Produção de polipeptídeo recombinante para utilizacão no diagnóstico sorológico da hanseníase

• Autor(a) principal: Barbosa, Marcelo dos Santos
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFGD
• Texto Completo: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/1323
• topic: Mycobacterium leprae; CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA::CLINICA MEDICA::DOENCAS INFECCIOSAS E PARASITARIAS; Hanseníase; Leprosy

A hanseníase também conhecida como lepra ou doença de Hansen é causada pelo bacilo álcool ácido resistente Mycobacterium leprae, é endêmica em várias partes do mundo, afetando milhares de pessoas em diversos países. Existe uma classificação operacional estabelecida pela OMS para fins de tratamento, na qual a doença é dividida em paucibacilar e multibacilar. O tratamento que é baseado na poliquimioterapia de longa duração, é estipulado de acordo com esta classificação. O diagnóstico para hanseníase é baseado na avaliação clínica, tendo em vista que os testes existentes não são confiáveis e normalmente incapazes de detectar os indivíduos do polo paucibacilar da doença. Um método diagnóstico confiável é imprescindível para um melhor controle e diminuição dos índices epidemiológicos da doença. O objetivo deste trabalho foi produzir e purificar um polipeptídio recombinante de M. leprae que demonstre in sílico capacidade de detecção da hanseníase. O gene codificador de um polipeptídeo sintético (MLP15) contendo 15 peptídeos de M. leprae foi desenhado utilizando o software Vector-NTI e sintetizado pela empresa Epoch Biolab Company®. Análises in sílico avaliando os parâmetros físico-químicos, estrutura secundária e terciária, além da capacidade de detecção por MHC de classes I e II foram realizadas. O MLP-15 foi clonado e expresso em E. coli utilizando a cepa BL21 RP e purificado com coluna de afinidade Ni-NTA em quantidade suficiente para ser utilizado em testes de diagnóstico. Todos os parâmetros avaliados in sílico indicaram que o MLP-15 possui potencial para ser utilizado em testes sorológicos para a detecção se pacientes com hanseníase.