Atividade antimicrobiana e antibiofilme dos extratos das folhas de Cochlospermum regium (Schrank) Pilger frente à Staphylococcus aureus resistente à meticilina

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Fernanda de Oliveira Galvão
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFGD
Texto Completo: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/4953
Resumo: Staphylococcus aureus é um patógeno oportunista causador de uma variedade de infecções. O desenvolvimento de bactérias resistentes, como S. aureus resistente a meticilina (MRSA) está associado com altas taxas de mortalidade, e tem sido um grande problema de saúde pública. No passado, MRSA era considerado um patógeno exclusivo do ambiente hospitalar, e estes foram descritos como MRSA associado à assistência hospitalar (HA MRSA), porém nas últimas décadas esse quadro tem mudado com o surgimento de MRSA em pacientes sem história de hospitalização, conhecidas como MRSA associado à comunidade (CA-MRSA). Aliado a isto, S. aureus é capaz de se aderir a diversas superfícies e formar biofilme, tornando as células mais protegidas. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana e antibiofilme dos extratos aquoso e etanólico das folhas de Cochlospermum regium frente a isolados clínicos HA-MRSA e CA-MRSA, e a cepa de referência S. aureus suscetível a meticilina (MSSA) ATCC 25923. A atividade antibacteriana foi avaliada pela técnica de microdiluição em caldo e as concentrações inibitória e bactericida mínimas foram determinadas após o tratamento, as células viáveis foram quantificadas. A inibição enzimática foi determinada utilizando os testes da DNase e coagulase. A atividade na formação de biofilme e em biofilme pré-formado foi determinada em microplacas de poliestireno e as células viáveis foram quantificadas após o tratamento. A quantificação de carboidratos e proteínas na matriz do biofilme foi medida por meio de um espectrofotômetro NanoDrop. Os dois extratos apresentaram atividade antibacteriana nas concentrações de 125 a 500 µg/mL frente todas as cepas avaliadas, sendo o aquoso mais eficaz. Também apresentaram atividade bactericida frente todas as cepas testadas. CA-MRSA mostrou-se mais sensível aos extratos que HA-MRSA. A atividade inibitória dos extratos de C. regium na formação de biofilme e em biofilme maduro também foi observada, e na concentração de 2.000 µg/mL, o extrato aquoso inibiu 100% a formação do biofilme de todas as bactérias testadas. A coagulase foi reduzida nas concentrações sub-cim dos extratos. Os resultados obtidos indicam que os extratos das folhas de C. regium podem ser considerados fontes promissoras de novos fármacos para prevenir e combater infecções causadas por S. aureus.
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O desenvolvimento de bactérias resistentes, como S. aureus resistente a meticilina (MRSA) está associado com altas taxas de mortalidade, e tem sido um grande problema de saúde pública. No passado, MRSA era considerado um patógeno exclusivo do ambiente hospitalar, e estes foram descritos como MRSA associado à assistência hospitalar (HA MRSA), porém nas últimas décadas esse quadro tem mudado com o surgimento de MRSA em pacientes sem história de hospitalização, conhecidas como MRSA associado à comunidade (CA-MRSA). Aliado a isto, S. aureus é capaz de se aderir a diversas superfícies e formar biofilme, tornando as células mais protegidas. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana e antibiofilme dos extratos aquoso e etanólico das folhas de Cochlospermum regium frente a isolados clínicos HA-MRSA e CA-MRSA, e a cepa de referência S. aureus suscetível a meticilina (MSSA) ATCC 25923. A atividade antibacteriana foi avaliada pela técnica de microdiluição em caldo e as concentrações inibitória e bactericida mínimas foram determinadas após o tratamento, as células viáveis foram quantificadas. A inibição enzimática foi determinada utilizando os testes da DNase e coagulase. A atividade na formação de biofilme e em biofilme pré-formado foi determinada em microplacas de poliestireno e as células viáveis foram quantificadas após o tratamento. A quantificação de carboidratos e proteínas na matriz do biofilme foi medida por meio de um espectrofotômetro NanoDrop. Os dois extratos apresentaram atividade antibacteriana nas concentrações de 125 a 500 µg/mL frente todas as cepas avaliadas, sendo o aquoso mais eficaz. Também apresentaram atividade bactericida frente todas as cepas testadas. CA-MRSA mostrou-se mais sensível aos extratos que HA-MRSA. A atividade inibitória dos extratos de C. regium na formação de biofilme e em biofilme maduro também foi observada, e na concentração de 2.000 µg/mL, o extrato aquoso inibiu 