Potencial de inibidores serinicos em folhas de Croton urucurana (Malpighiales, Euphorbiaceae) para o controle de Spodoptera frugiperda (Lepidoptera, Noctuidae)

• Autor(a) principal: Flores, Taylla Michelle de Oliveira
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFGD
• Texto Completo: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/3255
• topic: Spodoptera frugiperda; Zea mays; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Inibidor da proteinase; Reação de defesa das plantas; Proteinase inhibitors; Plant defense reactions

A cultura do milho tem grande destaque econômico no agronegócio brasileiro, porém a sua produtividade é considerada baixa quando comparada a alguns países desenvolvidos. Um dos principais fatores que impedem números mais expressivos na colheita é a grande incidência de pragas na lavoura, sobretudo da lagarta-do-cartucho (Spodoptera frugiperda, Lepidoptera, Noctuidae). Os mecanismos adaptativos dessa praga polífaga garantem sua aquisição de resistência a diversos compostos químicos após poucas gerações, tornando-a de difícil controle. Uma tendência das últimas décadas vem sendo a prospecção de moléculas naturais no controle de pragas, sobretudo os de origem proteica que constitutivamente participam dos mecanismos de defesa das plantas. Nesse sentido, diversas pesquisas com inibidores de peptidases (IPs) vêm ganhando destaque graças ao seu potencial inseticida, reduzindo a disponibilidade de aminoácidos essenciais ao desenvolvimento das larvas, levando à morte. Neste trabalho, foram utilizados extratos proteicos de folhas de Croton urucurana, tradicionalmente conhecido por suas propriedades medicinais, é uma planta típica do Cerrado Brasileiro, bioma considerado hotspot de biodiversidade onde as plantas desenvolveram mecanismos de adaptação e resistência. Os extratos foram preparados em tampão Tris-HCl 50mM pH 8 e em tampão ácido (HCl 1000mM), e os extratos em Tris foram submetidos à precipitação proteica com sulfato de amônio (NH4)2SO4 nas saturações 0-30% denominado de F1, 30-60% denominado de F2 e 60-100% denominado de F3. A análise do perfil proteico foi realizada por eletroforese SDS-Page 12 %, e a determinação de proteínas totais dos extratos e dos precipitados F1, F2 e F3 foram realizadas pela metodologia de Bradford. Um ensaio enzimático preliminar foi realizado utilizando-se o substrato inespecífico Azocaseína (1%) e Tripsina Bovina. Ao constatar maior atividade antitríptica do precipitado F2, este fora então submetido ao ensaio com substrato específico BApNA (1,25mM) em Tripsina Bovina. Ao constatar significativa atividade inibitória, deu-se prosseguimento ao ensaio com substrato BApNA em Homogenato intestinal da lagarta S. frugiperda que apresentou atividade inibitória de 80% quando utilizados 2,7 μg.mL-1 do extrato. Apesar de serem necessárias novas etapas envolvendo o fracionamento e purificação do IP, os resultados obtidos constatou o potencial inseticida da planta e apontam para a possibilidade de um produto biotecnológico destinado ao controle de lepidóptera.