Detecção de Campylobacter fetus em lavados prepuciais de touros pela PCR

• Autor(a) principal: Ana Paula Reinato Stynen
• Data de Publicação: 2000
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUDB-8BQGN8
• topic: Bovino; Lavado prepucial; Diagnóstico; Gene 23S rDNA; Campylobacter fetus; Campilobacteriose genital bovina; PCR; Equino Doenças; Infecções por campylobacter

Uma reação em cadeia da polimerase (PCR) baseada na seqüência 23S do DNA ribossomal foi desenvolvida para detecção de C. fetus em lavados prepuciais de touros. Foram avaliados três métodos de extração de DNA nos lavados prepuciais: o método do tiocianato de guanidina, o da lise alcalina e do Chelex 100. Para determinar a especificidade do teste, amostras de referência de Campylobacter SP, Helicobacter SP e Escherichia coli forma submetidas a PCR. Lavados prepuciais de 47 touros de uma propriedade com diagnóstico de Campilobacteriose Genital Bovina foram testados pela PCR e imunofluorescência direta (IFD). Somente amostras de C. fetus subps. venerealis e C. fetus subps. fetus foram amplificadas e o limite de detecção da PCR em lavado prepucial foi de 3,8 x 102 CFU/ml de C. fetus. A especificidade do produto amplificado foi confirmada pela análise de restrição frente à enzima Ava II. Oito touros foram considerados infectados pelas duas técnicas, porém três animais só foram positivos à PCR e sete somente na IFD. A PCR padronizada mostrou-se eficiente na detecção de C. fetus em amostras de lavado prepucial, nas condições trabalhadas.