Expressão gênica em embriões de Bos taurus e Bos indicus produzidos in vivo e in vitro

• Autor(a) principal: Viana, Sabine Wohlres
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFJF
• Texto Completo: https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/3965
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Blastocisto; mRNA; Cultivo in vitro; Bovinos; Raça; Blastocyst; mRNA; In vitro culture; Bovine; Breed

Embriões produzidos in vivo e in vitro apresentam diferenças morfológicas e de desenvolvimento as quais podem ser influenciadas pelo de cultivo. Além disso, existem poucos estudos mostrando o efeito do ambiente in vitro sobre os embriões provenientes de diferentes raças bovinas como, por exemplo, Gir (Bos indicus) e Holandesa (Bos taurus). Alguns genes importantes para a formação, sobrevivência e posterior desenvolvimento de embriões bovinos podem ter seu padrão de expressão influenciado por diversos fatores relacionados ao sistema de produção e a raça. O objetivo deste estudo foi avaliar a abundância relativa de transcritos relacionados ao transporte de água e solutos (Aquaporinas), formação da blastocele (Na/KATPases), apoptose (BAX) e resposta a estresse celular (Peroxiredoxina 1) em blastocistos bovinos das raças Gir e Holandesa produzidos in vivo e in vitro para identificar efeitos de sistema de produção e/ou raça. Para cada grupo (Gir-in vivo; Gir-in vitro; Holandês-in vivo; Holandês-in vitro), blastocistos (n=15) divididos em três conjuntos foram utilizados para a extração do RNA, amplificação, e transcrição reversa. Os cDNAs obtidos foram submetidos à PCR em Tempo-Real, utilizando o gene H2a como controle endógeno, e analisados pelo software REST©. Na avaliação de efeito do sistema de produção para a raça Gir, a expressão relativa do gene PRDX1 apresentou-se sub-regulada (p<0,01) assim como nos genes Na/KATPase-β2 e BAX (p<0,05), enquanto os genes AQP3, AQP11 e Na/K-ATPase-α1 não apresentaram diferenças significativas (p>0,05) nas amostras de embriões produzidos in vitro comparados com embriões in vivo. Na raça Holandesa, a expressão relativa do gene BAX apresentou-se sobre-regulada (p<0,01), enquanto o gene Na/K-ATPase-β2 apresentou uma tendência a sub-regulação (p=0,06) e os genes AQP3, AQP11, Na/K-ATPase-α1, PRDX1 não apresentaram diferenças significativas (p>0,05) nas amostras de embriões produzidos in vitro comparados com embriões in vivo. Quando a produção in vivo foi avaliada entre as raças, os embriões da raça Holandesa apresentaram os genes AQP3, Na/K-ATPase-α1, PRDX1, e BAX sub-regulados (p<0,05), enquanto os genes Na/K-ATPase-β2 e AQP11 não demonstraram diferenças significativas na expressão (p>0,05) quando comparados com embriões da raça Gir. Para a produção in vitro, apenas o gene BAX apresentou-se sobre-regulado (p<0,05) nos embriões da raça Holandesa quando comparados com embriões da raça Gir. Com base nestes resultados podese concluir que, para os genes avaliados, existem diferenças na expressão gênica inerentes às raças observadas nos embriões produzidos in vivo e que o sistema de produção in vitro pode influenciar a expressão gênica, atenuando estas variações. A avaliação de outros transcritos é necessária para uma melhor compreensão dos efeitos relacionados aos processos de produção de embriões bovinos em diferentes raças.