Fermentação líquida como estratégia para produção massal de conídios de Trichoderma

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Rezende, Larissa Castro de
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFLA
Texto Completo: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/13300
Resumo: The demand for biological products for the control of plant diseases is in constant growth. Among the main agents for the biocontrol of plant diseases, the Trichoderma spp. is prominent. The commercial products based on this antagonist are obtained by means of the fermentation in solid medium, which, despite presenting good quality spores, cannot meet the demand and is presented with lack of standardization. Fermentation in liquid medium is a more adequate method when compared to solid medium for the large-scale production of Trichoderma spp. In this work, the objective was to optimize the combination of variables that interfere in the production process of Trichoderma asperellum conidia, making its production in liquid medium feasible. Trials in Erlenmeyers were used to establish the best condition and composition of factors: pH, photoperiod, temperature, C:N relation and water activity for the production of conidia, colony forming units and increment of fungal biomass of the LQC-96 T. asperellum isolate. After optimization of the cultivation medium, the growth curve of the LQC-96 isolate was established, and new Trichoderma spp. isolates were tested under these conditions. Erlenmeyers of 250 mL of capacity, containing 90 mL of modified Czapek-Dox medium and 10 mL of T. asperellum inoculum suspension (3 x 106 conidia mL-1) were used. The Erlenmeyers were maintained in orbital agitation at 160 rpm under different temperatures and photoperiods, for seven days. After this period. the number of conidia in the suspension and the dry biomass weight were evaluated, also determining the number of colony forming units (CFU). Each Erlenmeyer represented a distinct treatment, submitted to the different levels of factors, as determined by the Plackett-Burman design (PB 12) and, posteriorly, by the Rotational Central Composite Design (RCCD). Of the five variables tested, only pH and C:N relation were significant to the production of conidia and submitted to the second design. The remaining variables were fixed. The best conditions for the production of T. asperellum conidia by liquid fermentation were under initial pH of 3.5 and C:N relation of 200:1, at 30oC, with no glycerol and under light for 24 hours. In addition to the conidia, the production of chlamydospores. The highest concentration of conidia was observed after seven days of agitation. The Trichoderma erinaceum isolates, T12 and T18, and T. harzianum isolate, T15, also produced high concentrations of conidia (108 conidia mL-1) under optimized conditions.
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Fermentation in liquid medium is a more adequate method when compared to solid medium for the large-scale production of Trichoderma spp. In this work, the objective was to optimize the combination of variables that interfere in the production process of Trichoderma asperellum conidia, making its production in liquid medium feasible. Trials in Erlenmeyers were used to establish the best condition and composition of factors: pH, photoperiod, temperature, C:N relation and water activity for the production of conidia, colony forming units and increment of fungal biomass of the LQC-96 T. asperellum isolate. After optimization of the cultivation medium, the growth curve of the LQC-96 isolate was established, and new Trichoderma spp. isolates were tested under these conditions. Erlenmeyers of 250 mL of capacity, containing 90 mL of modified Czapek-Dox medium and 10 mL of T. asperellum inoculum suspension (3 x 106 conidia mL-1) were used. The Erlenmeyers were maintained in orbital agitation at 160 rpm under different temperatures and photoperiods, for seven days. After this period. the number of conidia in the suspension and the dry biomass weight were evaluated, also determining the number of colony forming units (CFU). Each Erlenmeyer represented a distinct treatment, submitted to the different levels of factors, as determined by the Plackett-Burman design (PB 12) and, posteriorly, by the Rotational Central Composite Design (RCCD). Of the five variables tested, only pH and C:N relation were significant to the production of conidia and submitted to the second design. The remaining variables were fixed. The best conditions for the production of T. asperellum conidia by liquid fermentation were under initial pH of 3.5 and C:N relation of 200:1, at 30oC, with no glycerol and under light for 24 hours. In addition to the conidia, the production of chlamydospores. The highest concentration of conidia was observed after seven days of agitation. The Trichoderma erinaceum isolates, T12 and T18, and T. harzianum isolate, T15, also produced high concentrations of conidia (108 conidia mL-1) under optimized conditions.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)A demanda por produtos biológicos para controle de doenças de plantas cresce constantemente. Dentre os principais agentes de biocontrole de doenças de plantas, destaca-se o Trichoderma spp. Os produtos comerciais à base desse antagonista são obtidos a partir da fermentação em meio sólido, que apesar de esporos de boa qualidade, não conseguem atender a demanda, além da falta de padronização. A fermentação em meio líquido é o método mais adequado comparado ao meio sólido para produção em grande escala de Trichoderma spp. Objetivou-se, neste trabalho, otimizar a combinação de variáveis que interferem no processo de produção de conídios de Trichoderma asperellum, viabilizando sua produção por fermentação líquida. Ensaios em Erlenmeyers foram utilizados para estabelecer a melhor condição e composição dos fatores: pH, fotoperíodo, temperatura, relação C:N e atividade de água na produção de conídios, unidades formadoras de colônias e incremento de biomassa fúngica do isolado LQC-96 de T. asperellum. Após a otimização do meio de cultivo, foi estabelecida a curva de crescimento do isolado LQC-96 e novos isolados de Trichoderma spp. foram testados nessas condições. Foram utilizados Erlenmeyers de 250 ml de capacidade, contendo 90 ml de meio Czapek-Dox modifcado e 10 ml da suspensão de inóculo (3 x 106 conídios mL-1) de T. asperellum. Os Erlenmeyers foram mantidos em agitação orbital a 160 rpm sob diferentes temperaturas e fotoperíodos, por sete dias. Após esse período, foi avaliado o número de conídios da suspensão, o peso seco da biomassa e determinado o número de unidades formadoras de colônia (UFC). Cada Erlenmeyer representou um tratamento distinto, submetido aos diferentes níveis dos fatores testados, como determinado pelo delineamento do tipo Plackett-Burman (PB 12) e, posteriormente, pelo Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR). Das cinco variáveis testadas, apenas o pH e a relação C:N foram significativos para a produção de conídios e submetidas ao segundo delineamento. As demais variáveis tiveram suas condições fixadas. As melhores condições para produção de conídios de T. asperellum por fermentação líquida foram em pH inicial de 3,5, relação C:N do meio de 200:1, 30 °C, sem glicerol e sob luz por 24 h. Além dos conídios, foi observada a produção de clamidósporos. A maior concentração de conídios foi observada após sete dias de agitação. Os isolados de T12 e T18 de Trichoderma erinaceum e o isolado T15 de T. harzianum também produziram altas concentrações de conídios (10 8 conídios mL-1) nas condições otimizadas.Universidade Federal de LavrasPrograma de Pós-Graduação em FitopatologiaUFLAbrasilDepartamento de FitopatologiaBettiol, WagnerMedeiros, Flávio Henrique Vasconcelos deVieira, Bernardo de Almeida HalfeldMorandi, Marcelo Augusto BoechatRezende, Larissa Castro de2017-07-07T11:03:36Z2017-07-07T11:03:36Z2017-07-072014-06-16info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfREZENDE, L. C. de. Fermentação líquida como estratégia para produção massal de conídios de Trichoderma. 2017. 55 p. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fitopatologia)-Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2017.http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/13300porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLA2023-05-11T19:33:35Zoai:localhost:1/13300Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufla.br/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2023-05-11T19:33:35Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)false
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