Avaliação do efeito anti-inflamatório e anti-proliferativo de Condroitim sulfato e/ou Glucosamina em células RAW 264.7, IEC-6 e Caco-2

• Autor(a) principal: Oliveira, Luiz Gustavo de
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFJF
• Texto Completo: https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/11167
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA; Anti-inflamatório; Condroitim sulfato; Glucosamina; RAW 264.7; Lipopolissacarídeo; NF-kB; Anti-inflammatory; Chondroitin sulfate; Glucosamine; RAW 264.7; Lipopolysaccharide; NF-kB

Condroitim sulfato (CS) e Glucosamina (GlcN) são atualmente indicados para o tratamento de doenças inflamatórias, como osteoartrite, por reduzir em condrócitos a ação do fator de transcrição nuclear NF-kB, atividade de metaloproteinases (MMP), interleucinas, óxido nítrico sintase induzível (iNOS) entre outros mediadores inflamatórios. O objetivo do presente trabalho, foi investigar os efeitos de CS, GlcN e CS/GlcN sobre modelo de inflamação agudo induzido por lipopolissacarídio (LPS) em linhagens celulares RAW 267.4, IEC-6 e Caco-2) bem como entender o mecanismo molecular deste efeito sobre essas linhagens celulares. CS, GlcN e CS/GlcN, foram caracterizados pordiferentes métodos, entre eles, eletroforese em gel de agarose e em gel de poliacrilamida, fluorophore-assisted carbohydrate electrophoresis (FACE), e 13C RMN. A atividade anti-inflamatória de CS e GlcN associados ou não foi avaliada pela produção de óxido nítrico (NO), atividade de metaloproteases (MMP-9 e -2), liberação de TNF-a, IL-6 e IL-1b por ELISA. Além do deslocamento nuclear do NF-kB por microscopia confocal de imunofluorescência e expressão de IL-1b e iNOS. As análises demonstraram que o CS utilizado nos testes é caracterizado por ser do tipo 4 sulfatado. CS, GlcN e CS/GlcN foram capazes de reduzir a expressão de iNOS e a produção de NO, além de reduzir os níveis de produção de TNF-a nos macrófagos RAW 264.7. Já CS/GlcN e GlcN reduziram a atividade de MMP-9, e a produção de IL-1b, mantendo uma maior expressão de proIL-1b. CS, GlcN e CS/GlcN também diminuiram o deslocamento nuclear do fator de transcrição NF-kB. Dessa forma, esses resultados indicam que CS e GlcN associados ou não apresentam uma atividade anti-inflamatória frente à macrófagos RAW 264.7. Com relação à resposta dos compostos estudados frente as células IEC-6 e Caco-2, não foi possível avaliar nas condições disponíveis, uma vez, que foi possível estimular um processo inflamatório nas mesmas.