100% a formação do biofilme de todas as bactérias testadas. A coagulase foi reduzida nas concentrações sub-cim dos extratos. Os resultados obtidos indicam que os extratos das folhas de C. regium podem ser considerados fontes promissoras de novos fármacos para prevenir e combater infecções causadas por S. aureus.Staphylococcus aureus is an opportunistic pathogen that causes a variety of infections. The development of resistant bacteria such as methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is associated with high mortality rates, and has been a major public health concern. In the past, MRSA was considered a pathogen unique to the hospital environment, and they were described as MRSA associated with hospital care (HA-MRSA), but in the last decades this has changed with the appearance of MRSA in patients with no history of hospitalization, known as community-associated MRSA (CA-MRSA). Allied to this, S. aureus is able to adhere to several surfaces and form biofilm, making the cells more protected. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity and antibiofilm activity of the aqueous and ethanolic extracts of Cochlospermum regium leaves against clinical isolates HA-MRSA and CA-MRSA and the reference strain Methicillin-sensitive S. aureus (MSSA) ATCC 25923. The antibacterial activity was evaluated by broth microdilution technique and minimal inhibitory and bactericidal concentrations were determined after treatment, viable cells were quantified. Enzyme inhibition was determined using the DNase and coagulase tests. The activity in biofilm formation and pre-formed biofilm was determined on polystyrene microplates and viable cells were quantified after treatment. The quantification of carbohydrates and proteins in the biofilm matrix was measured by means of a NanoDrop spectrophotometer. Both extracts showed antibacterial activity in the concentrations of 125 to 500 μg/mL against all strains evaluated, with the aqueous one being more effective. They also presented bactericidal activity against all strains tested. CA-MRSA was more sensitive to extracts than HA-MRSA. The inhibitory activity of C. regium extracts on biofilm formation and mature biofilm was also observed, and at concentration of 2,000 μg/mL, the aqueous extract inhibited 100% the biofilm formation of all the bacteria tested. Coagulase was reduced at the sub-mic concentrations of the extracts. The results indicate that extracts of C. regium can be considered as promising sources of new drugs to prevent and fight infections caused by S. aureus.Submitted by Marcos Pimentel (marcospimentel@ufgd.edu.br) on 2022-05-24T21:07:47Z No. of bitstreams: 1 FernandadeOliveiraGalvãoSantos.pdf: 1660906 bytes, checksum: 805e1e4abf1d558ad0f1ce4f98f350ea (MD5)Made available in DSpace on 2022-05-24T21:07:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandadeOliveiraGalvãoSantos.pdf: 1660906 bytes, checksum: 805e1e4abf1d558ad0f1ce4f98f350ea (MD5) Previous issue date: 2018-09-05Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)porUniversidade Federal da Grande DouradosPrograma de pós-graduação em Ciências da SaúdeUFGDBrasilFaculdade de Ciências da SaúdeCNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA::CLINICA MEDICA::DOENCAS INFECCIOSAS E PARASITARIASResistência a AntibióticosInfecção hospitalarPlantas medicinaisAntibiotic resistanceCross infectionPlants medicinalAtividade antimicrobiana e antibiofilme dos extratos das folhas de Cochlospermum regium (Schrank) Pilger frente à Staphylococcus aureus resistente à meticilinainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFGDinstname:Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD)instacron:UFGDTEXTFernandadeOliveiraGalvãoSantos.pdf.txtFernandadeOliveiraGalvãoSantos.pdf.txtExtracted texttext/plain101261https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/4953/3/FernandadeOliveiraGalv%c3%a3oSantos.pdf.txt75d8eab960749977ec9019834c14a8c1MD53LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/4953/2/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD52ORIGINALFernandadeOliveiraGalvãoSantos.pdfFernandadeOliveiraGalvãoSantos.pdfapplication/pdf1660906https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/bitstream/prefix/4953/1/FernandadeOliveiraGalv%c3%a3oSantos.pdf805e1e4abf1d558ad0f1ce4f98f350eaMD51prefix/49532023-09-14 03:05:27.176oai:https://repositorio.ufgd.edu.br/jspui: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ório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufgd.edu.br/jspui:8080/oai/requestopendoar:21162023-09-14T07:05:27Repositório Institucional da UFGD - Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD)false
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