Caracterização química e espectroscópica de polissacarídeos sulfatados extraídos de Spirulina sp.

• Autor(a) principal: Leite, Camila Malafaia
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFJF
• Texto Completo: https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/10313
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA; Spirulina sp; Polissacarídeos sulfatados; Análises químicas e espectroscópicas; Antioxidante; Spirulina sp; Sulphated polysaccharides,; Chemical and spectroscopic analyzes; Antioxidant

Spirulina sp são microalgas do grupo das cianobactérias ricas em compostos com atividade biológica, sendo a antiviral, antioxidante e anticoagulante já atribuídas aos polissacarídeos sulfatados presentes nessas microalgas. No entanto, a relação entre estrutura e atividade biológica dos polissacarídeos sulfatados ainda não está claramente estabelecida. No presente trabalho, polissacarídeos sulfatados da biomassa comercial Spirulina sp foram extraídos, caracterizados e analisados quanto as atividades anticoagulante e antioxidante in vitro. A biomassa foi submetida a diferentes condições de extração de polissacarídeos, os quais foram analisados por eletroforese em gel de agarose 0,5% em tampão 1,3-diaminopropano acetato (PDA) 0,05M, pH 9,0, dosagens de proteína, açúcar total, ácido urônico, teor sulfato e compostos fenólicos. Posteriormente, frações de polissacarídeos sulfatados foram submetidas a cromatografia em papel, de troca iônica e gel filtração, a eletroforese em gel agarose 1,0 % em tampão tris-borato-EDTA (TBE), pH 8,3, Fluorophore Assisted Carbohydrate Electrophoresis (FACE), a β-eliminação e dessulfatação. Além disso, foi realizado espectroscopia de Raman, IV e RMN 13C em estado sólido e análise da atividade anticoagulante pelo método da USP e atividade antioxidante pelo sequestro do radical DPPH e sistema β-caroteno/ácido linoléico. Os rendimentos de açúcar total dos polissacarídeos variaram de 2,27% a 20,23%, sendo a fração DPB, obtida do processo de lise celular e proteólise com papaína, aquela com um dos melhores rendimentos e metacromasia mais intensa na eletroforese em gel de agarose 0,5% em tampão PDA, característica da presença de polissacarídeos sulfatados. Dessa forma, esta fração foi escolhida para dar sequencia ao trabalho. A análise da composição química revelou a presença de sulfato, ramnose, ácido glicurônico e galactose, sendo a glicose o monossacarídeo majoritário. Além desses, sugere-se a presença do ácido aldobiurônico na estrutura dos polissacarídeos sulfatados. O peso molecular estimado para esses polissacarídeos foi próximo a 130 e 40 kDa. Quando realizado o processo de despigmentação, fração DPBdespig, observou-se que a composição química e peso molecular mantiveram-se semelhantes a fração DPB assim como as frações DPB 2,0M e DPB 3,0M, obtidas após cromatografia de troca iônica. Porém DPB 3,0M mostrou maior teor de sulfato. Ao analisar o produto das frações DPB e DPBdesp submetidos a β-eliminação foi observado um peso molecular estimado único, próximo a 100KDa. A análise espectroscópica revelou bandas características de polissacarídeos sulfatados em todas frações analisadas, mas a fração DPB 3,0M apresentou bandas espectroscópicas atribuídas a grupos sulfato intensas e bem definidas enquanto, as frações submetidas a dessulfatação não. Nenhuma fração analisada apresentou atividade anticoagulante pelo método utilizado. A fração DPB e DPB despig apresentaram boa atividade antioxidante, em torno de 45% no método de sequestro do DPPH e 55% no sistema β-caroteno/ácido linoleico. A cinética da atividade antioxidante sugeri que as frações atuem em mecanismos primários da oxidação. Essas mesmas frações quando submetidas a β-eliminação e dessulfatação tiveram suas atividade antioxidante reduzida. Os resultados apresentados sugerem que, o método de lise celular seguido por proteólise proporcionou o melhor rendimento de polissacarídeos sulfatados com atividade antioxidante de Spirulina sp, relacionada, possivelmente, a estrutura destes polissacarídeos.