada. O objetivo do trabalho foi determinar o efeito de diferentes adaptações no protocolo de extração de DNA genômico CTAB para acácia-negra. Foram testados diferentes componentes na fase de extração orgânica: clorofórmio, fenol e proteinase K, além da aplicação de RNase após a fase de precipitação e limpeza do DNA. Também, foi investigada a eficiência destes tratamentos em amostras de folíolos frescas ou armazenadas em baixa temperatura durante sete dias. Foi verificada a presença de DNA de todas as amostras submetidas à extração pelo protocolo de CTAB com os diferentes tratamentos. O tempo de armazenamento das amostras não influenciou na integridade do DNA, entretanto, foi possível observar que a adição de RNase melhorou a qualidade do DNA extraído. Deste modo, sugere-se a utilização do protocolo CTAB com uso de clorofórmio e RNase, com amostras frescas ou armazenadas em baixas temperaturas.