Polissacarídeos sulfatados da alga Ulva lactuca L.: efeitos na modulação de fatores proinflamatórios em modelos experimentais e na translocação do Fator Nuclear NF - kB em RAW264.7

• Autor(a) principal: Silva, Natalia Kelmer da
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFJF
• Texto Completo: https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/14559
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA; Ulva lactuca L; Polissacarídeos sulfatados; Anti-inflamatório; Ulva lactuca L; Sulfate polysaccharides; Anti-inflammatory

Atualmente tem sido estudada a atividade biológica de diferentes espécies de algas. A espécie Ulva lactuca, conhecida popularmente como alface do mar, é rica em ulvanas, um polissacarídeo sulfatado que tem sido relacionado com diversas atividades biológicas. O objetivo do trabalho foi a extração de polissacarídeos sulfatados da alga verde U. lactuca L.e a avaliação da atividade anti-inflamatória desses polissacarídeos sulfatados em macrófagos estimulados com LPS. A alga seca foi triturada, delipidada e submetida a proteólise. O cru de polissacarídeos foi submetido a precipitação com quantidades crescentes de acetona, obtendose quatro frações denominadas U30, U50, U70 e U100. As frações foram caracterizadas pordosagem químicas, análise do peso molecular em gel de agarose, cromatografia em gel filtração, eletroforese de carboidratos por fluorófloro (FACE) para análise da composição monossacarídica e ressonância magnética nuclear (RMN). A capacidade de redução do MTT foi avaliada por meio do ensaio de MTT em cultura de macrófagos RAW 264.7. Com o intuito de investigar o potencial anti-inflamatório das frações foi avaliada em cultura celular de macrófagos RAW 264.7 e macrófagos peritoneais de camundongos C57BL/6 a produção de óxido nitríco, a atividade e a expressão das metaloproteinase 2 e 9 por zimografia e western blot, a produção das citocinas pró-inflamatórias TNF-a e IL-6 por ELISA, a translocação do fator nuclear kB, a biogênese de corpúsculos lipídicos e a peroxidação lipídica em macrófagos. As frações apresentaram conteúdo de açúcar entre 4,15 e 6,96 mg/mL; conteúdo de sulfato entre 2,50 e 3,40 mg/mL e urônicos entre 0,74 e 2,86 mg/mL. Não foram detectados fenólicos e proteínas. A avaliação da composição monossacarídica demonstrou a presença de raminose, glicose, galactose e ácidos urônicos. Pela análise do RMN, as frações são formadas pelo ácido ulvanobiurônico tipo A e B. As frações não alteraram a capacidade de macrófagos RAW 264.7 em reduzir o MTT. Nos ensaios antiinflamatórios, a fração U50 reduziu em 17% e 21% a produção de óxido nítrico nas concentrações 12,5 e 25 µg/mL, enquanto a fração U70 reduziu a produção de óxido nítrico em 58 e 70% nas concentrações 12,5 e 25 µg/mL. A fração U70 diminui a atividade da MMP9 na concentração de 25 µg/mL em 69% e a fração U50 nas concentrações 12,5 e 100 µg/mLem 40% e 33%, respectivamente. Ambras as frações, U50 e U70, em 100 µg/mL reduziram a produção de IL-6 em 26% e TNF- em 18% e 26%, respectivamente. A fração U70 foi capaz de reduzir a translocação de NF-kB na concentração 100 µg/mL quando comparada ao controle. A biogênese de corpúsculos lipídicos em macrófagos RAW 264.7 e primáriosincubados com a fração U70 e estimulados com LPS foi reduzida quando comparada com os macrófagos apenas estimulados. A fração U70 foi capaz de reduzir a peroxidação lipídica entre 33 e 55% nas concentrações entre 12,5 e 200 µg/mL. Os resultados sugerem que a fração U70 possui atividade anti-inflamatória potencial in vitro, sendo necessária a investigação de seus mecanismos de ação bem como sua aplicação em modelos animais e celulares para doenças inflamatórias crônicas.