Raphidiopsis raciborskii (CYRF-01): Habilidade de secreção de vesículas extracelulares em condições de creshabilidade de secreção de vesículas extracelulares em condições de crescimento normal e em resposta a estímulos ambientais em culturacimento normal e em resposta a estímulos ambientais em cultura

• Autor(a) principal: Zarantonello, Victor Claudio
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFJF
• Texto Completo: https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/12592
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Cianobactérias; Cultura; Vesículas extracelulares; Microscopia eletrônica de transmissão; Microscopia de luz; Ultraestrutura; Interação interespecífica; Vesículas de membrana externa; Cyanobacteria; Culture; extracelular vesicles; Transmission electron microscopy; Light microscopy; Ultrastructure; Interespecific interaction

A secreção de vesículas na superfície celular, denominadas coletivamente de vesículas extracelulares (VEs), é um processo biológico importante das células eucarióticas e procarióticas associado com atividades funcionais e transferência de DNA. Esse processo tem sido demonstrado em bactérias de ecossistemas aquáticos, mas ainda é pouco estudado em cianobactérias. No presente trabalho, investigamos se Raphidiopsis raciborskii (CYRF-01), espécie de cianobactéria de distribuição global e crescente em ambientes de água doce, é capaz de liberar VEs quando cultivada em condições normais ou exposta a estressores ambientais (radiação ultravioleta ou co-cultura com outra espécie de cianobactéria - Microcystis aeruginosa - MIRF-01). Culturas não axênicas de CYRF-01 foram submetidas à radiação ultravioleta (UVA + UVB) por 6 h, tratamento que induz danos estruturais a esta espécie ou co-cultivadas com MIRF-01 por 24 h. Após incubação, a densidade e a viabilidade celular foram analisadas e as amostras processadas para microscopia eletrônica de transmissão (MET). As análises ultraestruturais revelaram que R.raciborskii libera constitutivamente VEs a partir da membrana externa (VMEs) durante crescimento normal e amplifica essa capacidade em resposta a estressores ambientais. Ambas as situações induziram formação significativa VMEs por CYRF-01, comparado aos controles. Análises quantitativas por MET mostraram aumento de 48% (UV) e 60% (interação) nos números de VMEs. Considerando todos os grupos, as VMEs variaram de 20 a 300 nm de diâmetro, com a maioria mostrando diâmetros entre 20 e 140 nm. Análise molecular do envoltório celular revelou que a liberação de VMEs envolve exposição à fosfatidilserina, evento também observado nas células eucarióticas secretoras de VEs. Em conjunto, identificamos pela primeira vez que R.raciborskii tem competência para secretar VMEs e que, sob situações de estresse, a gênese dessas vesículas é aumentada. A capacidade ampliada das cianobactérias para liberar VMEs pode estar associada com respostas adaptativas às mudanças nas condições ambientais e pode contribuir na comunicação celular interespécies.